| 致谢 | 第4-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-15页 |
| 1.1 菊花研究概述 | 第8-9页 |
| 1.1.1 菊花的抗寒性 | 第8页 |
| 1.1.2 菊花的抗寒品种筛选 | 第8-9页 |
| 1.2 细胞膜与植物抗寒性的关系 | 第9-10页 |
| 1.2.1 膜系统和膜脂组分的变化与抗寒性的关系 | 第9-10页 |
| 1.2.2 磷脂与抗寒性的关系 | 第10页 |
| 1.3 脂肪酸与植物抗寒性的关系 | 第10-11页 |
| 1.3.1 脂肪酸成分的变化与植物抗寒性的关系 | 第11页 |
| 1.3.2 脂肪酸不饱和度的变化与植物抗寒性的关系 | 第11页 |
| 1.4 脂肪酸去饱和酶基因与植物抗寒性的关系 | 第11-12页 |
| 1.4.1 ?9 硬脂酰-ACP（Acyl-ACP）去饱和酶基因与植物抗寒性的关系 | 第12页 |
| 1.5 实时荧光定量PCR的应用 | 第12-15页 |
| 1.5.1 实时荧光定量在筛选内参基因中的应用 | 第12-13页 |
| 1.5.2 实时荧光定量在定量表达中的应用 | 第13页 |
| 1.5.3 实时荧光定量在菊花中的应用 | 第13-15页 |
| 2 引言 | 第15-16页 |
| 3 材料与方法 | 第16-24页 |
| 3.1 试验材料与处理 | 第16-18页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第16页 |
| 3.1.2 材料处理 | 第16页 |
| 3.1.3 菌株与载体 | 第16页 |
| 3.1.4 工具酶及生化试剂 | 第16页 |
| 3.1.5 主要仪器 | 第16页 |
| 3.1.6 PCR引物 | 第16-17页 |
| 3.1.7 药品的配制 | 第17-18页 |
| 3.2 试验方法 | 第18-24页 |
| 3.2.1 总RNA的提取与检测 | 第18-19页 |
| 3.2.1.1 试剂和器皿的准备 | 第18页 |
| 3.2.1.2 采用改良CTAB法提取RNA | 第18页 |
| 3.2.1.3 RNA琼脂糖凝胶电泳检测 | 第18-19页 |
| 3.2.1.4 RNA纯度及浓度检测 | 第19页 |
| 3.2.2 RNA反转录 | 第19页 |
| 3.2.3 中间片段的获得 | 第19-20页 |
| 3.2.4 3’RACE获得 3’端序列 | 第20页 |
| 3.2.5 5’RACE获得 5’端序列 | 第20-21页 |
| 3.2.6 菊花SAD基因全长的克隆 | 第21页 |
| 3.2.7 菊花SAD基因的连接及转化 | 第21-22页 |
| 3.2.7.1 连接 | 第21-22页 |
| 3.2.7.2 转化及克隆筛选 | 第22页 |
| 3.2.8 基因序列分析 | 第22-23页 |
| 3.2.9 SAD基因在低温胁迫下的表达分析 | 第23-24页 |
| 4 结果与分析 | 第24-33页 |
| 4.1 菊花脂肪酸去饱和酶基因的克隆 | 第24-27页 |
| 4.1.1 菊花叶片RNA的提取及反转录 | 第24页 |
| 4.1.2 SAD基因中间片段的克隆 | 第24-25页 |
| 4.1.3 SAD基因 3’端的克隆 | 第25页 |
| 4.1.4 SAD基因 5’端的克隆 | 第25-26页 |
| 4.1.5 SAD基因全长的克隆 | 第26-27页 |
| 4.2 菊花SAD基因序列同源性分析及分子进化树构建 | 第27-29页 |
| 4.2.1 菊花SAD基因序列同源性分析及分子进化树构建 | 第27-29页 |
| 4.3 菊花SAD基因编码蛋白的生物信息学分析 | 第29-32页 |
| 4.4 不同温度下菊花CmSAD基因在叶片和根系中的表达 | 第32-33页 |
| 5 结果与讨论 | 第33-35页 |
| 5.1 结果 | 第33页 |
| 5.2 讨论 | 第33-35页 |
| 5.2.1 CmSAD基因序列特征分析 | 第33-34页 |
| 5.2.2 CmSAD基因的表达分析 | 第34-35页 |
| 参考文献 | 第35-41页 |
| 英文摘要 | 第41-42页 |
