| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-21页 |
| 1.1 植物真菌病害的研究进展 | 第13页 |
| 1.2 植物抗病机制的研究 | 第13-14页 |
| 1.3 PGIP的研究进展 | 第14-21页 |
| 1.3.1 PGIP的发现及分布 | 第15页 |
| 1.3.2 PGIP的结构特点 | 第15-16页 |
| 1.3.3 PGIP的功能以及作用机理 | 第16-17页 |
| 1.3.4 PGIP基因的表达模式 | 第17-18页 |
| 1.3.5 PGIP基因的表达调控 | 第18-19页 |
| 1.3.6 PGIP在抗病育种中的应用 | 第19-20页 |
| 1.3.7 PGIP研究存在的问题与展望 | 第20-21页 |
| 第二章 引言 | 第21-23页 |
| 2.1 研究背景及意义 | 第21页 |
| 2.2 研究内容 | 第21-22页 |
| 2.2.1 桑树MaPGIP1基因克隆与生物信息学分析 | 第21页 |
| 2.2.2 桑树MaPGIP1基因组织表达分析及对水杨酸的响应 | 第21页 |
| 2.2.3 桑树MaPGIP1基因原核表达与功能分析 | 第21-22页 |
| 2.3 研究技术路线 | 第22-23页 |
| 第三章 桑树MaPGIP1基因克隆与生物信息学分析 | 第23-35页 |
| 3.1 材料和试剂 | 第23-24页 |
| 3.1.1 试验材料、菌株及载体 | 第23页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第23页 |
| 3.1.3 主要培养基及缓冲液 | 第23-24页 |
| 3.1.4 实验仪器与设备 | 第24页 |
| 3.2 试验方法 | 第24-28页 |
| 3.2.1 桑树MaPGIP1基因引物设计 | 第24页 |
| 3.2.2 RNA的提取与检测 | 第24-25页 |
| 3.2.3 RNA的纯化 | 第25页 |
| 3.2.4 cDNA第一链的合成 | 第25-26页 |
| 3.2.5 桑树MaPGIP1基因的PCR扩增 | 第26页 |
| 3.2.6 PCR产物的回收、连接、转化与验证 | 第26-27页 |
| 3.2.7 桑树MaPGIP1基因的生物信息学分析 | 第27-28页 |
| 3.3 结果与分析 | 第28-34页 |
| 3.3.1 桑树MaPGIP1基因的克隆 | 第28页 |
| 3.3.2 克隆片段的序列测定 | 第28-30页 |
| 3.3.3 MaPGIP1编码氨基酸序列的多重比对 | 第30页 |
| 3.3.4 MaPGIP1分子进化关系分析 | 第30-31页 |
| 3.3.5 MaPGIP1蛋白的生物信息学分析 | 第31-34页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第34-35页 |
| 第四章 桑树MaPGIP1基因表达分析及对非生物诱导响应 | 第35-41页 |
| 4.1 材料及试剂 | 第35页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第35页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第35页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第35页 |
| 4.2 试验方法 | 第35-37页 |
| 4.2.1 桑树材料的处理 | 第35-36页 |
| 4.2.2 桑树各组织总RNA的提取与纯化 | 第36页 |
| 4.2.3 桑树总RNA反转录为cDNA | 第36页 |
| 4.2.4 MaPGIP1基因的定量PCR分析 | 第36-37页 |
| 4.3 结果与分析 | 第37-40页 |
| 4.3.1 MaPGIP1基因组织表达分析 | 第37页 |
| 4.3.2 MaPGIP1基因在果实发育过程中的表达分析 | 第37-38页 |
| 4.3.3 水杨酸(SA)对MaPGIP1基因表达的影响 | 第38页 |
| 4.3.4 脱落酸(ABA)对MaPGIP1基因表达的影响 | 第38-39页 |
| 4.3.5 机械损伤对MaPGIP1基因表达的影响 | 第39页 |
| 4.3.6 低温(4℃)对MaPGIP1基因表达的影响 | 第39-40页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第40-41页 |
| 第五章 桑树MaPGIPl基因原核表达与功能分析 | 第41-59页 |
| 5.1 材料和试剂 | 第41-45页 |
| 5.1.1 试验材料、菌株及载体 | 第41页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第41页 |
| 5.1.3 主要培养基 | 第41-42页 |
| 5.1.4 主要溶液 | 第42-44页 |
| 5.1.5 主要仪器与设备 | 第44-45页 |
| 5.2 试验方法 | 第45-51页 |
| 5.2.1 MaPGIP1基因原核表达载体的构建 | 第45-47页 |
| 5.2.2 重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态 | 第47页 |
| 5.2.3 目的蛋白的诱导表达 | 第47页 |
| 5.2.4 目的蛋白的SDS-PAGE分析 | 第47-48页 |
| 5.2.5 蛋白纯化及Western blot检测 | 第48-49页 |
| 5.2.6 重组蛋白的复性 | 第49-50页 |
| 5.2.7 MaPGIP1蛋白对果桑肥大性菌核病菌PG(CsPG)的抑制作用 | 第50-51页 |
| 5.2.8 MaPGIP1蛋白性质分析 | 第51页 |
| 5.3 结果与分析 | 第51-57页 |
| 5.3.1 MaPGIP1原核表达载体的构建和重组子鉴定 | 第51-52页 |
| 5.3.2 MaPGIP1在大肠杆菌BL21中的表达 | 第52-53页 |
| 5.3.3 融合蛋白的纯化及Western blot检测 | 第53页 |
| 5.3.4 MaPGIP1蛋白的复性及对果桑肥大性菌核病菌丝侵染油菜叶片的抑制效果 | 第53-55页 |
| 5.3.5 MaPGIP1蛋白对CsPG的抑制作用 | 第55-56页 |
| 5.3.6 MaPGIP1蛋白特征分析 | 第56-57页 |
| 5.4 小结与讨论 | 第57-59页 |
| 第六章 全文总结 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 附录 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69-71页 |
| 发表论文及参研课题 | 第71页 |
