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抑制素和JAK/STAT信号途径关键因子在甲壳动物免疫反应中的功能研究

摘要第1-10页
Abstract第10-13页
符号说明第13-15页
第一章 综述第15-25页
 免疫系统第15页
 先天免疫第15-16页
 1. 抑制素研究进展第16-17页
 2. JAK/STAT信号通路的研究进展第17-21页
 3. 抗菌肽的研究进展第21-23页
 4. 本研究的目的第23-25页
第二章 克氏原螯虾抑制素抑制白斑病毒复制第25-53页
 一. 引言第25-26页
 二. 材料与方法第26-35页
  1. 菌株,载体,试剂,仪器第26-27页
  2. 白斑病毒感染小龙虾及组织材料的收集第27页
  3. 基因克隆及其序列分析第27页
  4. 组织分布及其表达模式分析第27-28页
  5. 重组表达和多克隆抗体的制备第28页
  6. 蛋白水平的组织分布和表达模式分析第28-29页
  7. PHB1重组蛋白抑制白斑病毒复制的体内实验第29-30页
  8. RNA干扰实验第30-31页
  9. 使用Far-Western技术检测PHB1与病毒蛋白的相互作用第31-32页
  10. Pull-down,CoIP实验第32-34页
  11. 免疫细胞化学实验第34页
  12. 三维模型分析第34-35页
  13. 免疫胶体金实验第35页
 三. 结果第35-48页
  1. PHB1序列分析与鉴定第35-38页
  2. PHB1的组织分布第38-39页
  3. PHB1在病毒刺激后的表达模式第39-40页
  4. 病毒复制抑制试验第40-41页
  5. PHB1干扰和干扰后蛋白拯救时病毒复制检测第41-43页
  6. 小龙虾存活率统计第43-44页
  7. PHB1与WSSV的囊膜蛋白VP24、VP26以及VP28相互作用第44-46页
  8. PHB1与VP28的相互作用的3D模型第46-48页
  9. PHB1黏附在WSSV的表面第48页
 四. 讨论第48-53页
第三章 JAK/STAT信号通路参与对虾的抗细菌免疫第53-83页
 一. 引言第53-54页
 二. 材料与方法第54-61页
  1. 菌株,载体,试剂,仪器第54页
  2. 实验动物与免疫刺激第54-55页
  3. 基因克隆,表达纯化与抗体制备第55页
  4. 基因软件分析与鉴定第55-56页
  5. 实时定量PCR检测组织分布与表达模式第56页
  6. 细菌结合实验第56-57页
  7. 多糖结合实验第57页
  8. Pull-down实验第57页
  9. RNAi实验第57-58页
  10. 细菌清除实验第58-59页
  11. 死亡率统计第59页
  12. Western blot实验第59-60页
  13. 免疫细胞化学实验检测MjSTAT的细胞定位第60页
  14. AMPs筛选第60-61页
  15. MjSOCS2和INH5抑制STAT磷酸化第61页
 三. 结果第61-78页
  1. 基因克隆与表达第61-64页
  2. MjIL-CTL、MjDome、MjSTAT和MjSOCS2的组织分布第64-65页
  3 弧菌刺激后MjIL-CTL、MjDome、MjSTAT和MjSOCS2在肠中的表达模式第65-66页
  4. MjIL-CTL能够与细菌相互作用第66-67页
  5. MjIL-CTL与MjDome的结合实验第67-68页
  6. 弧菌表面分子能够诱导STAT的磷酸化第68-69页
  7. STAT被磷酸化前后亚细胞定位的检测第69-70页
  8. MjDome参与STAT信号途径第70-71页
  9. JAK/STAT通路调控抗菌肽的表达第71-76页
  10. MjSTAT和MjSOCS2在抗弧菌免疫中的作用第76-78页
 四. 讨论第78-83页
第四章 一种含跨膜域的甲壳肽参与细胞吞噬作用第83-99页
 一. 引言第83页
 二. 材料与方法第83-87页
  1. 菌株,载体,试剂,仪器第83-84页
  2. 实验动物与免疫刺激第84页
  3. 基因克隆与鉴定第84页
  4. 重组表达和抗体的制备第84-85页
  5. MjMCru亚细胞定位第85页
  6. 实时定量PCR和Western blot分析MjMCru表达模式第85页
  7. 液体抑菌实验第85-86页
  8. 细菌结合实验第86页
  9. 多糖结合实验第86页
  10. 死亡率统计第86-87页
  11. 细胞吞噬实验第87页
 三. 结果第87-96页
  1. 基因的克隆与鉴定第87-88页
  2. MjMCru的组织分布第88-89页
  3. MjMCru的亚细胞定位研究第89-90页
  4. MjMCru被弧菌和金黄色葡萄球菌诱导上调表达第90-91页
  5. WAP结构域抑制细菌的增殖第91-92页
  6. MjMCru能够通过结合细菌的PAMPs结合细菌第92-93页
  7. MjMCru多肽能够提高细菌刺激时对虾的存活率第93-94页
  8. MjMCru参与了细胞对细菌的吞噬过程第94-96页
 四. 讨论第96-99页
总结和创新点第99-101页
参考文献第101-111页
致谢第111-113页
在读期间发表的文章第113-114页
学位论文评阅及答辩情况表第114页

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