| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-31页 |
| ·脂肪酶的界面催化理论 | 第13-18页 |
| ·脂肪酶活性位上的―盖子‖结构 | 第13-14页 |
| ·脂肪酶的催化活性中心 | 第14-16页 |
| ·胆汁盐对脂肪酶界面活化的影响 | 第16-18页 |
| ·胆汁盐的结构 | 第16-17页 |
| ·胆汁盐对脂肪酶脂解的影响 | 第17-18页 |
| ·固定化脂肪酶的手性拆分 | 第18-23页 |
| ·固定化常用载体 | 第18-19页 |
| ·商品化固定化脂肪酶的应用 | 第19-20页 |
| ·固定化方法对手性拆分的影响 | 第20-23页 |
| ·吸附法 | 第20-21页 |
| ·共价结合法 | 第21页 |
| ·包埋法 | 第21-22页 |
| ·多种方法固定 | 第22-23页 |
| ·Langmuir-Blodgett(LB)膜法固定化 | 第23-29页 |
| ·LB 膜法固定化蛋白质的方法及表征 | 第23-25页 |
| ·固定化蛋白质的方法 | 第23-24页 |
| ·常用表征技术 | 第24-25页 |
| ·LB 膜法固定化蛋白质影响因素 | 第25-27页 |
| ·表面活性剂的影响 | 第25-26页 |
| ·亚相的影响 | 第26页 |
| ·载体的影响 | 第26-27页 |
| ·LB 膜法固定化蛋白质应用于生物传感器 | 第27-29页 |
| ·蛋白质的结构稳定性 | 第27页 |
| ·蛋白质的动力学行为 | 第27-28页 |
| ·控制蛋白质取向 | 第28-29页 |
| ·课题的提出 | 第29-31页 |
| 第二章 载体表面化学组成对脂肪酶的吸附及活性的影响 | 第31-47页 |
| ·引言 | 第31-32页 |
| ·实验部分 | 第32-38页 |
| ·实验材料与试剂 | 第32-33页 |
| ·载体制备与表征 | 第33-34页 |
| ·浇注膜的制备 | 第33-34页 |
| ·旋涂膜的制备 | 第34页 |
| ·载体接触角表征 | 第34页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第34-35页 |
| ·脂肪酶溶液的配制 | 第35页 |
| ·脂肪酶的固定及吸附量测定 | 第35页 |
| ·脂肪酶活性测定 | 第35-36页 |
| ·底物及产物吸附量测定 | 第36-37页 |
| ·紫外法 | 第36页 |
| ·气相法 | 第36-37页 |
| ·气-固界面和频共振光谱（SFG）的表征 | 第37-38页 |
| ·结果与讨论 | 第38-46页 |
| ·载体表面接触角 | 第38-39页 |
| ·脂肪酶活性 | 第39-42页 |
| ·对硝基苯酚的标准曲线 | 第39页 |
| ·脂肪酶活性的测定 | 第39-42页 |
| ·载体表面脂肪酶吸附量 | 第42-43页 |
| ·载体表面脂肪酶底物及产物吸附量 | 第43-44页 |
| ·SFG 研究脂肪酶在载体表面分子构象 | 第44-46页 |
| ·本章小结 | 第46-47页 |
| 第三章 胆汁盐对脂肪酶水解活性及吸附行为的影响 | 第47-57页 |
| ·引言 | 第47-48页 |
| ·实验部分 | 第48-50页 |
| ·实验材料与试剂 | 第48-49页 |
| ·实验方法与表征 | 第49-50页 |
| ·脂肪酶的纯化 | 第49页 |
| ·酶活性测定 | 第49-50页 |
| ·表面张力测试 | 第50页 |
| ·和频共振光谱表征 | 第50页 |
| ·结果与讨论 | 第50-55页 |
| ·胆汁盐浓度对脂肪酶活性的影响 | 第50-52页 |
| ·胆汁盐浓度对脂肪酶溶液表面张力的影响 | 第52-53页 |
| ·SFG 探测胆汁盐对脂肪酶界面吸附的影响 | 第53-55页 |
| ·本章小结 | 第55-57页 |
| 第四章 功能化载体对固定化脂肪酶手性拆分的影响 | 第57-75页 |
| ·引言 | 第57-58页 |
| ·实验部分 | 第58-64页 |
| ·实验材料与试剂 | 第58-59页 |
| ·底物合成与表征 | 第59-60页 |
| ·乙酸苯乙酯合成 | 第59页 |
| ·硬脂酸苯乙酯合成 | 第59-60页 |
| ·底物的表征 | 第60页 |
| ·聚丙烯腈(PAN)的化学改性与表征 | 第60-62页 |
| ·聚丙烯腈的羧基化改性(PAN-COOH) | 第60页 |
| ·氨基化改性(PAN-NH_2) | 第60-61页 |
| ·脱氧胆酸改性(PAN-DCA) | 第61页 |
| ·胆酸改性(PAN-CA) | 第61-62页 |
| ·改性 PAN 的表征 | 第62页 |
| ·聚丙烯腈物理吸附法固定 | 第62页 |
| ·拆分反应 | 第62-63页 |
| ·乙酸苯乙酯的水解 | 第62-63页 |
| ·硬脂酸苯乙酯的水解 | 第63页 |
| ·分析方法 | 第63-64页 |
| ·结果与讨论 | 第64-73页 |
| ·手性底物红外及核磁表征 | 第64-66页 |
| ·改性聚丙烯腈的表征 | 第66-67页 |
| ·胆汁盐浓度对自由脂肪酶的影响 | 第67-70页 |
| ·水解活性 | 第67-69页 |
| ·对映体过量值 ee_p | 第69-70页 |
| ·改性聚丙烯腈固定化脂肪酶的手性拆分能力 | 第70-73页 |
| ·脂肪酶固定化量 | 第70-71页 |
| ·固定化酶比活性 | 第71-72页 |
| ·固定化酶对映体过量值 ee_p | 第72-73页 |
| ·本章小结 | 第73-75页 |
| 第五章 Langmuir-Blodgett (LB)膜法固定化酶 | 第75-101页 |
| ·引言 | 第75-76页 |
| ·实验部分 | 第76-83页 |
| ·实验材料与试剂 | 第76-77页 |
| ·脂肪酶 LB 膜固定化 | 第77-78页 |
| ·脂肪酶表面压-面积曲线 | 第77页 |
| ·脂肪酶 LB 膜制备 | 第77页 |
| ·脂肪酶吸附法固定 | 第77-78页 |
| ·脂肪酶活性测定 | 第78页 |
| ·荧光标记法测脂肪酶载酶量 | 第78页 |
| ·辣根过氧化物酶（HRP）的 LB 膜固定化 | 第78-83页 |
| ·HRP 类底物分子的合成与表征 | 第78-79页 |
| ·HRP 载体聚合物合成与表征 | 第79-80页 |
| ·HRP 载体的制备与表征 | 第80-81页 |
| ·HRP 的表面压-面积曲线 | 第81页 |
| ·HRP 的 LB 膜转移 | 第81页 |
| ·HRP 的吸附法固定 | 第81页 |
| ·HRP 的活性测试 | 第81-82页 |
| ·荧光标记法测定固定化 HRP 载酶量 | 第82页 |
| ·LB 膜法固定化 HRP 储存稳定性测定 | 第82页 |
| ·ATR-IR 表征 | 第82-83页 |
| ·结果与讨论 | 第83-100页 |
| ·脂肪酶表面压-面积曲线 | 第83-84页 |
| ·固定化脂肪酶活性 | 第84-85页 |
| ·载体对活性的影响 | 第85页 |
| ·脂肪酶固定化量的确定 | 第85-88页 |
| ·荧光标记技术 | 第85-86页 |
| ·CRL-FITC 荧光标记紫外谱图 | 第86-87页 |
| ·CRL-FITC 荧光标记标准曲线 | 第87-88页 |
| ·CRL 固定化量 | 第88页 |
| ·HRP 类底物分子改性多巴的红外（FT-IR）表征 | 第88-89页 |
| ·HRP 载体聚合物化学结构的表征 | 第89-91页 |
| ·H~1NMR | 第89-90页 |
| ·载体表面接触角测定 | 第90-91页 |
| ·HRP 表面压-面积曲线 | 第91-92页 |
| ·HRP 的 LB 膜活性 | 第92-94页 |
| ·脂质类型对 HRP 活性影响 | 第92-93页 |
| ·载体对 HRP 活性影响 | 第93-94页 |
| ·HRP 的 LB 膜稳定性 | 第94页 |
| ·LB 膜法与吸附法固定化比较 | 第94-95页 |
| ·HRP 固定化量的确定 | 第95-98页 |
| ·HRP-FITC 荧光标记紫外谱图 | 第95-96页 |
| ·HRP-FITC 荧光标准曲线 | 第96页 |
| ·荧光法测 HRP 固定化量 | 第96-98页 |
| ·固定化 HRP 构象表征 | 第98-100页 |
| ·本章小结 | 第100-101页 |
| 第六章 总结与展望 | 第101-104页 |
| 参考文献 | 第104-116页 |
| 攻读学位期间研究成果 | 第116-117页 |
| 致谢 | 第117页 |
