| 摘要 | 第7-9页 |
| 文献综述 | 第9-17页 |
| 1 CD40L概述 | 第9-14页 |
| 1.1 CD40L基因及蛋白结构 | 第9-10页 |
| 1.2 CD40L与受体的相互作用 | 第10-11页 |
| 1.3 CD40L的生物学功能 | 第11-12页 |
| 1.4 CD40L的佐剂效应研究进展 | 第12-14页 |
| 2 巴斯德毕赤酵母表达系统表达外源基因的影响因素 | 第14-15页 |
| 2.1 外源基因的性质 | 第14页 |
| 2.2 培养条件 | 第14-15页 |
| 3 免疫佐剂 | 第15-17页 |
| 3.1 免疫佐剂的作用机制 | 第16页 |
| 3.2 佐剂的种类 | 第16-17页 |
| 前言 | 第17-18页 |
| 第一章 猪源CD40L的真核表达和纯化 | 第18-29页 |
| 1 试验材料及仪器 | 第18-21页 |
| 1.1 主要药品及试剂 | 第18页 |
| 1.2 菌种 | 第18页 |
| 1.3 试剂溶液的配制 | 第18-20页 |
| 1.4 主要试验仪器 | 第20-21页 |
| 2 试验方法 | 第21-24页 |
| 2.1 猪源CD40L蛋白的表达 | 第21页 |
| 2.2 蛋白纯化 | 第21-24页 |
| 3 结果 | 第24-27页 |
| 3.1 猪源CD40L蛋白的Western-Blot鉴定 | 第24-26页 |
| 3.2 猪源CD40L的大量表达及纯化 | 第26-27页 |
| 4 分析与讨论 | 第27-29页 |
| 第二章 猪源CD40L免疫活性体外实验 | 第29-44页 |
| 1 试剂材料及仪器 | 第29-30页 |
| 1.1 主要药品及试剂 | 第29页 |
| 1.2 试剂溶液的配制 | 第29-30页 |
| 1.3 主要试验仪器 | 第30页 |
| 2 试验方法 | 第30-36页 |
| 2.1 原代猪肺泡巨噬细胞(PAM)的制备 | 第30页 |
| 2.2 猪肺泡巨噬细胞(PAM)的复苏 | 第30页 |
| 2.3 鉴定原代猪肺泡巨噬细胞(PAM)的CD40~+ | 第30-31页 |
| 2.4 猪源CD40L蛋白的荧光标记 | 第31-32页 |
| 2.5 标记蛋白与原代猪肺泡巨噬细胞(PAM)的结合作用观察 | 第32页 |
| 2.6 MTT法测定pCD40L蛋白对原代猪肺泡巨噬细胞(PAM)最大安全浓度 | 第32-33页 |
| 2.7 实时荧光定量检测IL-1β、TNF-α基因转录水平的变化 | 第33-35页 |
| 2.8 ELISA法检测IL-1β、TNF-α表达量的变化 | 第35-36页 |
| 3 结果 | 第36-42页 |
| 3.1 原代猪肺泡巨噬细胞(PAM)的CD40~+鉴定 | 第36-37页 |
| 3.2 猪源CD40L蛋白的荧光标记结果 | 第37页 |
| 3.3 标记蛋白与原代猪肺泡巨噬细胞(PAM)的结合作用观察 | 第37页 |
| 3.4 pCD40L蛋白对原代猪肺泡巨噬细胞(PAM)的最大安全浓度 | 第37-38页 |
| 3.5 pCD40L蛋白对PAM细胞IL-1β、TNF-α基因转录水平表达的影响 | 第38-40页 |
| 3.6 ELISA法检测IL-1β、TNF-α表达量的变化结果 | 第40-42页 |
| 4 分析与讨论 | 第42-44页 |
| 全文结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| Abstract | 第49-50页 |
| 致谢 | 第51页 |
