摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
符号说明 | 第8-10页 |
第一章 :无脊椎动物先天免疫机制综述 | 第10-20页 |
一、无脊椎动物先天免疫机制 | 第10-20页 |
1. 物理防御 | 第11页 |
·体表 | 第11页 |
·消化道 | 第11页 |
2. 细胞免疫 | 第11-13页 |
·吞噬作用 | 第11-13页 |
·包被作用及结节形成作用 | 第13页 |
3. 体液免疫 | 第13-17页 |
·抗菌肽的产生 | 第13-15页 |
·血淋巴的凝结 | 第15-16页 |
·酚氧化酶原系统的激活 | 第16-17页 |
4. 模式识别受体 | 第17-20页 |
第二章 :钙联蛋白的研究进展 | 第20-26页 |
一、钙联蛋白概述 | 第20页 |
二、钙联蛋白的结构和功能 | 第20-25页 |
1. 钙联蛋白的结构和结合活性 | 第20-22页 |
2. 钙联蛋白的功能 | 第22-25页 |
·蛋白质折叠和蛋白质合成质量控制 | 第22-23页 |
·内质网相关的蛋白降解机制 | 第23页 |
·Ca~(2+)稳态调节和信号转导 | 第23-24页 |
·内质网应激 | 第24页 |
·细胞凋亡 | 第24-25页 |
三、钙联蛋白在免疫中的研究 | 第25-26页 |
本研究的目的和技术路线 | 第26-28页 |
研究目的 | 第26页 |
技术路线 | 第26-28页 |
第三章 :对虾中钙联蛋白在抗细菌免疫中的功能研究 | 第28-58页 |
一、引言 | 第28-29页 |
二、材料和方法 | 第29-44页 |
1. 材料 | 第29-30页 |
·实验材料、菌株和载体 | 第29页 |
·试剂和仪器 | 第29-30页 |
2. 方法 | 第30-44页 |
·对虾的免疫刺激 | 第30页 |
·总RNA的提取 | 第30-31页 |
·cDNA的合成 | 第31页 |
·MjCnx基因的克隆 | 第31-34页 |
·序列分析 | 第34-35页 |
·半定量RT-PCR和实时定量qRT-PCR | 第35页 |
·MjCnx的重组表达和蛋白纯化及抗体制备 | 第35-38页 |
·Western blot | 第38-39页 |
·免疫细胞化学 | 第39页 |
·细胞表面蛋白标记实验 | 第39-40页 |
·细菌结合实验 | 第40页 |
·糖结合实验 | 第40-41页 |
·体内清除实验 | 第41页 |
·RNAi后的体内清除实验 | 第41-43页 |
·荧光标记鳗弧菌及细菌吞噬实验 | 第43-44页 |
三、结果 | 第44-54页 |
1. MjCnx属于钙网蛋白家族 | 第44-48页 |
2. MjCnx存在于多种组织中并且在RNA水平上的表达受到细菌刺激影响 | 第48-49页 |
3. MjCnx的重组表达和抗体制备 | 第49-50页 |
4. MjCnx在蛋白水平上的表达受到鳗弧菌刺激上调并且同时存在于血细胞的细胞质和细胞表面 | 第50-52页 |
5. MjCnx可以通过结合细菌表面的多糖来结合细菌 | 第52-53页 |
6. MjCnx可以增强体内清除效率 | 第53页 |
7. 沉默MjCnx会削弱体内清除效率 | 第53-54页 |
8. MjCnx可以增强血细胞的吞噬效率 | 第54页 |
四、讨论 | 第54-58页 |
创新点总结 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
致谢 | 第66-68页 |
在读期间发表文章 | 第68-69页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第69页 |