摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
第一章 文献综述 | 第9-37页 |
1.1 等温核酸扩增技术 | 第9-19页 |
1.1.1 链置换扩增 | 第10-12页 |
1.1.2 滚环扩增 | 第12-14页 |
1.1.3 环介导等温扩增 | 第14-16页 |
1.1.4 依赖解旋酶的等温扩增 | 第16-18页 |
1.1.5 交叉引物等温扩增技术 | 第18-19页 |
1.2 基于邻近效应的检测方法 | 第19-24页 |
1.2.1 基于邻近效应对蛋白质的检测方法 | 第20-22页 |
1.2.2 基于邻近效应对核酸的检测方法 | 第22-24页 |
1.3 基于荧光探针的核酸检测方法 | 第24-34页 |
1.3.1 基于Taq Man探针的核酸检测方法 | 第25-27页 |
1.3.2 基于分子信标的核酸检测方法 | 第27-31页 |
1.3.3 基于荧光共振能量转移原理的核酸检测方法 | 第31-34页 |
1.4 分子生物学技术在副溶血性弧菌检测中的应用 | 第34-35页 |
1.4.1 副溶血性弧菌及其危害简介 | 第34页 |
1.4.2 副溶血性弧菌检测方法 | 第34-35页 |
1.5 本论文的研究意义与主要内容 | 第35-37页 |
第二章 基于邻近效应对DNA检测的新方法研究 | 第37-56页 |
2.1 引言 | 第37页 |
2.2 实验设计 | 第37-42页 |
2.2.1 实验方案一 | 第38-40页 |
2.2.1.1 实验原理 | 第38-39页 |
2.2.1.2 DNA链的设计 | 第39-40页 |
2.2.2 实验方案二 | 第40-42页 |
2.2.2.1 实验原理 | 第40-41页 |
2.2.2.2 DNA链的设计 | 第41-42页 |
2.3 实验部分 | 第42-45页 |
2.3.1 仪器与试剂 | 第42-43页 |
2.3.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳的制备 | 第43-44页 |
2.3.4 实时荧光检测体系 | 第44-45页 |
2.3.4.1 实验方案一的反应体系 | 第44-45页 |
2.3.4.2 实验方案二的反应体系 | 第45页 |
2.4 结果与讨论 | 第45-55页 |
2.4.1 实验方案一 | 第45-49页 |
2.4.1.1 引物P的序列优化 | 第45-46页 |
2.4.1.2 副溶血性弧菌的检测 | 第46-49页 |
2.4.2 实验方案二 | 第49-55页 |
2.4.2.1 实验机理的验证 | 第49-51页 |
2.4.2.2 引物P与分子信标结合长度的优化 | 第51-52页 |
2.4.2.3 引物P的浓度优化 | 第52-53页 |
2.4.2.4 副溶血性弧菌的检测 | 第53-55页 |
2.5 小结 | 第55-56页 |
第三章 基于荧光探针检测双链DNA方法的研究 | 第56-67页 |
3.1 引言 | 第56-57页 |
3.2 实验部分 | 第57-60页 |
3.2.1 仪器与试剂 | 第57-58页 |
3.2.2 溶液的配制 | 第58页 |
3.2.3 质粒DNA及副溶血性弧菌基因组DNA的提取 | 第58-60页 |
3.2.3.1 碱裂解法提取PBS质粒DNA | 第58-59页 |
3.2.3.2 副溶血性弧菌基因组DNA的提取 | 第59-60页 |
3.2.4 双链荧光探针的杂交 | 第60页 |
3.2.5 实时荧光检测体系 | 第60页 |
3.3 结果与讨论 | 第60-65页 |
3.3.1 实验原理 | 第60-62页 |
3.3.2 DNA链的设计 | 第62页 |
3.3.3 灵敏度检测 | 第62-63页 |
3.3.4 特异性检测 | 第63-64页 |
3.3.5 抗干扰检测 | 第64-65页 |
3.4 小结 | 第65-67页 |
结论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-77页 |
附录:论文中使用的缩略词 | 第77-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
攻读硕士学位期间发表的论文目录 | 第79-80页 |