摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第1章 文献综述 | 第10-18页 |
1.1 MADS-box基因的研究进展 | 第10-16页 |
1.1.1 MADS-box基因的命名 | 第10页 |
1.1.2 MADS-box基因的结构与分类 | 第10-11页 |
1.1.3 MADS-box基因进化 | 第11-12页 |
1.1.4 植物MADS-box基因的相关功能 | 第12-16页 |
1.2 AP1/FUL亚家族 | 第16-18页 |
第2章 引言 | 第18-20页 |
2.1 研究背景及意义 | 第18-19页 |
2.2 技术路线 | 第19-20页 |
第3章 矮牵牛FBP29基因的克隆及序列分析 | 第20-36页 |
3.1 实验材料与试剂 | 第20-21页 |
3.1.1 植物材料 | 第20页 |
3.1.2 菌株与载体 | 第20页 |
3.1.3 主要仪器 | 第20页 |
3.1.4 主要试剂 | 第20页 |
3.1.5 主要试剂和常用培养基配制 | 第20-21页 |
3.2 实验方法 | 第21-28页 |
3.2.1 植物材料的种植 | 第21页 |
3.2.2 矮牵牛营养器官cDNA的获得 | 第21-23页 |
3.2.3 PCR引物设计及PCR扩增 | 第23-26页 |
3.2.4 回收目的DNA片段 | 第26-27页 |
3.2.6 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第27页 |
3.2.7 大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第27-28页 |
3.2.8 转化子的鉴定 | 第28页 |
3.2.9 矮牵牛FBP29基因的生物信息学分析 | 第28页 |
3.3 结果与分析 | 第28-34页 |
3.3.1 矮牵牛基因组RNA的检测 | 第28-29页 |
3.3.2 矮牵牛FBP29基因的克隆 | 第29页 |
3.3.3 RACE技术克隆目的基因5'端和3'端cDNA全长序列 | 第29-30页 |
3.3.4 FBP29基因组内含子的克隆 | 第30-31页 |
3.3.5 FBP29基因Blastp分析 | 第31-32页 |
3.3.6 FBP29基因的进化树分析 | 第32-33页 |
3.3.7 FBP29基因编码蛋白的同源分析 | 第33-34页 |
3.4 讨论 | 第34-36页 |
第4章 矮牵牛FBP29转录的半定量分析 | 第36-40页 |
4.1 实验材料与试剂 | 第36页 |
4.1.1 实验材料 | 第36页 |
4.1.2 主要试剂 | 第36页 |
4.1.3 主要仪器 | 第36页 |
4.2 实验方法 | 第36-37页 |
4.2.1 植物的取材 | 第36页 |
4.2.2 cDNA的获得 | 第36-37页 |
4.2.3 矮牵牛FBP29表达的半定量分析 | 第37页 |
4.3 结果与分析 | 第37-39页 |
4.3.1 总RNA提取与质量检测 | 第37页 |
4.3.2 FBP29基因表达特性分析 | 第37-39页 |
4.4 讨论 | 第39-40页 |
第5章 矮牵牛FBP29基因的超量表达和CREST沉默研究 | 第40-56页 |
5.1 实验材料 | 第40-41页 |
5.1.1 植物材料 | 第40页 |
5.1.2 菌株与载体 | 第40页 |
5.1.3 主要仪器 | 第40页 |
5.1.4 主要试剂 | 第40页 |
5.1.5 常用试剂配制 | 第40-41页 |
5.1.6 矮牵牛转化基本培养基 | 第41页 |
5.2 实验方法 | 第41-46页 |
5.2.1 植物材料的处理 | 第41页 |
5.2.2 表达载体的构建 | 第41-44页 |
5.2.3 电击法转化农杆菌感受态细胞 | 第44-45页 |
5.2.4 农杆菌介导转化矮牵牛 | 第45-46页 |
5.2.5 转基因植株的检测 | 第46页 |
5.2.6 转基因植株表型观察 | 第46页 |
5.3 结果与分析 | 第46-53页 |
5.3.1 FBP29基因超量表达载体的构建 | 第46-47页 |
5.3.2 FBP29基因CREST沉默表达载体的构建 | 第47-48页 |
5.3.3 转基因植株的获得和检测 | 第48-53页 |
5.4 讨论 | 第53-56页 |
第七章 总结 | 第56-58页 |
7.1 结论 | 第56页 |
7.2 下一步计划 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-68页 |
缩略词表 | 第68-70页 |
致谢 | 第70-72页 |
附录 | 第72页 |