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携带双串联卵清蛋白T细胞表位的兔出血症病毒样颗粒的表达及免疫原性研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略词表(Abbreviation)第11-12页
第一篇 文献综述第12-34页
 1 兔出血症病毒第12-17页
   ·RHD的发病史第12-13页
   ·RHDV的分类第13页
   ·RHDV病原第13-15页
   ·临床症状和病理变化第15页
   ·RHDV的流行病学第15-16页
   ·预防,控制和预防接种第16页
   ·RHDV的治疗应用第16-17页
   ·小结第17页
 2 病毒样颗粒第17-24页
   ·病毒样颗粒的起源第18页
   ·病毒样颗粒的特点第18页
   ·病毒样颗粒的表达系统第18-21页
   ·嵌合VLPs的产生第21页
   ·VLPs疫苗的生产应用第21-24页
 参考文献第24-34页
第二篇 实验部分第34-82页
 第一章 三种携带双串联OVA T细胞表位的重组穿梭载体的构建第34-56页
  1 材料与方法第34-44页
   ·质粒、细胞、菌种第34页
   ·主要试剂与工具酶第34-35页
   ·核酸序列分析第35页
   ·引物设计第35-36页
   ·构建示意图第36-37页
   ·目的片段的构建第37-42页
   ·穿梭载体Bacmid的构建第42-44页
  2 实验结果第44-49页
   ·目的基因的构建第44-46页
   ·重组表达载体的酶切鉴定第46-47页
   ·目的基因pFastBac1-DC的构建第47-48页
   ·重组质粒的酶切鉴定第48-49页
   ·重组穿梭载体鉴定第49页
  3 讨论第49-52页
   ·SOE技术第49-50页
   ·外源表位插入位置的选择第50-52页
  参考文献第52-56页
 第二章 三种嵌合蛋白的表达及鉴定第56-68页
  1 材料与方法第56-60页
   ·质粒、菌株与细胞第56页
   ·主要试剂与工具酶第56-57页
   ·重组穿梭载体转染Sf9细胞第57页
   ·重组杆状病毒的初步鉴定第57-59页
   ·表达产物的鉴定第59-60页
  2 结果第60-63页
   ·转染第60页
   ·RT-PCR鉴定重组病毒的mRNA第60-61页
   ·血凝实验第61-62页
   ·免疫荧光第62页
   ·重组蛋白的表达及免疫印迹鉴定第62-63页
  3 讨论第63-65页
   ·嵌合蛋白载体和外源表位的表达第63-64页
   ·表达系统的选择第64页
   ·嵌合蛋白的血凝特性第64-65页
  参考文献第65-68页
 第三章 嵌合蛋白的自聚能力和免疫原性研究第68-82页
  1 材料与方法第68-71页
   ·试剂、培养基和病毒第68-69页
   ·实验动物第69页
   ·病毒样颗粒的电镜观察第69页
   ·嵌合蛋白免疫原性的研究第69-71页
  2 结果第71-75页
   ·电镜观察第71-72页
   ·嵌合蛋白载体特异性抗体效价的测定第72-73页
   ·ELISPOT检测特异性IFN-γ分泌第73-75页
  3 讨论第75-78页
   ·病毒样颗粒的形成第75-76页
   ·免疫原性的研究第76-78页
  参考文献第78-82页
全文总结第82-84页
附录第84-88页
致谢第88页

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