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不同生境下南极冰藻Chlamydomonas sp.ICE-L不饱和脂肪酸的研究及脂肪酸去饱和酶的功能验证

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
目录第8-10页
第一章 前言第10-23页
   ·不饱和脂肪酸的功能及合成途径第10-12页
     ·不饱和脂肪酸的分类第10-11页
     ·不饱和脂肪酸的功能第11-12页
     ·不饱和脂肪酸的合成途径第12页
   ·脂肪酸去饱和酶研究进展第12-18页
     ·脂肪酸去饱和酶的分类与结构特点第12-14页
     ·脂肪酸去饱和酶的作用机制与活性调控第14-15页
     ·不饱和脂肪酸合成过程中关键去饱和酶的研究第15-18页
   ·南极冰藻第18-20页
     ·南极冰藻概况第18-19页
     ·南极衣藻 Chlamydomonas sp. ICE-L第19-20页
   ·微藻油脂、脂肪酸及去饱和酶基因的研究第20-22页
     ·微藻油脂、脂肪酸的研究现状第20-21页
     ·真核微藻脂肪酸去饱和酶及基因的相关研究第21-22页
   ·本论文研究内容和意义第22-23页
第二章 南极冰藻在不同生境下的生长、产油及脂肪酸组成第23-34页
   ·试验材料第23-24页
     ·藻种和培养方法第23页
     ·试剂及配制方法第23页
     ·试验仪器第23-24页
   ·试验方法第24-26页
     ·不同条件的处理第24-25页
     ·南极衣藻 Chlamydomonas sp. ICE-L 的生长曲线测定第25页
     ·南极衣藻 Chlamydomonas sp. ICE-L 的总脂提取第25页
     ·南极衣藻 Chlamydomonas sp. ICE-L 的脂肪酸含量测定第25-26页
   ·结果与分析第26-32页
     ·南极衣藻 Chlamydomonas sp. ICE-L 的生长曲线第26-27页
     ·南极衣藻 Chlamydomonas sp. ICE-L 的产油第27-29页
     ·南极衣藻 Chlamydomonas sp. ICE-L 的脂肪酸含量第29-32页
   ·讨论与小结第32-34页
第三章 南极衣藻 Chlamydomonas sp. ICE-L 脂肪酸去饱和酶相关基因的克隆与生物信息学分析第34-44页
   ·试验材料第34页
   ·试验方法第34-39页
     ·脂肪酸去饱和酶相关基因的克隆第34-39页
     ·脂肪酸去饱和酶相关基因的生物信息学分析第39页
   ·结果与分析第39-42页
     ·PCR 电泳结果第39-40页
     ·脂肪酸不饱和酶的序列信息第40页
     ·脂肪酸不饱和酶的结构分析和系统进化树的构建第40-42页
   ·讨论与小结第42-44页
第四章 不同生境南极衣藻 Chlamydomonas sp. ICE-L 脂肪酸去饱和酶相关基因的基因表达第44-55页
   ·实验材料第44页
     ·藻种第44页
     ·试剂及仪器第44页
   ·试验方法第44-46页
     ·胁迫诱导第44-45页
     ·南极衣藻总 RNA 提取及检测第45页
     ·cDNA 合成第45页
     ·定量引物设计第45-46页
     ·实时荧光定量 PCR 反应体系第46页
     ·数据处理第46页
   ·结果与分析第46-53页
     ·不同温度对脂肪酸去饱和酶基因表达的影响第46-50页
     ·不同盐度对脂肪酸去饱和酶基因表达的影响第50-53页
   ·讨论与小结第53-55页
第五章 南极衣藻 Chlamydomonas sp. ICE-LΔ12CiFAD 表达载体的构建及在集胞藻和酿酒酵母中的表达第55-68页
   ·试验材料第55-57页
     ·集胞藻、培养基和主要试剂第55-56页
     ·酿酒酵母、培养基和主要试剂第56-57页
   ·试验方法第57-62页
     ·Δ12CiFAD 基因的生物信息学分析第57页
     ·引物设计与目的片段的扩增第57-58页
     ·表达载体的构建第58-60页
     ·重组质粒的聚球藻 Synechococcus 6803 转化第60-61页
     ·重组质粒的酵母 Saccharomyces cerevisiae 转化第61-62页
     ·重组体的诱导表达第62页
     ·脂肪酸组成和含量的测定第62页
   ·结果与分析第62-66页
     ·Δ12CiFAD 的生物信息学分析第62-64页
     ·聚胞藻和酵母转化子的获得与 PCR 检测第64-65页
     ·重组菌株中脂肪酸成分分析第65-66页
   ·讨论与小结第66-68页
第六章 总结及后续工作计划第68-71页
   ·总结第68-69页
   ·后续工作计划第69-71页
参考文献第71-78页
硕士期间发表文章第78-79页
致谢第79页

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