摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
符号说明 | 第8-9页 |
1 文献综述 | 第9-25页 |
·植物的抗病性 | 第9-16页 |
·病原相关分子模式所激发的免疫反应(PTI) | 第10-11页 |
·效应因子激发的免疫反应(ETI) | 第11-12页 |
·植物获得性抗性(SAR) | 第12-13页 |
·水稻中与稻瘟病相关的先天免疫反应 | 第13-16页 |
·RNA干涉技术研究 | 第16-21页 |
·RNAi的作用机理 | 第17-19页 |
·RNAi的技术特点 | 第19-21页 |
·MicroRNA的研究进展 | 第21-24页 |
·MicroRNA的发现 | 第21页 |
·MicroRNA的合成 | 第21-23页 |
·MicroRNA的作用机制 | 第23页 |
·MicroRNA在植物中的作用 | 第23-24页 |
·论文选题依据及研究的目的意义 | 第24-25页 |
2 材料与方法 | 第25-36页 |
·实验材料 | 第25-27页 |
·水稻材料 | 第25页 |
·遗传转化体系中菌株和质粒载体 | 第25页 |
·分子生物学试剂 | 第25-26页 |
·主要实验仪器设备 | 第26页 |
·培养基及其抗生素 | 第26-27页 |
·实验方法 | 第27-36页 |
·水稻材料培养 | 第27页 |
·水稻DNA提取 | 第27页 |
·水稻总RNA提取,反转为cDNA | 第27-29页 |
·水稻总RNA提取的准备 | 第27页 |
·水稻总RNA提取步骤 | 第27-28页 |
·RNA纯化及反转录 | 第28-29页 |
·相关克隆载体的构建 | 第29-33页 |
·目标基因的克隆及回收纯化 | 第29-30页 |
·大肠杆菌感受态的制备 | 第30页 |
·大肠杆菌的转化 | 第30-32页 |
·农杆菌感受态的制备 | 第32页 |
·农杆菌的转化(电转) | 第32页 |
·农杆菌的菌落PCR检测 | 第32-33页 |
·本生烟瞬时表达 | 第33页 |
·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第33-35页 |
·主要涉及的培养基 | 第33-34页 |
·水稻愈伤组织的诱导 | 第34页 |
·转化愈伤组织 | 第34-35页 |
·对遗传转化产生的水稻植株进行阳性鉴定 | 第35-36页 |
·潮霉素初筛 | 第35页 |
·水稻转基因植株经行PCR鉴定 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-45页 |
·miRNA160靶基因LOC_Os06g47150和miRNA398靶基因LOC_Os04g48410过表达载体的构建及亚细胞定位 | 第37-40页 |
·载体构建 | 第37-38页 |
·亚细胞定位 | 第38-40页 |
·miRNA160靶基因LOC_Os06g47150和miRNA398靶基因LOC_Os04g48410过表达突变体载体的构建 | 第40-41页 |
·miRNA160靶基因LOC_Os06g47150和miRNA398靶基因LOC_Os04g48410RNAi载体的构建 | 第41-42页 |
·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第42-45页 |
·转化 | 第42-43页 |
·鉴定 | 第43-45页 |
4 讨论 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
附录 | 第56-59页 |
附表1.引物 | 第59-60页 |