摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩写名词表 | 第10-11页 |
1 前言 | 第11-21页 |
·研究问题的由来 | 第11-12页 |
·文献综述 | 第12-20页 |
·突变体库的研究进展 | 第12-16页 |
·物理诱变 | 第12页 |
·化学诱变 | 第12-13页 |
·插入突变 | 第13-15页 |
·T-DNA插入突变 | 第14页 |
·转座子插入突变 | 第14-15页 |
·反转录转座子插入突变 | 第15页 |
·其他诱变方法 | 第15-16页 |
·基因克隆方法 | 第16-19页 |
·图位克隆 | 第16页 |
·分离侧翼序列法 | 第16-17页 |
·TAIL-PCR | 第16-17页 |
·接头PCR | 第17页 |
·反向PCR | 第17页 |
·TILLING技术 | 第17-19页 |
·变性高效液相色谱分析技术 | 第17-18页 |
·CELI酶切技术 | 第18页 |
·高分辨溶解曲线技术(HRM) | 第18页 |
·高通量测序技术 | 第18-19页 |
·Illumina Miseq测序技术 | 第19-20页 |
·Illumina Miseq原理 | 第19页 |
·Illumina Miseq的应用 | 第19-20页 |
·研究目的和意义 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-26页 |
·实验材料 | 第21页 |
·实验方法 | 第21-26页 |
·EMS诱变方法 | 第21页 |
·突变群体的种植及筛选 | 第21-22页 |
·建库DNA的抽提 | 第22页 |
·建库DNA的浓度及质量检测 | 第22页 |
·三维混池方法 | 第22页 |
·Miseq检测效率预实验 | 第22-23页 |
·反向筛选基因的引物 | 第23-25页 |
·PCR扩增体系 | 第25页 |
·测序文库的构建 | 第25页 |
·高通量测序数据分析及位点鉴定 | 第25-26页 |
3 结果与分析 | 第26-46页 |
·空育131突变体库的创建 | 第26-27页 |
·M_2 群体突变表型的筛选 | 第27-32页 |
·幼苗期突变表型类型 | 第29页 |
·分蘖期突变表型类型 | 第29-30页 |
·抽穗期突变表型类型 | 第30页 |
·成熟期突变表型类型 | 第30-32页 |
·M_3 种子的保存 | 第32页 |
·突变体库DNA水平突变频率的评价 | 第32-41页 |
·混池容量和测序深度的预实验 | 第32-34页 |
·DNA的制备及三维混池 | 第34-35页 |
·DNA的提取 | 第34页 |
·构建三维DNA池 | 第34-35页 |
·反向筛选目的基因突变体 | 第35-40页 |
·突变体基因型及表型的验证 | 第40-41页 |
·突变体库群体水平突变的评价 | 第41-43页 |
·空育131品种的改良 | 第43-45页 |
·突变体库的评价 | 第45-46页 |
4 讨论 | 第46-50页 |
·采用EMS诱变空育131创建突变体库的意义及应用 | 第46-47页 |
·利用EMS创建突变体库的优势 | 第47-48页 |
·突变频率在品种之间的差异 | 第48页 |
·TILLING技术检测突变的方法及在品种改良上的应用 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-61页 |
附录 1 | 第61-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
个人简介 | 第66页 |