| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 综述 | 第13-41页 |
| 1.1 赖氨酸甲基化修饰 | 第13-24页 |
| 1.1.1 组蛋白赖氨酸甲基化修饰 | 第13-14页 |
| 1.1.2 非组蛋白甲基化的研究情况 | 第14-16页 |
| 1.1.3 赖氨酸甲基转移酶的分类 | 第16-18页 |
| 1.1.4 SMYD家族的研究进展 | 第18-22页 |
| 1.1.5 SMYD的结构及底物选择性的比较 | 第22-24页 |
| 1.2 TGF-β超家族信号通路 | 第24-39页 |
| 1.2.1 配体的种类和结构 | 第26-28页 |
| 1.2.2 受体 | 第28-33页 |
| 1.2.3 信号转导蛋白SMADs | 第33-38页 |
| 1.2.4 TGF-β和BMP通路的下游靶基因 | 第38-39页 |
| 本研究的目的与意义 | 第39-41页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第41-64页 |
| 2.1 实验材料 | 第41-48页 |
| 常用细胞株 | 第41页 |
| 常用细胞培养基 | 第41页 |
| 常用试剂 | 第41-42页 |
| 常用实验仪器 | 第42页 |
| 常用质粒 | 第42-43页 |
| 常用抗体 | 第43页 |
| 常用siRNA/shRNA/guide-SMYD2序列 | 第43-44页 |
| 引物序列 | 第44-45页 |
| 常用溶液 | 第45-48页 |
| 2.2 实验方法 | 第48-64页 |
| 2.2.1 分子克隆相关实验方法 | 第48-54页 |
| 2.2.2 细胞培养及转染方法 | 第54-55页 |
| 2.2.3 病毒包装及浓缩 | 第55-56页 |
| 2.2.4 总RNA抽提、反转录Cdna、荧光定量PCR | 第56-58页 |
| 2.2.5 免疫共沉淀 | 第58-59页 |
| 2.2.6 His标签融合蛋白的表达与纯化 | 第59-60页 |
| 2.2.7 SDS-PAGE及免疫印迹 | 第60-62页 |
| 2.2.8 免疫荧光染色 | 第62-63页 |
| 2.2.9 体外甲基化反应 | 第63-64页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第64-95页 |
| 3.1 实验结果 | 第64-87页 |
| 3.1.1 SMYDs的siRNA检测 | 第64-65页 |
| 3.1.2 筛选对TGF-β和BMP通路有影响的SMYDs | 第65-68页 |
| 3.1.3 确认SMYD2对BMP通路的特异性调控 | 第68-73页 |
| 3.1.4 SMYD2的缺失会导致SMAD1的入核减少 | 第73-75页 |
| 3.1.5 SMYD2的缺失导致R-SMAD与Co-SMAD复合体的形成减少 | 第75-76页 |
| 3.1.6 SMYD2对BMP通路的调控依赖于它的甲基化酶活性 | 第76-77页 |
| 3.1.7 SMYD2与BMP信号通路蛋白存在广泛的相互作用 | 第77-78页 |
| 3.1.8 SMYD2与SMAD1的相互作用受通路激活的影响 | 第78-80页 |
| 3.1.9 SMYD2主要存在于细胞质中,不随BMP通路激活而入核 | 第80页 |
| 3.1.10 所有参与通路激活的蛋白中只有BMPR2被SMYD2甲基化 | 第80-82页 |
| 3.1.11 SMYD2在体外也能甲基化BMPR2受体 | 第82-83页 |
| 3.1.12 SMYD2能够甲基化BMPR2的激酶活性区域 | 第83-84页 |
| 3.1.13 BMPR2的甲基化修饰在BMP通路激活时发生 | 第84-85页 |
| 3.1.14 SMYDs中只有SMYD2能甲基化BMPR2,但SMYDs都与BMPR2相互作用 | 第85-87页 |
| 3.2 讨论 | 第87-95页 |
| 3.2.1 SMYD2对BMP通路激活具有重要调控作用 | 第87-88页 |
| 3.2.2 SMYD2对BMP通路的调控依赖于其甲基转移酶活性 | 第88-89页 |
| 3.2.3 BMP信号通路的激活促进SMYD2与SMAD1的相互作用 | 第89页 |
| 3.2.4 SMYD2能够催化BMPR2的激酶活性区发生赖氨酸甲基化 | 第89-90页 |
| 3.2.5 SMYD2调控信号通路的内在分子机制 | 第90-92页 |
| 3.2.6 课题展望 | 第92-95页 |
| 附录 | 第95-96页 |
| 攻读博士学位期间所取得的科研成果 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
