摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
缩略词表 | 第12-13页 |
上篇 文献综述 | 第13-32页 |
第一章 圆环病毒 2 型分子生物学研究进展 | 第13-23页 |
1 病原学及分子流行病学研究 | 第13-20页 |
·病原学 | 第13-17页 |
·PCV 流行病学调查 | 第17-20页 |
2 PCV2 致病机理 | 第20-21页 |
·PCV1 和 PCV2 的分子生物学差异分析 | 第20页 |
·PMWS 的病原学分析 | 第20页 |
·PMWS 致病机理的细胞及分子免疫学分析 | 第20-21页 |
3 PCV2 诊断技术研究进展 | 第21-22页 |
·抗原检测 | 第21-22页 |
·抗体检测 | 第22页 |
4 PCV2 疫苗的研究进展 | 第22-23页 |
第二章 猪输血传播病毒研究进展 | 第23-26页 |
1 研究概述 | 第23页 |
2 TTSuV 的研究现状 | 第23-26页 |
·TTSuV 基因组 | 第23-24页 |
·TTSuV 流行病学调查 | 第24页 |
·TTSuV 感染特点 | 第24-25页 |
·TTSuV 传播途径 | 第25页 |
·TTSuV 致病性研究 | 第25页 |
·TTSuV 检测方法 | 第25-26页 |
第三章 猪博卡病毒的研究进展 | 第26-29页 |
1 病原学发展简介 | 第26页 |
2 分子特征 | 第26-27页 |
3 流行病学研究 | 第27-28页 |
·分布特点 | 第27页 |
·流行感染特点 | 第27-28页 |
·分子流行病学研究方法 | 第28页 |
4 研究展望 | 第28-29页 |
第四章 环介导等温扩增技术概述 | 第29-32页 |
1 LAMP 扩增原理 | 第29-31页 |
2 LAMP 的特点 | 第31页 |
·快速性和高效性 | 第31页 |
·灵敏度高 | 第31页 |
·特异性高 | 第31页 |
·检测方便 | 第31页 |
·操作简单 | 第31页 |
·RT-LAMP | 第31页 |
3 LAMP 的不足 | 第31页 |
4 LAMP 技术的应用 | 第31-32页 |
下篇 实验研究 | 第32-91页 |
第五章 PCV2和PBOV两重 PCR 检测方法的建立与临床样品的检测分析 | 第32-48页 |
1 材料与方法 | 第32-35页 |
·实验材料 | 第32页 |
·主要仪器设备 | 第32页 |
·临床样品及病料的采集 | 第32-33页 |
·引物合成 | 第33页 |
·病料预处理 | 第33页 |
·DNA 的提取 | 第33页 |
·扩增目的片段 | 第33-34页 |
·产物电泳 | 第34页 |
·胶回收 | 第34页 |
·T-A 克隆目的片段 | 第34页 |
·重组质粒的 PCR 鉴定 | 第34页 |
·扩增片段测序分析 | 第34-35页 |
·优化单项 PCR | 第35页 |
·多重 PCR 条件优化 | 第35页 |
2 结果 | 第35-46页 |
·单项 PCR 引物浓度及退火温度的确定 | 第35-40页 |
·多重 PCR 反应条件的优化及确定 | 第40-42页 |
·PCV2 及 PBoV 江西地区的流行病学调查 | 第42-45页 |
·产物序列分析 | 第45-46页 |
3 小结与讨论 | 第46-48页 |
第六章 TTSUV1 和 TTSUV2 多重套式 PCR 检测的建立及临床样品检测分析 | 第48-61页 |
1 材料与方法 | 第48-50页 |
·实验材料 | 第48页 |
·主要仪器设备 | 第48页 |
·引物合成 | 第48页 |
·病料样品的预处理 | 第48页 |
·DNA 的提取 | 第48-49页 |
·目的片段的 PCR 扩增 | 第49页 |
·胶回收 | 第49页 |
·T-A 克隆目的片段 | 第49页 |
·PCR 鉴定重组质粒 | 第49页 |
·单项套式 PCR 条件的优化 | 第49-50页 |
·建立多重套式 PCR 检测方法 | 第50页 |
2 结果 | 第50-59页 |
·单项套式 PCR 引物浓度及退火温度的确定 | 第50-55页 |
·多重 PCR 反应条件的优化及最终反应条件 | 第55-56页 |
·TTSuV1、TTSuV2 及 PCV2 江西地区的流行病学调查 | 第56-57页 |
·多重套式 PCR 产物的序列分析 | 第57-59页 |
3 小结与讨论 | 第59-61页 |
第七章 猪圆环病毒 2 型江西分离株全基因组的克隆、测序及分析 | 第61-82页 |
1 材料与方法 | 第61-63页 |
·材料 | 第61页 |
·方法 | 第61-63页 |
2 结果与分析 | 第63-80页 |
·PCV2 全基因组临床样品的 PCR 扩增 | 第63-64页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第64页 |
·PCV2 江西分离株全基因组分析 | 第64-80页 |
3 小结与讨论 | 第80-82页 |
·引物设计 | 第80页 |
·PCV2 全基因组核苷酸序列比较 | 第80-81页 |
·PCV2 江西分离株的遗传进化分析 | 第81页 |
·PCV2 江西分离株 ORF2 和 ORF3 核苷酸及其编码氨基酸序列分析 | 第81页 |
·PCV2 的 ORF3 蛋白的功能研究 | 第81-82页 |
第八章 猪圆环病毒 2 型 LAMP 检测方法的建立及临床样品检测 | 第82-91页 |
1 材料与方法 | 第82-83页 |
·病料来源 | 第82页 |
·引物 | 第82页 |
·主要试剂 | 第82页 |
·主要仪器 | 第82页 |
·总 DNA 的提取 | 第82页 |
·LAMP 反应体系优化 | 第82-83页 |
2 结果 | 第83-88页 |
·最佳镁离子浓度 | 第83页 |
·最佳内外引物比 | 第83-84页 |
·最佳扩增温度 | 第84页 |
·最佳扩增时间 | 第84-85页 |
·扩增产物酶切结果 | 第85-86页 |
·LAMP 和 PCR 灵敏性试验结果 | 第86-87页 |
·特异性分析结果 | 第87-88页 |
·可视性观察结果 | 第88页 |
3 临床样品的检测结果 | 第88-89页 |
4 小结与讨论 | 第89-91页 |
·小结 | 第89页 |
·讨论 | 第89-91页 |
全文总结 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-102页 |
致谢 | 第102-103页 |
作者简介 | 第103页 |