| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-20页 |
| 1.1 MIKC型蛋白的结构及特点 | 第12-13页 |
| 1.1.1 M域 | 第12-13页 |
| 1.1.2 I域 | 第13页 |
| I.1.3 K域 | 第13页 |
| 1.1.4 C域 | 第13页 |
| 1.2 SOC1花期调控的分子机制 | 第13-15页 |
| 1.2.1 光周期途径的成花信号对SOC1的调控 | 第13-14页 |
| 1.2.2 赤霉素途径的成花信号对SOC1的调控 | 第14页 |
| 1.2.3 春化途径和自主途径的成花信号对SOC1的调控 | 第14页 |
| 1.2.4 AGL24对SOC1的正反馈调控 | 第14页 |
| 1.2.5 年龄相关型因子对SOC1的调控 | 第14-15页 |
| 1.3 SOC1蛋白特性及功能 | 第15-16页 |
| 1.3.1 SOC1蛋白的特性 | 第15页 |
| 1.3.2 SOC1调控花分生组织发育 | 第15-16页 |
| 1.3.3 SOC1蛋白的其他功能 | 第16页 |
| 1.3.4 SOC1功能的分化 | 第16页 |
| 1.4 蛋白相互作用的研究方法 | 第16-20页 |
| 1.4.1 酵母双杂交系统 | 第17-18页 |
| 1.4.2 双分子荧光互补技术 | 第18页 |
| 1.4.3 蛋白互作研究的其他方法 | 第18-20页 |
| 第二章 引言 | 第20-22页 |
| 第三章 芥菜开花整合子SOC1的克隆及其编码蛋白与SVP、FLC蛋白互作 | 第22-42页 |
| 3.1 材料 | 第22-23页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第22页 |
| 3.1.2 菌种及载体 | 第22页 |
| 3.1.3 试验试剂 | 第22页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第22-23页 |
| 3.2 方法 | 第23-31页 |
| 3.2.1 试验试剂的配制 | 第23-24页 |
| 3.2.2 引物设计 | 第24-25页 |
| 3.2.3 SOC1基因的克隆 | 第25-27页 |
| 3.2.4 生物信息学分析 | 第27页 |
| 3.2.5 酵母双杂交系统检测SOC1与SVP、FLC蛋白相互作用 | 第27-29页 |
| 3.2.6 BiFC技术检测SOC1与SVP、FLC相互作用 | 第29-31页 |
| 3.3 结果与分析 | 第31-42页 |
| 3.3.1 SOC1基因片段的克隆 | 第31-32页 |
| 3.3.2 芥菜SOC1的序列分析 | 第32-35页 |
| 3.3.3 酵母表达载体的构建 | 第35页 |
| 3.3.4 自激活和毒性检测 | 第35-37页 |
| 3.3.5 BiFC重组表达载体的构建 | 第37-38页 |
| 3.3.6 蛋白相互作用鉴定 | 第38-42页 |
| 第四章 芥菜SOC1突变体的构建及其与SVP蛋白互作 | 第42-52页 |
| 4.1 材料 | 第42页 |
| 4.2 方法 | 第42-44页 |
| 4.2.1 试验试剂的配制 | 第42页 |
| 4.2.2 蛋白互作位点的预测 | 第42页 |
| 4.2.3 SOC1突变体扩增引物设计 | 第42-43页 |
| 4.2.4 基因SOC1突变体的构建 | 第43-44页 |
| 4.2.5 酵母双杂交系统筛选SOC1突变体与SVP相互作用位点 | 第44页 |
| 4.2.6 BiFC技术筛选SOC1突变体与SVP相互作用位点 | 第44页 |
| 4.3 结果与分析 | 第44-52页 |
| 4.3.1 基因SOC1突变体的构建 | 第44-45页 |
| 4.3.2 SOC1突变体酵母表达载体的构建 | 第45页 |
| 4.3.3 重组质粒的测序结果 | 第45-46页 |
| 4.3.4 自激活和毒性检测 | 第46-47页 |
| 4.3.5 BiFC重组表达载体的构建 | 第47-48页 |
| 4.3.6 SOC1突变体与SVP蛋白互作位点筛选 | 第48-52页 |
| 第五章 芥菜SVP突变体构建及其与SOC1蛋白互作 | 第52-60页 |
| 5.1 材料 | 第52页 |
| 5.2 方法 | 第52-54页 |
| 5.2.1 试验试剂的配制 | 第52页 |
| 5.2.2 蛋白互作位点的预测 | 第52页 |
| 5.2.3 SVP突变体扩增引物设计 | 第52-53页 |
| 5.2.4 SVP突变体的构建 | 第53页 |
| 5.2.5 酵母双杂交系统筛选SVP突变体与SOC1相互作用位点 | 第53-54页 |
| 5.3 结果与分析 | 第54-60页 |
| 5.3.1 SVP突变体的构建 | 第54页 |
| 5.3.2 SVP突变体酵母表达载体的构建 | 第54页 |
| 5.3.3 重组质粒的测序结果 | 第54-55页 |
| 5.3.4 自激活和毒性检测 | 第55-56页 |
| 5.3.5 BiFC重组表达载体的构建 | 第56-57页 |
| 5.3.6 SVP突变体与SOC1蛋白蛋白互作位点筛选 | 第57-60页 |
| 第六章 SOC1与SVP蛋白互作强度分析 | 第60-62页 |
| 6.1 材料 | 第60页 |
| 6.2 方法 | 第60页 |
| 6.2.1 试验试剂的配制 | 第60页 |
| 6.2.2 β-半乳糖苷酶活性测定 | 第60页 |
| 6.3 结果与分析 | 第60-62页 |
| 6.3.1 SOC1点突变与SVP蛋白互作强度分析 | 第60-61页 |
| 6.3.2 SVP点突变与SOC1蛋白互作强度分析 | 第61-62页 |
| 第七章 讨论 | 第62-64页 |
| 7.1 芥菜SOC1与SVP及FLC蛋白互作研究 | 第62页 |
| 7.2 芥菜SOC1与SVP蛋白互作关键氨基酸位点预测及研究 | 第62-64页 |
| 第八章 结论 | 第64-66页 |
| 8.1 成功亚克隆了芥菜SOC1基因 | 第64页 |
| 8.2 芥菜SOC1与SVP相互作用的鉴定 | 第64页 |
| 8.3 芥菜SOC1与FLC相互作用的鉴定 | 第64页 |
| 8.4 芥菜SOC1 K域的5个突变体和SVP K域的4个突变体的构建 | 第64页 |
| 8.5 芥菜SOC1 K域的5个突变体与SVP相互作用的鉴定 | 第64页 |
| 8.6 芥菜SVP K域的4个突变体与SOC1相互作用的鉴定 | 第64-65页 |
| 8.7 作强度分析 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 附录 | 第72-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
| 项目资助 | 第78-80页 |
| 在校期间发表论文 | 第80页 |
