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红肉苹果愈伤组织诱导及红色性状发育机理研究

中英文缩略表第1-11页
中文摘要第11-13页
Abstract第13-16页
1 前言第16-31页
   ·研究的目的和意义第16页
   ·新疆野苹果及其红肉变型研究进展第16-18页
   ·花青苷研究进展第18-27页
     ·花青苷的结构第18-19页
     ·花青苷的生物学功能和保健价值第19-20页
     ·花青苷生物合成途径第20-21页
     ·花青苷合成的结构基因第21-23页
     ·调控花青苷合成的转录因子第23-24页
     ·影响花青苷合成的因素第24-27页
   ·植物离体培养研究进展第27-29页
     ·植物离体培养的概念第27页
     ·植物离体培养的理论基础第27页
     ·植物离体培养的类型第27-28页
     ·植物离体培养的应用第28-29页
   ·研究的主要内容第29-31页
2 材料和方法第31-43页
   ·试验材料第31-32页
     ·植物材料第31页
     ·菌株和质粒第31-32页
     ·酶及生化试剂第32页
   ·实验方法第32-43页
     ·花青苷的提取和测定第32页
     ·愈伤组织生长量的测定第32-33页
     ·激素组合实验第33页
     ·生长素和细胞分裂素浓度梯度实验第33页
     ·糖源种类实验第33页
     ·蔗糖浓度梯度实验第33-34页
     ·氮浓度梯度实验第34页
     ·植物DNA的提取第34页
     ·植物总RNA提取第34-35页
     ·cDNA第一链合成第35-36页
     ·半定量和荧光定量分析第36页
     ·PCR扩增第36页
     ·胶回收第36-37页
     ·连接克隆载体第37页
     ·大肠杆菌感受态的制备和转化第37-38页
     ·测序第38页
     ·质粒DNA的提取第38页
     ·土壤农杆菌感受态的制备与转化第38-39页
     ·酵母双杂交第39-42页
       ·酵母双杂交表达载体的构建第39-40页
       ·试剂配制第40-41页
       ·酵母双杂交步骤第41-42页
     ·双分子荧光互补第42页
       ·双分子荧光互补表达载体的构建第42页
       ·洋葱表皮遗传转化第42页
       ·共聚焦显微镜观察第42页
     ·转录组测序第42-43页
3 结果与分析第43-82页
   ·新疆红肉苹果杂交后代MdMYB10基因克隆和红绿性状分离比统计第43-48页
     ·F_1群体发生红绿性状分离第43页
     ·杂交后代MdMYB10基因的克隆和序列分析第43-46页
     ·杂交后代红绿性状MdMYB10位点基因型鉴定第46页
     ·几个杂交组合后代实生苗红绿分离比例统计第46-48页
   ·生长素、细胞分裂素和碳氮营养对红肉苹果愈伤组织花青苷积累的影响第48-58页
     ·红肉苹果愈伤组织的诱导第48-49页
     ·红肉苹果愈伤组织花青苷组分的鉴定第49-50页
     ·红肉苹果愈伤组织一个生长周期内生长量和花青苷含量的动态变化第50页
     ·生长素和细胞分裂素对红肉苹果愈伤组织生长量和花青苷含量的影响第50-55页
       ·不同激素组合对红肉苹果愈伤组织生长量和花青苷含量的影响第50-51页
       ·2,4-D显著抑制红肉苹果愈伤组织花青苷合成第51-53页
       ·生长素抑制愈伤组织花青苷的积累第53-54页
       ·细胞分裂素和生长素在影响花青苷合成上有互作第54-55页
     ·碳氮营养对愈伤生长量和花青苷含量的影响第55-58页
       ·不同种类糖源对红肉苹果愈伤组织生长量和花青苷含量的影响第55-56页
       ·蔗糖浓度对红肉苹果愈伤组织生长量和花青苷含量的影响第56-57页
       ·氮浓度对红肉苹果愈伤组织生长量和花青苷含量的影响第57-58页
   ·生长素抑制红肉苹果愈伤组织花青苷合成的分子机理第58-77页
     ·红色愈伤组织和黄色愈伤组织花青苷合成相关基因表达差异分析第58页
     ·花青苷合成基因对生长素信号的响应第58-60页
     ·ARF和IAA家族基因在红色愈伤和黄色愈伤中的表达差异第60-62页
     ·MdARF3和MdARF4蛋白与MdMYB10蛋白的互作第62-63页
     ·红色愈伤组织和黄色愈伤组织的转录组分析第63-77页
       ·RNA-Seq文库构建第63-64页
       ·转录组数据处理第64-65页
       ·红色愈伤和黄色愈伤差异表达基因分析第65-67页
       ·差异基因的功能分析第67-68页
       ·花青苷和苯丙氨酸代谢相关的差异基因第68-70页
       ·生长素活性和信号途径相关的差异基因第70-72页
       ·差异表达的转录因子第72-73页
       ·蛋白降解相关的差异基因第73-74页
       ·其它激素信号相关的差异基因第74-76页
       ·差异基因的荧光定量验证第76-77页
   ·新疆红肉苹果组培苗体细胞无性系变异第77-82页
     ·红肉苹果再生体系的建立和绿色突变体的发现第77-78页
     ·红色组培苗和绿色突变体花青苷合成相关基因表达量分析第78-79页
     ·红色组培苗和绿色突变体MdMYB10启动子类型鉴定及基因克隆第79-82页
4 讨论第82-88页
   ·MdMYB10基因是新疆红肉苹果红色性状的遗传基础第82-83页
   ·利用红肉苹果愈伤组织培养生产花青苷第83-84页
   ·生长素和细胞分裂素对红肉苹果愈伤组织花青苷合成的影响第84-85页
   ·生长素信号对花青苷合成基因的调控第85-86页
   ·苹果的体细胞无性变异第86-88页
5 结论第88-89页
参考文献第89-103页
附录第103-108页
致谢第108-109页
攻读学位期间发表论文第109页

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