| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-25页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的研究进展 | 第11页 |
| ·PRRSV病原学的概述 | 第11-13页 |
| ·PRRSV形态结构及理化性质 | 第11-12页 |
| ·PRRSV培养特性 | 第12页 |
| ·PRRSV发病机制 | 第12-13页 |
| ·PRRSV分子生物学特征 | 第13-16页 |
| ·PRRSV基因组结构的特点 | 第13页 |
| ·PRRSV基因组所编码的主要结构蛋白 | 第13-15页 |
| ·PRRSV的次要结构蛋白 | 第15-16页 |
| ·PRRSV流行病学特征 | 第16-18页 |
| ·PRRSV的感染 | 第16-17页 |
| ·PRRSV感染的特点 | 第17-18页 |
| ·PRRSV感染后的先天性免疫应答 | 第18页 |
| ·PRRSV感染后的体液免疫应答 | 第18-19页 |
| ·PRRSV感染后细胞免疫的重要作用 | 第19页 |
| ·PRRSV疫苗的研究现状 | 第19-21页 |
| ·GP3对研制新型疫苗的作用 | 第21页 |
| ·T细胞表位的研究方法 | 第21-23页 |
| ·T细胞表位的研究方法 | 第22-23页 |
| ·T细胞功能试验 | 第23页 |
| ·研究目的及意义 | 第23-25页 |
| 2 PRRSV GP3截短蛋白的原核表达与纯化 | 第25-44页 |
| ·实验材料 | 第25-28页 |
| ·病毒、血清、载体和菌株 | 第25页 |
| ·主要试剂的配制 | 第25-27页 |
| ·其他试剂和工具酶 | 第27页 |
| ·主要实验仪器 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-37页 |
| ·构建重组质粒p MD19-T-ORF3 | 第28-32页 |
| ·构建原核表达质粒p ET-32a-t ORF3 | 第32-34页 |
| ·重组蛋白p ET-32a-t GP3大肠杆菌中的诱导表达及鉴定 | 第34-36页 |
| ·重组蛋白的提取及纯化 | 第36页 |
| ·ELISA鉴定重组蛋白免疫活性 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-42页 |
| ·PRRSV BJ-4 ORF3基因的扩增以及p MD19-T-GP3双酶切鉴定 | 第37页 |
| ·截短的ORF3的扩增以及原核表达质粒p ET-32a-t GP3双酶切鉴定 | 第37-38页 |
| ·重组蛋白的诱导表达与Western-Blot鉴定结果 | 第38-39页 |
| ·重组蛋白的可溶性分析及表达条件的优化 | 第39-41页 |
| ·重组蛋白的纯化结果 | 第41页 |
| ·ELISA鉴定结果 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 3 PRRSV GP3截短蛋白T细胞表位的初步筛选 | 第44-53页 |
| ·实验材料 | 第44-45页 |
| ·主要材料 | 第44页 |
| ·主要试剂的配制 | 第44-45页 |
| ·主要实验仪器设备 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-49页 |
| ·动物免疫方法 | 第45-46页 |
| ·间接 ELISA 检测小鼠多抗血清的效价 | 第46-47页 |
| ·使用 IFN-γ ELISA KitⅡ检测细胞因子 | 第47-49页 |
| ·实验结果 | 第49-50页 |
| ·间接 ELISA 法检测小鼠多抗血清效价的结果 | 第49-50页 |
| ·细胞因子 IFN-γ ELISA 结果 | 第50页 |
| ·讨论 | 第50-53页 |
| 4 实验结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 附录英文缩写词汇表 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63-65页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第65页 |