摘要 | 第1-9页 |
前言 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-20页 |
1 黑色素细胞研究进展 | 第10-12页 |
·黑色素细胞的发生 | 第10页 |
·黑色素细胞的发育 | 第10-11页 |
·促黑色素细胞分裂生长因子 | 第11页 |
·黑色素细胞与基底层的关系 | 第11-12页 |
·黑色素细胞与角质化细胞 | 第12页 |
2 黑色素细胞的生物学特性及其与α-MSH的关系 | 第12-15页 |
·黑色素细胞的生物学特性 | 第12-14页 |
·黑色素细胞与a-MSH的关系 | 第14-15页 |
3 黑色素的合成 | 第15页 |
4 黑色素生成相关的信号转导 | 第15-17页 |
·PKC/DAG | 第16页 |
·PKG/cGMP/NO | 第16页 |
·MAPK级联途径 | 第16-17页 |
·PKA/cAMP | 第17页 |
5 黑色素细胞的体外分离和鉴定 | 第17-19页 |
·细胞分离方法 | 第17-18页 |
·消化酶直接消化法 | 第18页 |
·真皮与表皮分离法 | 第18页 |
·表皮黑色素细胞的鉴定方法 | 第18-19页 |
·形态学的鉴定 | 第18页 |
·染色法 | 第18-19页 |
·qRT-PCR和Western blot | 第19页 |
6 研究目的与意义 | 第19-20页 |
第二章 试验材料及方法 | 第20-33页 |
1 小鼠黑色素细胞体外分离培养 | 第20-24页 |
·试验材料 | 第20-21页 |
·试验动物 | 第20页 |
·主要试剂 | 第20页 |
·试验器材 | 第20-21页 |
·试验方法 | 第21-22页 |
·主要试验溶液的配制 | 第21-22页 |
·组织供体 | 第22页 |
·细胞培养 | 第22-24页 |
·小鼠黑色素细胞的分离与原代培养 | 第22页 |
·小鼠黑色素细胞传代培养 | 第22-23页 |
·小鼠黑色素细胞冻存 | 第23页 |
·小鼠黑色素细胞复苏 | 第23-24页 |
2 小鼠黑色素细胞多巴染色与免疫细胞化学染色 | 第24-27页 |
·材料与方法 | 第24-27页 |
·试验材料 | 第24-25页 |
·试验方法 | 第25-27页 |
3 细胞总RNA提取与qRT-PCR | 第27-31页 |
·材料与方法 | 第27-31页 |
·试验材料 | 第27页 |
·试验方法 | 第27-31页 |
4 细胞增殖试验 | 第31-32页 |
·试验材料 | 第31页 |
·试验细胞 | 第31页 |
·所需试剂、仪器与耗材 | 第31页 |
·试验方法 | 第31-32页 |
·细胞悬液制备 | 第31页 |
·使用iCELLigence实时细胞分析系统进行检测 | 第31-32页 |
5 添加α-MSH试验 | 第32-33页 |
·试验材料 | 第32页 |
·试验细胞 | 第32页 |
·所需试剂、仪器与耗材 | 第32页 |
·试验方法 | 第32-33页 |
第三章 试验结果 | 第33-38页 |
1 原代培养及传代培养 | 第33页 |
2 多巴染色与免疫细胞化学染色 | 第33-35页 |
·多巴染色 | 第33页 |
·免疫细胞化学染色 | 第33-35页 |
3 总RNA质量检测与qRT-PCR结果 | 第35-36页 |
·总RNA质量检测 | 第35页 |
·qRT-PCR结果 | 第35-36页 |
4 细胞增殖结果 | 第36-37页 |
5 添加α-MSH结果 | 第37-38页 |
第四章 讨论 | 第38-40页 |
第五章 结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-46页 |
Abstract | 第46-48页 |
致谢 | 第48页 |