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水稻两个miRNA靶基因功能分析载体的构建及遗传转化

摘要第1-7页
Abstract第7-8页
符号说明第8-9页
1 文献综述第9-25页
   ·植物的抗病性第9-16页
     ·病原相关分子模式所激发的免疫反应(PTI)第10-11页
     ·效应因子激发的免疫反应(ETI)第11-12页
     ·植物获得性抗性(SAR)第12-13页
     ·水稻中与稻瘟病相关的先天免疫反应第13-16页
   ·RNA干涉技术研究第16-21页
     ·RNAi的作用机理第17-19页
     ·RNAi的技术特点第19-21页
   ·MicroRNA的研究进展第21-24页
     ·MicroRNA的发现第21页
     ·MicroRNA的合成第21-23页
     ·MicroRNA的作用机制第23页
     ·MicroRNA在植物中的作用第23-24页
   ·论文选题依据及研究的目的意义第24-25页
2 材料与方法第25-36页
   ·实验材料第25-27页
     ·水稻材料第25页
     ·遗传转化体系中菌株和质粒载体第25页
     ·分子生物学试剂第25-26页
     ·主要实验仪器设备第26页
     ·培养基及其抗生素第26-27页
   ·实验方法第27-36页
     ·水稻材料培养第27页
     ·水稻DNA提取第27页
     ·水稻总RNA提取,反转为cDNA第27-29页
       ·水稻总RNA提取的准备第27页
       ·水稻总RNA提取步骤第27-28页
       ·RNA纯化及反转录第28-29页
     ·相关克隆载体的构建第29-33页
       ·目标基因的克隆及回收纯化第29-30页
       ·大肠杆菌感受态的制备第30页
       ·大肠杆菌的转化第30-32页
       ·农杆菌感受态的制备第32页
       ·农杆菌的转化(电转)第32页
       ·农杆菌的菌落PCR检测第32-33页
     ·本生烟瞬时表达第33页
     ·农杆菌介导的水稻遗传转化第33-35页
       ·主要涉及的培养基第33-34页
       ·水稻愈伤组织的诱导第34页
       ·转化愈伤组织第34-35页
     ·对遗传转化产生的水稻植株进行阳性鉴定第35-36页
       ·潮霉素初筛第35页
       ·水稻转基因植株经行PCR鉴定第35-36页
3 结果与分析第36-45页
   ·miRNA160靶基因LOC_Os06g47150和miRNA398靶基因LOC_Os04g48410过表达载体的构建及亚细胞定位第37-40页
     ·载体构建第37-38页
     ·亚细胞定位第38-40页
   ·miRNA160靶基因LOC_Os06g47150和miRNA398靶基因LOC_Os04g48410过表达突变体载体的构建第40-41页
   ·miRNA160靶基因LOC_Os06g47150和miRNA398靶基因LOC_Os04g48410RNAi载体的构建第41-42页
   ·农杆菌介导的水稻遗传转化第42-45页
     ·转化第42-43页
     ·鉴定第43-45页
4 讨论第45-47页
参考文献第47-55页
致谢第55-56页
附录第56-59页
附表1.引物第59-60页

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