| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-16页 |
| ·G蛋白的研究进展 | 第10-13页 |
| ·G蛋白概述 | 第10页 |
| ·G蛋白的结构与功能 | 第10-11页 |
| ·G蛋白偶联受体 | 第11-12页 |
| ·水生生物中G蛋白偶联的信号转导的研究进展 | 第12-13页 |
| ·环境雌激素的生物毒性效应 | 第13-14页 |
| ·环境雌激素概述 | 第13页 |
| ·双酚A对水生生物的毒性效应 | 第13-14页 |
| ·苯并芘的抗雌激素效应 | 第14页 |
| ·研究目的与意义 | 第14-16页 |
| 第二章 双齿围沙蚕Gα蛋白的克隆、表达及纯化 | 第16-37页 |
| ·实验材料 | 第16-18页 |
| ·实验动物 | 第16页 |
| ·实验药品与试剂 | 第16-17页 |
| ·实验仪器 | 第17-18页 |
| ·实验方法 | 第18-27页 |
| ·双齿围沙蚕总RNA的提取 | 第18页 |
| ·合成第一条cDNA链 | 第18-19页 |
| ·双齿围沙蚕Gα 基因目的片段的获取 | 第19-20页 |
| ·pMD18-T-Gα 重组质粒的构建及转化 | 第20-21页 |
| ·pET-28a-Gα 重组质粒的构建及表转化 | 第21-23页 |
| ·融合蛋白Gα 的诱导表达 | 第23-25页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第25-26页 |
| ·融合蛋白的复性及蛋白浓度的测定 | 第26页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第26-27页 |
| ·Western Blot检测 | 第27页 |
| ·结果与分析 | 第27-35页 |
| ·双齿围沙蚕Gα基因目的片段的扩增 | 第27-28页 |
| ·pMD18-T-Gα重组质粒的构建及转化结果 | 第28-29页 |
| ·pET-28a-Gα重组质粒的构建及转化结果 | 第29-30页 |
| ·融合蛋白Gα的诱导表达结果 | 第30-31页 |
| ·Gα蛋白的纯化与复性 | 第31-33页 |
| ·Gα蛋白浓度的测定 | 第33页 |
| ·多克隆抗体制备及Western Blot检测 | 第33-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| ·Gα蛋白的诱导表达 | 第35页 |
| ·Gα蛋白的纯化 | 第35-36页 |
| ·Gα重组蛋白的复性 | 第36页 |
| ·小结 | 第36-37页 |
| 第三章 双酚A和苯并比诱导下双齿围沙蚕Gα 基因的表达特征 | 第37-56页 |
| ·实验材料 | 第37-38页 |
| ·实验动物 | 第37-38页 |
| ·实验试剂 | 第38页 |
| ·实验仪器 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-41页 |
| ·双齿围沙蚕的毒性实验 | 第38-39页 |
| ·提取沙蚕总RNA | 第39页 |
| ·合成第一条cDNA链 | 第39-40页 |
| ·荧光定量引物的设计 | 第40页 |
| ·荧光实时定量PCR方法及数据处理 | 第40-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-53页 |
| ·双齿围沙蚕总RNA提取结果 | 第41-42页 |
| ·标准曲线的建立 | 第42-45页 |
| ·双酚A诱导双齿围沙蚕Gα 基因表达的结果 | 第45-49页 |
| ·苯并芘诱导双齿围沙蚕Gα 基因表达的结果 | 第49-53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| ·小结 | 第55-56页 |
| 第四章 双齿围沙蚕Gα蛋白的ELISA检测及应用 | 第56-71页 |
| ·实验材料 | 第56-57页 |
| ·实验动物 | 第56页 |
| ·实验试剂 | 第56页 |
| ·实验仪器 | 第56-57页 |
| ·实验方法 | 第57-59页 |
| ·Gα 蛋白间接ELISA检测方法的建立 | 第57-58页 |
| ·双齿围沙蚕的毒性实验 | 第58页 |
| ·双齿围沙蚕总蛋白的提取 | 第58-59页 |
| ·毒性实验样品的ELISA检测 | 第59页 |
| ·结果与分析 | 第59-68页 |
| ·ELISA最佳工作条件的确定 | 第59-61页 |
| ·双齿围沙蚕Gα的ELISA标准曲线 | 第61页 |
| ·双齿围沙蚕各处理组总蛋白提取结果 | 第61-62页 |
| ·双酚A诱导双齿围沙蚕Gα蛋白表达的结果 | 第62-65页 |
| ·苯并芘诱导双齿围沙蚕Gα蛋白表达的结果 | 第65-68页 |
| ·讨论 | 第68-69页 |
| ·小结 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-77页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第77-80页 |
| 致谢 | 第80页 |