绵羊Klf4和Lin28基因的克隆与序列分析
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 绪论 | 第9-17页 |
| ·细胞的多能性与重编程 | 第9-10页 |
| ·亚全能细胞的研究进展 | 第9页 |
| ·亚全能细胞的特性 | 第9-10页 |
| ·细胞重编程 | 第10页 |
| ·多能性iPS细胞诱导 | 第10-11页 |
| ·利用同源因子的iPS细胞诱导 | 第10-11页 |
| ·利用异源因子的iPS细胞诱导 | 第11页 |
| ·iPS诱导因子及其功能 | 第11-15页 |
| ·诱导因子Oct4 | 第12页 |
| ·诱导因子Sox2 | 第12页 |
| ·诱导因子Nanog | 第12页 |
| ·诱导因子Klf4 | 第12-13页 |
| ·诱导因子Lin28 | 第13-15页 |
| ·诱导因子c-Myc | 第15页 |
| ·诱导因子的相互作用 | 第15页 |
| ·iPS细胞基因的甲基化 | 第15-16页 |
| ·iPS细胞的应用前景 | 第16页 |
| ·研究目的及意义 | 第16-17页 |
| 2 Klf4的克隆与序列分析 | 第17-32页 |
| ·实验材料 | 第17-19页 |
| ·实验菌株 | 第17页 |
| ·实验仪器设备 | 第17页 |
| ·试剂来源 | 第17-18页 |
| ·实验用药品的配制 | 第18-19页 |
| ·试验方法 | 第19-23页 |
| ·胎羊总RNA提取 | 第19页 |
| ·RT-PCR获取cDNA | 第19-20页 |
| ·绵羊Klf4引物设计 | 第20页 |
| ·绵羊Klf4诱导因子的扩增与回收 | 第20-21页 |
| ·特异PCR片段与载体连接 | 第21页 |
| ·质粒DNA的转化与提取 | 第21-22页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第22-23页 |
| ·绵羊Klf4基因编码区的序列分析 | 第23页 |
| ·绵羊KLF4蛋白生物信息学分析 | 第23页 |
| ·实验结果 | 第23-30页 |
| ·绵羊总RNA的检测和RT-PCR扩增 | 第23页 |
| ·Klf4-pMD-T18重组质粒的鉴定 | 第23-24页 |
| ·绵羊Klf4基因DNA测序结果 | 第24页 |
| ·绵羊Klf4基因生物学分析 | 第24-26页 |
| ·绵羊KLF4蛋白生物学分析 | 第26-30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| ·本章小结 | 第31-32页 |
| 3 Lin28的克隆与序列分析 | 第32-43页 |
| ·实验材料 | 第32页 |
| ·实验菌株 | 第32页 |
| ·实验仪器、试剂和药品 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-35页 |
| ·胎羊总RNA提取和cDNA扩增 | 第32页 |
| ·绵羊Lin28引物设计 | 第32页 |
| ·绵羊Lin28基因的扩增与回收 | 第32-33页 |
| ·特异PCR片段与载体连接 | 第33页 |
| ·质粒DNA的转化 | 第33-34页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第34-35页 |
| ·绵羊Lin28基因编码区的序列分析 | 第35页 |
| ·绵羊LIN28蛋白亚细胞定位及锌指结构分析 | 第35页 |
| ·实验结果 | 第35-42页 |
| ·绵羊总RNA的检测和RT-PCR扩增 | 第35页 |
| ·Lin28-PMD-T18重组质粒的鉴定 | 第35-36页 |
| ·绵羊Lin28基因DNA测序结果 | 第36页 |
| ·绵羊Lin28基因生物学分析 | 第36-38页 |
| ·绵羊LIN28蛋白生物学分析 | 第38-42页 |
| ·讨论 | 第42页 |
| ·本章小结 | 第42-43页 |
| 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-48页 |
| 附录 | 第48-54页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
