中文摘要 | 第1-18页 |
Abstract | 第18-23页 |
1. 引言 | 第23-55页 |
·微生物气溶胶的概述 | 第23-28页 |
·微生物气溶胶的概念 | 第23页 |
·微生物气溶胶的特性 | 第23-25页 |
·微生物气溶胶来源的多相性 | 第23-24页 |
·微生物气溶胶种类的多样性 | 第24页 |
·微生物气溶胶活性的易变性 | 第24页 |
·微生物气溶胶播散的三维性 | 第24页 |
·微生物气溶胶沉积的再生性 | 第24-25页 |
·微生物气溶胶感染的广泛性 | 第25页 |
·微生物气溶胶对人类健康的危害 | 第25页 |
·微生物气溶胶的检测 | 第25-28页 |
·惯性撞击类 | 第25-27页 |
·静电沉着类 | 第27页 |
·过滤阻留类 | 第27页 |
·生物采样类 | 第27-28页 |
·本实验室微生物气溶胶的相关研究 | 第28页 |
·大气颗粒物的概述 | 第28-30页 |
·大气细颗粒物PM_(2.5) 的来源 | 第29页 |
·大气细颗粒物对健康的危害 | 第29-30页 |
·大气细颗粒物与微生物气溶胶的相关性 | 第30-33页 |
·空气中常见细菌及其危害 | 第31-32页 |
·空气中常见真菌及其危害 | 第32-33页 |
·高通量测序技术 | 第33-39页 |
·高通量测序技术类型 | 第34-36页 |
·SOLiD测序技术 | 第34页 |
·Solexa测序技术 | 第34-35页 |
·Roche 454测序技术 | 第35-36页 |
·高通量测序技术的应用 | 第36-37页 |
·高通量测序技术在全基因组中的应用 | 第36页 |
·高通量测序技术在RNA测序中的应用 | 第36-37页 |
·高通量测序技术在染色质免疫共沉淀技术中的应用 | 第37页 |
·高通量测序技术在DNA甲基化分析中的应用 | 第37页 |
·高通量测序技术在微生物学研究中的应用 | 第37-39页 |
·高通量测序技术在细菌分类学中的应用 | 第37-38页 |
·高通量测序技术在转录组学研究中的应用 | 第38页 |
·高通量测序技术在微生物菌群多样性研究中的应用 | 第38-39页 |
·H5亚型禽流感病毒概况 | 第39-43页 |
·禽流感病毒的检测方法 | 第40-43页 |
·病毒的分离与鉴定 | 第40-41页 |
·血清学检测 | 第41-42页 |
·分子生物学诊断 | 第42-43页 |
·先天性免疫系统概况 | 第43-49页 |
·TLRs的概况 | 第44-46页 |
·主要的TLRs受体及其作用 | 第44-46页 |
·主要的细胞因子及其功能 | 第46-49页 |
·干扰素 | 第46-47页 |
·白细胞介素 | 第47-48页 |
·趋化因子 | 第48-49页 |
·肿瘤坏死因子 | 第49页 |
·蛋白质组学 | 第49-53页 |
·蛋白质组学的概念 | 第49-50页 |
·蛋白质组学的研究内容及意义 | 第50-51页 |
·蛋白质组学主要技术 | 第51-53页 |
·蛋白质分离技术 | 第51-52页 |
·蛋白质鉴定技术 | 第52页 |
·生物信息学技术 | 第52-53页 |
·研究目的和意义 | 第53-55页 |
2. 材料和方法 | 第55-80页 |
·实验材料 | 第55-59页 |
·PM_(2.5) 和PM_(10)的采集 | 第55页 |
·实验动物 | 第55页 |
·实验所用主要试剂及试剂盒 | 第55页 |
·主要实验溶液的配制 | 第55-58页 |
·分子生物学试剂配制 | 第55-56页 |
·Western-bolt主要实验试剂的配置 | 第56-57页 |
·蛋白质组学所需试剂的配置: | 第57-58页 |
·主要仪器设备 | 第58-59页 |
·实验方法 | 第59-80页 |
·活禽市场环境PM_(2.5) 中细菌和真菌的多样性及全年动态变化规律 | 第59-63页 |
·样品的采集 | 第59-60页 |
·样品DNA的提取 | 第60页 |
·PCR扩增 | 第60-61页 |
·PCR产物的混样和纯化 | 第61-62页 |
·文库构建和上机测序 | 第62-63页 |
·信息分析流程 | 第63页 |
·H5亚型禽流感病毒real-time RT-PCR方法的建立及应用 | 第63-68页 |
·引物和探针的设计 | 第63页 |
·病毒RNA的提取 | 第63-64页 |
·cNDA的合成 | 第64页 |
·荧光定量PCR反应条件 | 第64-65页 |
·质粒标准品的制备 | 第65-67页 |
·H5亚型禽流感病毒荧光定量PCR特异性鉴定 | 第67页 |
·H5亚型禽流感病毒荧光定量PCR敏感性和重复性试验 | 第67-68页 |
·活禽市场环境空气样品的采集及H5亚型禽流感病毒的检测 | 第68页 |
·不同粒径气溶胶成分(PM_(2.5)+, PM_(2.5)-, PM_(10)+,PM_(10)-)刺激小鼠后免疫相关因子的表达及病理性肺损伤的研究 | 第68-72页 |
·试验动物 | 第68页 |
·PM_(2.5) 和PM_(10)的收集 | 第68页 |
·PM_(2.5) 和PM_(10)的处理 | 第68-69页 |
·不同粒径气溶胶成分(PM_(2.5)+,PM_(2.5)-,PM_(10)+,PM_(10)-)单一刺激小鼠引起的肺损伤(急性感染试验) | 第69-72页 |
·不同粒径气溶胶成分(PM_(2.5)+,PM_(2.5)-,PM_(10)+,PM_(10)-)重复刺激小鼠引起的肺损伤(慢性感染试验) | 第72页 |
·PM_(2.5) 感染小鼠后肺脏差异蛋白组研究 | 第72-80页 |
·试验动物 | 第72-73页 |
·PM_(2.5) 的收集 | 第73页 |
·小鼠的感染试验 | 第73页 |
·小鼠肺脏蛋白样品的处理 | 第73页 |
·肺脏蛋白的浓缩 | 第73-74页 |
·肺脏蛋白浓度测定与验证 | 第74页 |
·IPG胶条的水化 | 第74-75页 |
·等电聚焦 | 第75页 |
·胶条平衡 | 第75页 |
·二向电泳 | 第75-77页 |
·硝酸银染色 | 第77页 |
·凝胶分析 | 第77-78页 |
·质谱鉴定 | 第78页 |
·Western Blot验证差异蛋白 | 第78-80页 |
3. 实验结果 | 第80-116页 |
·活禽市场环境PM_(2.5) 中细菌的多样性及全年动态变化规律 | 第80-86页 |
·测序数据的处理 | 第80-81页 |
·PM_(2.5) 中细菌的多样性及全年动态变化 | 第81-84页 |
·活禽市场环境PM_(2.5) 浓度及PM_(2.5) 中细菌多样性 | 第84-86页 |
·泰安市城区PM_(2.5) 浓度与活禽市场环境PM_(2.5) 浓度的比较 | 第84-85页 |
·活禽市场环境PM_(2.5) 中的细菌气溶胶多样性 | 第85-86页 |
·活禽市场环境PM_(2.5) 中真菌的多样性及全年动态变化规律 | 第86-91页 |
·测序数据的处理 | 第86-87页 |
·PM_(2.5) 中真菌的多样性及全年动态变化 | 第87-90页 |
·活禽市场环境PM_(2.5) 中真菌气溶胶的多样性 | 第90-91页 |
·气载H5亚型禽流感病毒real-time RT-PCR方法的建立及应用 | 第91-94页 |
·H5亚型禽流感病毒荧光定量PCR特异性 | 第91页 |
·H5亚型禽流感病毒荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第91-93页 |
·标准曲线 | 第91-92页 |
·H5亚型禽流感病毒荧光定量标准曲线的敏感性 | 第92页 |
·H5亚型禽流感病毒荧光定量标准曲线的重复性 | 第92-93页 |
·活禽市场环境中H5 AIV气溶胶的real-time RT-PCR检测 | 第93-94页 |
·不同粒径气溶胶成分(PM_(2.5)~+, PM_(2.5)~-, PM_(10)~+,PM_(10)~-)刺激小鼠后免疫相关因子的表达及病理性肺损伤的研究 | 第94-105页 |
·活禽市场环境PM_(2.5) 和PM_(10)中细菌的多样性和相对丰度 | 第94-95页 |
·活禽市场环境PM_(2.5) 和PM_(10)中真菌的多样性和相对丰度 | 第95-97页 |
·不同粒径气溶胶成分(PM_(2.5)+,PM_(2.5)-,PM_(10)~+,PM_(10)~-)单一刺激小鼠引起的肺损伤(急性感染试验) | 第97-102页 |
·不同粒径气溶胶成分(PM_(2.5)~+,PM_(2.5)~-,PM_(10)~+,PM_(10)~-)单一刺激小鼠后肺部病理组织学结果 | 第98-99页 |
·不同粒径气溶胶成分(PM_(2.5)~+, PM_(2.5)~-, PM_(10)~+,PM_(10)~-)单一刺激小鼠后肺部模式识别受体及细胞因子和趋化因子的检测 | 第99-102页 |
·不同粒径气溶胶成分(PM_(2.5)~+,PM_(2.5)~-,PM_(10)~+,PM_(10)~-)重复刺激小鼠引起的肺损伤(慢性感染试验) | 第102-105页 |
·不同粒径气溶胶成分(PM_(2.5)~+,PM_(2.5~)-,PM_(10)~+,PM_(10)~-)重复刺激小鼠后肺部病理组织学结果 | 第102-103页 |
·不同粒径气溶胶成分(PM_(2.5)~+,PM_(2.5)~-,PM_(10)~+,PM_(10)~-)重复刺激小鼠后肺部模式识别受体及细胞因子和趋化因子的检测 | 第103-105页 |
·PM_(2.5) 感染小鼠后肺脏差异蛋白组研究 | 第105-116页 |
·小鼠肺脏组织双向电泳结果 | 第105-106页 |
·差异表达蛋白的分析结果 | 第106-107页 |
·差异表达蛋白的质谱鉴定结果 | 第107-109页 |
·差异表达蛋白质的功能分析 | 第109-113页 |
·GO分析 | 第109-111页 |
·IPA分析 | 第111-113页 |
·小鼠肺脏差异蛋白的Western Blot检测 | 第113-116页 |
4. 讨论 | 第116-125页 |
·活禽市场环境PM_(2.5) 中细菌多样性及动态变化规律 | 第117-119页 |
·活禽市场环境PM_(2.5) 中真菌多样性及动态变化规律 | 第119-120页 |
·气载H5亚型AIV real-time RT-PCR方法的建立及应用 | 第120-121页 |
·不同粒径气溶胶成分(PM_(2.5)~+,PM_(2.5)~-,PM_(10)~+,PM_(10)~-)引起小鼠肺损伤的研究(急性感染试验和慢性感染试验) | 第121-123页 |
·PM_(2.5) 感染小鼠肺脏的差异蛋白质组研究 | 第123-125页 |
5. 结论 | 第125-126页 |
参考文献 | 第126-153页 |
附录 | 第153-156页 |
致谢 | 第156-157页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第157页 |