| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表及其英汉对照 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| 1 植物寒害及研究进展 | 第12-18页 |
| ·寒害的种类及对植物的影响 | 第12-14页 |
| ·提高植物抗寒性的途径 | 第14-16页 |
| ·植物抗寒相关基因的研究进展 | 第16-18页 |
| 2 CBF家族基因的研究进展 | 第18-21页 |
| ·CBF基因及CBF转录因子结构 | 第18-19页 |
| ·CBF信号途径 | 第19-21页 |
| 3 本研究的目的、意义及主要内容 | 第21-24页 |
| ·本研究的目的、意义 | 第21-22页 |
| ·本研究的主要内容 | 第22-24页 |
| 第二章 野生马铃薯SpCBF1基因的克隆及表达分析 | 第24-38页 |
| 1 材料与方法 | 第24-28页 |
| ·植物材料、菌种、试剂 | 第24页 |
| ·SpCBF1基因的克隆及生物信息学分析方法 | 第24-27页 |
| ·半定量RT-PCR | 第27-28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-35页 |
| ·SpCBF1基因cDNA全长扩增及序列分析 | 第28-29页 |
| ·SpCBF1基因编码蛋白分析 | 第29-31页 |
| ·SpCBF1氨基酸同源序列比对 | 第31-33页 |
| ·SpCBF1的系统进化分析 | 第33-34页 |
| ·SpCBF1基因的组织表达 | 第34-35页 |
| ·寒冷胁迫下SpCBF1的表达 | 第35页 |
| 3 讨论 | 第35-38页 |
| 第三章 SpCBF1基因的遗传转化 | 第38-50页 |
| 1 材料与方法 | 第38-44页 |
| ·植物材料、菌种、试剂及培养基 | 第38页 |
| ·过表达载体及反义载体的构建 | 第38-41页 |
| ·马铃薯遗传转化 | 第41-43页 |
| ·PCR验证转基因马铃薯植株 | 第43-44页 |
| ·半定量RT-PCR与定量PCR分析 | 第44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-48页 |
| ·过表达载体和反义载体酶切验证 | 第44-45页 |
| ·转基因马铃薯植株的获得 | 第45-47页 |
| ·转基因马铃薯植株中SpCBF1基因的表达 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 转基因马铃薯的抗寒性分析 | 第50-62页 |
| 1 材料与方法 | 第50-55页 |
| ·植物材料及处理方法 | 第50页 |
| ·转基因植株抗寒性检测 | 第50-51页 |
| ·与抗寒有关的生理生化指标测定 | 第51-55页 |
| ·DHN10与StPI基因表达量检测 | 第55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-59页 |
| ·转基因植株的抗寒性分析 | 第55-56页 |
| ·寒冷胁迫下转基因植株组织内相关生理生化指标含量变化 | 第56-58页 |
| ·DHN10与StPI基因表达量分析 | 第58-59页 |
| 3 讨论 | 第59-62页 |
| 全文结论 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 附录 | 第70-78页 |
| 附录一 引物序列 | 第70页 |
| 附录二 试验方法 | 第70-74页 |
| ·植物总RNA提取 | 第70-71页 |
| ·DNA凝胶回收 | 第71-72页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备与转化 | 第72-73页 |
| ·质粒提取 | 第73页 |
| ·农杆菌感受态的制备与转化 | 第73-74页 |
| ·植物叶片DNA提取 | 第74页 |
| 附录三 培养基配制 | 第74-78页 |
| ·MS培养基配制 | 第74-76页 |
| ·LB培养基配制 | 第76页 |
| ·马铃薯遗传转化所用培养基配制 | 第76-78页 |
| 攻读硕士期间已发表及待发表论文 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80页 |