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猪繁殖与呼吸综合征病毒BJ-4株GP3截短蛋白的原核表达及T细胞表位的初步筛选

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
1 文献综述第11-25页
   ·猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的研究进展第11页
   ·PRRSV病原学的概述第11-13页
     ·PRRSV形态结构及理化性质第11-12页
     ·PRRSV培养特性第12页
     ·PRRSV发病机制第12-13页
   ·PRRSV分子生物学特征第13-16页
     ·PRRSV基因组结构的特点第13页
     ·PRRSV基因组所编码的主要结构蛋白第13-15页
     ·PRRSV的次要结构蛋白第15-16页
   ·PRRSV流行病学特征第16-18页
     ·PRRSV的感染第16-17页
     ·PRRSV感染的特点第17-18页
   ·PRRSV感染后的先天性免疫应答第18页
   ·PRRSV感染后的体液免疫应答第18-19页
   ·PRRSV感染后细胞免疫的重要作用第19页
   ·PRRSV疫苗的研究现状第19-21页
   ·GP3对研制新型疫苗的作用第21页
   ·T细胞表位的研究方法第21-23页
     ·T细胞表位的研究方法第22-23页
     ·T细胞功能试验第23页
   ·研究目的及意义第23-25页
2 PRRSV GP3截短蛋白的原核表达与纯化第25-44页
   ·实验材料第25-28页
     ·病毒、血清、载体和菌株第25页
     ·主要试剂的配制第25-27页
     ·其他试剂和工具酶第27页
     ·主要实验仪器第27-28页
   ·实验方法第28-37页
     ·构建重组质粒p MD19-T-ORF3第28-32页
     ·构建原核表达质粒p ET-32a-t ORF3第32-34页
     ·重组蛋白p ET-32a-t GP3大肠杆菌中的诱导表达及鉴定第34-36页
     ·重组蛋白的提取及纯化第36页
     ·ELISA鉴定重组蛋白免疫活性第36-37页
   ·结果与分析第37-42页
     ·PRRSV BJ-4 ORF3基因的扩增以及p MD19-T-GP3双酶切鉴定第37页
     ·截短的ORF3的扩增以及原核表达质粒p ET-32a-t GP3双酶切鉴定第37-38页
     ·重组蛋白的诱导表达与Western-Blot鉴定结果第38-39页
     ·重组蛋白的可溶性分析及表达条件的优化第39-41页
     ·重组蛋白的纯化结果第41页
     ·ELISA鉴定结果第41-42页
   ·讨论第42-44页
3 PRRSV GP3截短蛋白T细胞表位的初步筛选第44-53页
   ·实验材料第44-45页
     ·主要材料第44页
     ·主要试剂的配制第44-45页
     ·主要实验仪器设备第45页
   ·实验方法第45-49页
     ·动物免疫方法第45-46页
     ·间接 ELISA 检测小鼠多抗血清的效价第46-47页
     ·使用 IFN-γ ELISA KitⅡ检测细胞因子第47-49页
   ·实验结果第49-50页
     ·间接 ELISA 法检测小鼠多抗血清效价的结果第49-50页
     ·细胞因子 IFN-γ ELISA 结果第50页
   ·讨论第50-53页
4 实验结论第53-54页
参考文献第54-61页
附录英文缩写词汇表第61-63页
致谢第63-65页
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果第65页

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