| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第1章 文献综述 | 第9-19页 |
| ·黑线仓鼠的研究概况 | 第9-11页 |
| ·生理学研究现状 | 第9-10页 |
| ·生态学研究现状 | 第10页 |
| ·分子生物学研究现状 | 第10-11页 |
| ·季节性繁殖 | 第11-12页 |
| ·KiSS-1/GPR54系统的研究进展 | 第12-13页 |
| ·KiSS-1 和GPR54基因的表达 | 第12页 |
| ·KiSS-1/GPR54的功能介绍 | 第12-13页 |
| ·KiSS-1/GPR54系统在季节性繁殖调控中的作用 | 第13页 |
| ·真核生物启动子研究进展 | 第13-15页 |
| ·启动子的结构简介 | 第13-14页 |
| ·启动子分类 | 第14页 |
| ·启动子克隆及生物信息学预测与分析 | 第14-15页 |
| ·启动子功能分析 | 第15页 |
| ·DNA甲基化研究进展 | 第15-17页 |
| ·DNA甲基化酶 | 第15-16页 |
| ·DNA甲基化机制与特征 | 第16页 |
| ·DNA甲基化检测方法 | 第16-17页 |
| ·亚硫酸盐测序法 | 第17-19页 |
| 第2章 研究目的与意义 | 第19-20页 |
| 第3章 材料与方法 | 第20-29页 |
| ·实验材料 | 第20-22页 |
| ·实验药品与试剂 | 第20页 |
| ·实验药品配制 | 第20-21页 |
| ·实验仪器 | 第21-22页 |
| ·动物取样与处理 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-28页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第22-23页 |
| ·KiSS-1 启动子区序列引物设计 | 第23页 |
| ·PCR扩增 | 第23-24页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测及PCR产物回收 | 第24页 |
| ·连接 | 第24-25页 |
| ·制备感受态细胞 | 第25页 |
| ·转化 | 第25页 |
| ·筛选阳性克隆及保种测序 | 第25页 |
| ·DNA重亚硫酸盐修饰 | 第25-26页 |
| ·KiSS-1 启动子区CpG岛甲基化引物设计 | 第26页 |
| ·转化后DNA PCR扩增 | 第26-27页 |
| ·巢式PCR扩增 | 第27页 |
| ·PCR产物克隆 | 第27-28页 |
| ·阳性克隆子Sanger法测序验证 | 第28页 |
| ·数据分析 | 第28-29页 |
| 第4章 结果与分析 | 第29-40页 |
| ·黑线仓鼠基因组DNA提取结果 | 第29页 |
| ·KiSS-1 基因启动子序列PCR扩增结果 | 第29-30页 |
| ·KiSS-1 启动子序列分析 | 第30-34页 |
| ·KiSS-1 启动子测序波峰图 | 第30页 |
| ·KiSS-1 的序列编码分析 | 第30-32页 |
| ·核苷酸组成分析 | 第32页 |
| ·确定核心启动子区域 | 第32页 |
| ·CpG岛预测 | 第32-33页 |
| ·在CpG岛序列附近设计甲基化引物 | 第33-34页 |
| ·亚硫酸盐修饰DNA PCR扩增 | 第34页 |
| ·KiSS-1 启动子区CPG岛序列甲基化检测结果 | 第34-40页 |
| ·KiSS-1 启动子区CPG岛甲基化测序结果 | 第34-37页 |
| ·四季KiSS-1 启动子甲基化状态比较 | 第37-39页 |
| ·四季KiSS-1 启动子甲基化状况与KiSS-1 mRNA表达量进行相关性分析 | 第39-40页 |
| 第5章 讨论 | 第40-44页 |
| ·KiSS-1 基因启动子结构与功能分析 | 第40页 |
| ·亚硫酸氢盐测序法（BSP）与甲基化特异性PCR（MSP）对比 | 第40-41页 |
| ·KiSS-1 基因启动子甲基化状态与KiSS-1 基因表达的关系 | 第41页 |
| ·KiSS-1 基因启动子甲基化与季节、光照的关系 | 第41-42页 |
| ·KiSS-1/GPR54系统参与季节性繁殖的机制 | 第42-44页 |
| 第6章 结论与研究展望 | 第44-45页 |
| ·结论 | 第44页 |
| ·研究展望 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
