| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 1 前言 | 第10-16页 |
| 1.1 花柄脱落的四个阶段 | 第10-13页 |
| 1.1.1 离区的发育与形成 | 第10-11页 |
| 1.1.2 脱落信号的接受 | 第11-12页 |
| 1.1.3 植物器官脱落的启动 | 第12页 |
| 1.1.4 离区保护层的形成 | 第12-13页 |
| 1.2 磷酸化对脱落的调控 | 第13-14页 |
| 1.2.1 MAPK | 第13页 |
| 1.2.2 EVR | 第13页 |
| 1.2.3 bZIP | 第13-14页 |
| 1.3 蛋白质磷酸化对激素作用的影响 | 第14页 |
| 1.3.1 生长素 | 第14页 |
| 1.3.2 乙烯 | 第14页 |
| 1.4 钙相关的磷酸化蛋白 | 第14-15页 |
| 1.4.1 钙调素转录因子 | 第15页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第15-16页 |
| 2 试验材料与方法 | 第16-25页 |
| 2.1 试验材料 | 第16-18页 |
| 2.1.1 试验材料与处理方法 | 第16页 |
| 2.1.2 试验仪器药品 | 第16-18页 |
| 2.2 试验方法 | 第18-25页 |
| 2.2.1 脱落率的调查 | 第18页 |
| 2.2.2 钙调蛋白转录因子家族在不同处理后不同时间的表达量分析 | 第18-19页 |
| 2.2.3 磷酸化钙调转录因子SR2L全长克隆 | 第19-20页 |
| 2.2.4 磷酸化钙调转录因子SR2L基因表达载体构建 | 第20-22页 |
| 2.2.5 电击法转化农杆菌 | 第22页 |
| 2.2.6 pB7YWG2- SR2L,pB7YWG2- SR2L~(S914A)转基因番茄的遗传转化 | 第22-23页 |
| 2.2.7 转基因番茄阳性植株的鉴定 | 第23-25页 |
| 3 结果 | 第25-38页 |
| 3.1 钙与乙烯对番茄花柄脱落的影响 | 第25页 |
| 3.2 磷酸酶抑制剂及对番茄花柄脱落的影响 | 第25-26页 |
| 3.3 钙调蛋白转录因子家族在不同处理后不同时间的表达量分析 | 第26-29页 |
| 3.4 磷酸化钙调转录因子SR2L全长克隆 | 第29-30页 |
| 3.5 磷酸化钙调转录因子SR2L基因表达载体构建转基因植株的获得 | 第30-34页 |
| 3.5.1 位点突变 | 第30页 |
| 3.5.2 位点突变PCR检测 | 第30-31页 |
| 3.5.3 重组质粒载体图谱 | 第31页 |
| 3.5.4 突变前后序列分析 | 第31-33页 |
| 3.5.5 表达载体PCR检测 | 第33页 |
| 3.5.6 转基因植株的获得 | 第33-34页 |
| 3.6 T0代转基因植株的鉴定 | 第34-35页 |
| 3.6.1 PCR检测结果 | 第34页 |
| 3.6.2 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测 | 第34-35页 |
| 3.6.3 激光共聚焦显微镜检测 | 第35页 |
| 3.7 T1代转基因植株的鉴定 | 第35-38页 |
| 3.7.1 PCR检测 | 第35-36页 |
| 3.7.2 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测 | 第36页 |
| 3.7.3 激光共聚焦显微镜检测 | 第36-37页 |
| 3.7.4 转基因植株脱落率调查 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| 4.1 磷酸化蛋白在乙烯调控脱落中的作用 | 第38页 |
| 4.2 SR2L基因调控脱落中的作用 | 第38-39页 |
| 4.3 基因转化技术 | 第39-40页 |
| 5 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| 致谢 | 第45页 |
