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一种肌动蛋白相关蛋白在细胞迁移和粘附中的作用

摘要第1-7页
Abstract第7-12页
第1章 绪论第12-23页
 1. Palladin 的发现第13页
 2. Palladin 的结构与亚型第13-16页
   ·Palladin的结构第13页
   ·Palladin的亚型第13-16页
 3. Palladin 的定位与分布特性第16-17页
 4. Palladin 的分子支架特征及其对细胞形态的影响第17-19页
 5. Palladin 的功能与研究意义第19-22页
   ·Palladin对actin细胞骨架构建的影响第20页
   ·Palladin在胚胎发育中的作用第20页
   ·Palladin在创伤愈合中的作用第20-21页
   ·Palladin与胰腺癌的相关性第21-22页
 6. 本论文的研究目的与意义第22-23页
第2章 Palladin相关表达载体的构建第23-39页
   ·实验材料第23-24页
     ·菌种和质粒第23页
     ·各种酶及主要生化试剂第23页
     ·主要仪器第23-24页
   ·实验方法第24-32页
     ·质粒提取第24-26页
     ·琼脂糖凝胶电泳第26页
     ·DNA 的定量第26页
     ·目的基因的获得第26-28页
     ·限制性内切酶的酶切反应第28页
     ·线性质粒 DNA 末端去磷酸化第28-29页
     ·琼脂糖凝胶回收试剂盒 DNA 片段的回收第29页
     ·外源 DNA 片段与质粒载体的连接反应第29页
     ·氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞第29-30页
     ·连接产物的转化第30页
     ·阳性菌株筛选及鉴定(PCR 和酶切)第30-31页
     ·蛋白印记分析(Western blot)第31页
     ·转染第31-32页
   ·实验结果第32-38页
     ·pcDNA3.1(+)-Flag-HPF 表达载体的构建第32-34页
     ·pGenesil-1-palladin-shRNA基因表达沉默载体的构建第34-36页
     ·转染后靶细胞中palladin 的水平第36-38页
 本章小结第38-39页
第3章 Palladin对细胞迁移和粘附的影响第39-62页
   ·实验材料第39-40页
     ·细胞系、菌株及载体质粒第39页
     ·试剂及抗体第39页
     ·主要实验设备第39-40页
   ·实验方法第40-45页
     ·细胞培养第40-41页
     ·细胞计数第41-42页
     ·用于哺乳动物转染的高纯度质粒 DNA 的制备第42-43页
     ·转染(见第二章方法)第43页
     ·细胞裂解第43页
     ·细胞创伤愈合实验(Cell Wound Healing Assay)第43页
     ·Transwell实验第43-44页
     ·靶细胞在细胞外基质上的粘附实验第44页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第44-45页
     ·蛋白印记分析(见第二章方法)第45页
     ·靶细胞在不同细胞外基质上的粘附性分析第45页
   ·实验结果第45-61页
     ·Palladin对细胞迁移能力的影响第45-51页
     ·Palladin对靶细胞在胞外基质FN上粘附的影响第51-53页
     ·细胞状态与palladin水平的关系第53-56页
     ·靶细胞在不同条件下的粘附性分析第56-61页
 本章小结第61-62页
全文结论第62-64页
参考文献第64-69页
硕士期间发表的论文及专利第69-70页
致谢第70页

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