| 中文摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-16页 |
| 1．NDi V介绍 | 第10-14页 |
| ·NDi V的概述 | 第10-11页 |
| ·NDi V分子生物学特征 | 第11-13页 |
| ·NDi V与Cav V、DKNV关联性分析 | 第13-14页 |
| 2．研究的意义和目的 | 第14-16页 |
| 第一章 NDi V对动物致病性的研究 | 第16-27页 |
| 1. 材料 | 第16-17页 |
| 2. 方法 | 第17-20页 |
| ·标本处理 | 第17-18页 |
| ·NDi V株的获取途径和细胞传代 | 第18-19页 |
| ·细胞复苏 | 第18页 |
| ·细胞传代和培养 | 第18页 |
| ·NDi V在C6/36 细胞染毒和观察 | 第18页 |
| ·NDi V病毒滴度的测定（标准品的制备） | 第18-19页 |
| ·NDi V在蚊虫及哺乳动物细胞中的培养 | 第19页 |
| ·NDi V对小鼠的致病性观察 | 第19-20页 |
| ·NDi V病毒对乳鼠的致病性 | 第19页 |
| ·NDi V对乳鼠脑部及各脏器大体形态学影响分析 | 第19-20页 |
| ·NDi V对鸡致病性 | 第20页 |
| ·NDi V对SPF鸡胚致病性 | 第20页 |
| ·NDi V对雏鸡的毒力试验 | 第20页 |
| 3. 结果 | 第20-25页 |
| ·病毒分离结果 | 第20-21页 |
| ·NDi V病毒滴度测定结果 | 第21-22页 |
| ·NDi V在不同细胞的生长结果 | 第22页 |
| ·NDi V对动物的毒力结果 | 第22-25页 |
| ·细胞传代的病毒株对小鼠的致病性结果 | 第22-23页 |
| ·NDi V对乳鼠脑部及各脏器大体形态学影响结果 | 第23页 |
| ·NDi V对鸡胚的致病性结果 | 第23-24页 |
| ·NDi V对雏鸡的毒力结果 | 第24-25页 |
| 4. 讨论 | 第25-26页 |
| 5. 结论 | 第26-27页 |
| 第二章 实时荧光PCR检测Nam Dinh病毒方法的建立及初步应用 | 第27-43页 |
| 1. 材料 | 第27-29页 |
| 2. 方法 | 第29-34页 |
| ·Rd Rp基因特异性片段筛选 | 第29-30页 |
| ·病毒核酸的提取 | 第30-31页 |
| ·实时荧光RT- PCR引物反应性实验 | 第31-32页 |
| ·测序验证 | 第32页 |
| ·Taq Man- MGB探针实时荧光PCR反应体系的建立和优化 | 第32-33页 |
| ·退火温度的优化 | 第33页 |
| ·酶用量的优化 | 第33页 |
| ·探针浓度的优化 | 第33页 |
| ·上下游引物浓度的优化 | 第33页 |
| ·Mg~(2+)浓度的优化 | 第33页 |
| ·Taq Man-MGB探针实时荧光PCR反应体系的评估 | 第33-34页 |
| ·特异性试验 | 第33-34页 |
| ·灵敏度实验 | 第34页 |
| ·稳定性实验 | 第34页 |
| ·龙岗区蚊媒携带NDi V的检测 | 第34页 |
| 3. 结果 | 第34-41页 |
| ·PCR反应性结果 | 第34-35页 |
| ·RT-PCR产物测序验证结果 | 第35页 |
| ·Taq Man- MGB探针实时荧光PCR反应体系优化结果 | 第35-38页 |
| ·退火温度优化结果 | 第35-36页 |
| ·Taq DNA聚合酶用量优化结果 | 第36页 |
| ·Taq Man-MGB探针浓度的优化结果 | 第36-37页 |
| ·引物浓度的优化结果 | 第37-38页 |
| ·Mg~(2+)浓度的优化结果 | 第38页 |
| ·PCR应用性结果 | 第38-40页 |
| ·特异性实验结果 | 第38-39页 |
| ·灵敏度实验结果 | 第39-40页 |
| ·稳定性实验结果 | 第40页 |
| ·龙岗区蚊媒NDi V携带率结果 | 第40-41页 |
| 4. 讨论 | 第41-42页 |
| 5. 结论 | 第42-43页 |
| 本文研究创新之处 | 第43页 |
| 不足之处 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-47页 |
| 综述 | 第47-56页 |
| 参考文献 | 第53-56页 |
| 附录 1 | 第56-57页 |
| 附录 2 | 第57-58页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
