| 符号说明 | 第4-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第14-28页 |
| 1.1 植物中的MAPK级联信号途径 | 第14-15页 |
| 1.2 植物中的MAPK各组分的特点 | 第15-19页 |
| 1.2.1 植物中MAPKKK的结构特点 | 第15-17页 |
| 1.2.2 植物中MAPKK的结构特点 | 第17-18页 |
| 1.2.3 植物中MAPK的结构特点 | 第18-19页 |
| 1.3 植物中的MAPK级联信号途径的功能 | 第19-27页 |
| 1.3.1 植物中MAPK级联信号途径与生长发育 | 第20-21页 |
| 1.3.2 植物中MAPK级联信号途径与非生物胁迫 | 第21-22页 |
| 1.3.3 植物中MAPK级联信号途径与生物胁迫 | 第22-25页 |
| 1.3.4 植物中MAPK级联信号途径与活性氧 | 第25-26页 |
| 1.3.5 激素与植物免疫 | 第26-27页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第27-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-47页 |
| 2.1 实验材料 | 第28-30页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第28页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第28页 |
| 2.1.3 酶与各种生化试剂 | 第28页 |
| 2.1.4 PCR引物 | 第28-30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-47页 |
| 2.2.1 棉花幼苗的培养与处理 | 第30页 |
| 2.2.2 植物总RNA的提取 | 第30-31页 |
| 2.2.2.1 Trizol法提取烟草植株总RNA | 第30-31页 |
| 2.2.2.2 CTAB法提取棉花植株总RNA | 第31页 |
| 2.2.3 基因组DNA的提取 | 第31-33页 |
| 2.2.3.1 棉花基因组总DNA的提取 | 第31-32页 |
| 2.2.3.2 棉花基因组总DNA的纯化 | 第32页 |
| 2.2.3.3 小量法提取烟草植株的DNA | 第32-33页 |
| 2.2.4 cDNA第一条链的合成 | 第33页 |
| 2.2.5 cDNA纯化加尾 | 第33-34页 |
| 2.2.5.1 cDNA的纯化 | 第33页 |
| 2.2.5.2 纯化后cDNA的加尾反应 | 第33-34页 |
| 2.2.6 GhMPK11全长cDNA序列的获得 | 第34-37页 |
| 2.2.6.1 GhMPK11的中间片段的获得 | 第34-35页 |
| 2.2.6.2 5'RACE获得 5'端序列 | 第35页 |
| 2.2.6.3 3'RACE获得 3'端序列 | 第35-36页 |
| 2.2.6.4 全长cDNA序列的获得 | 第36-37页 |
| 2.2.7 GhMPK11全长DNA序列的获得 | 第37-38页 |
| 2.2.8 GhMPK11启动子序列的获得 | 第38页 |
| 2.2.9 PCR扩增片段的回收 | 第38页 |
| 2.2.10 目的片段与载体的连接 | 第38-39页 |
| 2.2.11 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第39页 |
| 2.2.11.1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第39页 |
| 2.2.11.2 大肠杆菌感受态细胞DH5a的转化 | 第39页 |
| 2.2.12 微量法提取大肠杆菌质粒DNA | 第39-40页 |
| 2.2.13 重组质粒的酶切验证 | 第40页 |
| 2.2.14 实时荧光定量PCR检测GhMPK11基因的表达 | 第40-41页 |
| 2.2.14.1 实时荧光定量PCR反应体系及反应条件 | 第40-41页 |
| 2.2.14.2 数据处理 | 第41页 |
| 2.2.15 基因枪法转化洋葱表皮细胞 | 第41-43页 |
| 2.2.15.1 GhMPK11-GFP载体的制备 | 第41-42页 |
| 2.2.15.2 基因枪微弹的准备 | 第42页 |
| 2.2.15.3 洋葱表皮材料的准备 | 第42-43页 |
| 2.2.15.4 基因枪转化 | 第43页 |
| 2.2.16 农杆菌介导的瞬时侵染 | 第43-44页 |
| 2.2.16.1 农杆菌感受态细胞的制备 | 第43页 |
| 2.2.16.2 农杆菌感受态细胞的转化 | 第43-44页 |
| 2.2.16.3 农杆菌介导的瞬时侵染 | 第44页 |
| 2.2.17 GhMPK11超表达烟草植株的获得 | 第44-45页 |
| 2.2.17.1 农杆菌介导的叶盘法转化烟草植株 | 第44页 |
| 2.2.17.2 再生植株的鉴定 | 第44-45页 |
| 2.2.18 GhMPK11启动子转拟南芥植株的获得 | 第45页 |
| 2.2.18.1 花絮侵染法获得转启动子的拟南芥植株 | 第45页 |
| 2.2.18.2 侵染植株的筛选鉴定 | 第45页 |
| 2.2.19 组织化学染色分析 | 第45-46页 |
| 2.2.19.1 GUS染色 | 第45页 |
| 2.2.19.2 3, 3'-二氨基联苯胺（3, 3'-diaminobenzidine, DAB）染色 | 第45页 |
| 2.2.19.3 氮蓝四唑（nitroblue tetrazolium, NBT）染色 | 第45-46页 |
| 2.2.20 高效液相色谱法测定赤霉素含量 | 第46页 |
| 2.2.20.1 标准溶液的配制 | 第46页 |
| 2.2.20.2 样品溶液的配制 | 第46页 |
| 2.2.20.3 色谱条件 | 第46页 |
| 2.2.21 网络信息资源 | 第46页 |
| 2.2.22 生物学软件 | 第46-47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-65页 |
| 3.1 棉花GhMPK11基因的分离 | 第47-49页 |
| 3.1.1 GhMPK11中间片段的分离 | 第47页 |
| 3.1.2 GhMPK115'非编码区的分离 | 第47页 |
| 3.1.3 GhMPK113'非编码区的分离 | 第47页 |
| 3.1.4 GhMPK11全长cDNA的分离 | 第47-48页 |
| 3.1.5 GhMPK11全长DNA的分离 | 第48页 |
| 3.1.6 GhMPK11启动子序列的分离 | 第48-49页 |
| 3.2 GhMPK11的序列分析 | 第49-52页 |
| 3.2.1 GhMPK11全长cDNA与DNA序列分析 | 第49-50页 |
| 3.2.2 GhMPK11编码的蛋白质序列分析 | 第50-52页 |
| 3.3 棉花GhMPK11的亚细胞定位分析 | 第52-54页 |
| 3.4 GhMPK11的表达特性分析 | 第54-56页 |
| 3.4.1 GhMPK11在棉花不同组织部位的表达特性 | 第54页 |
| 3.4.2 信号分子对GhMPK11 mRNA表达水平的影响 | 第54页 |
| 3.4.3 生物胁迫对GhMPK11 mRNA表达水平的影响 | 第54-56页 |
| 3.5 GhMPK11启动子分析 | 第56-57页 |
| 3.5.1 GhMPK11启动子序列分析 | 第56页 |
| 3.5.2 GhMPK11启动子活性分析 | 第56-57页 |
| 3.6 GhMPK11基因相关的功能分析 | 第57-65页 |
| 3.6.1 GhMPK11超表达转基因本生烟植株的获得 | 第57-58页 |
| 3.6.2 GhMPK11超表达转基因本生烟植株的生物学功能分析 | 第58-65页 |
| 3.6.2.1 GhMPK11影响转基因本生烟植株叶片的叶绿素含量 | 第58-59页 |
| 3.6.2.2 超表达GhMPK11增强转基因本生烟植株对病原菌的敏感性 | 第59-60页 |
| 3.6.2.3 GhMPK11通过GA信号途径增强转基因烟草植株对病原菌的敏感性 | 第60-62页 |
| 3.6.2.4 外施GA3加速了植株对立氏丝核真菌的超敏性反应 | 第62页 |
| 3.6.2.5 超表达GhMPK11影响抗性相关基因的表达及抗氧化物酶的活性 | 第62-63页 |
| 3.6.2.5 超表达GhMPK11降低转基因植株对氧化损伤的抵抗力 | 第63-65页 |
| 4 讨论 | 第65-69页 |
| 5 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第82页 |
