| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 缩略语 | 第9-10页 |
| 第一部分 文献综述与实验设计 | 第10-18页 |
| 第一章 背景综述 | 第11-16页 |
| 1 疟疾及疟疾疫苗的研究进展 | 第11-13页 |
| ·疟疾的定义、类型 | 第11页 |
| ·疟原虫生活史 | 第11-12页 |
| ·疟疾的防治 | 第12-13页 |
| 2 表面蛋白 Pys25 和 Pys48 的研究 | 第13页 |
| 3 家蚕杆状病毒表达系统研究进展 | 第13-16页 |
| ·杆状病毒表达系统研究进展 | 第13-15页 |
| ·家蚕杆状病毒表达系统的优点 | 第15-16页 |
| 第二章 实验方案设计 | 第16-18页 |
| 1 实验目的和意义 | 第16页 |
| 2 实验内容 | 第16-17页 |
| 3 实验流程图 | 第17-18页 |
| 第二部分 研究论文 | 第18-61页 |
| 第一章 生物信息学分析 | 第19-25页 |
| 1 生物信息学分析常用工具和软件 | 第19页 |
| 2 生物信息学的分析结果 | 第19-24页 |
| ·Pys25 和 Pys48 的核苷酸序列及氨基酸序列分析 | 第19-20页 |
| ·Pys25 和 Pys48 的疏水性预测 | 第20-21页 |
| ·Pys25 和 Pys48 的信号肽分析 | 第21-22页 |
| ·Pys25 和 Pys48 蛋白的跨膜区预测 | 第22-23页 |
| ·Pys25 和 Pys48 蛋白功能位点预测 | 第23-24页 |
| ·Pys25 和 Pys48 蛋白保守性分析 | 第24页 |
| 3 生物信息学分析结果讨论 | 第24-25页 |
| 第二章 约氏疟原虫基因 PYS25 和 PYS48 的克隆 | 第25-32页 |
| 1 材料与试剂 | 第25-26页 |
| ·材料 | 第25页 |
| ·试剂 | 第25页 |
| ·试剂配制 | 第25-26页 |
| 2 方法 | 第26-30页 |
| ·TG1 感受态细胞的制备 | 第26页 |
| ·目的基因 Pys25 和 Pys48 的克隆 | 第26-27页 |
| ·PCR 产物割胶回收 | 第27-28页 |
| ·载体质粒提取 | 第28页 |
| ·PCR 产物与载体的双酶切及割胶回收 | 第28页 |
| ·连接转化涂板 | 第28-29页 |
| ·重组克隆的筛选和鉴定 | 第29-30页 |
| 3 结果 | 第30-31页 |
| ·PCR 扩增目的片段 | 第30页 |
| ·重组质粒的 PCR 与双酶切鉴定 | 第30-31页 |
| 4 讨论 | 第31-32页 |
| 第三章 PYS25 和 PYS48 蛋白的原核表达纯化及多克隆抗体的制备 | 第32-42页 |
| 1 材料与试剂 | 第32-35页 |
| ·材料 | 第32页 |
| ·试剂 | 第32页 |
| ·试剂配制 | 第32-35页 |
| 2 方法 | 第35-39页 |
| ·重组载体转化表达菌及目的蛋白的诱导表达和鉴定 | 第35-36页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第36-37页 |
| ·多抗的制备 | 第37-39页 |
| 3 结果 | 第39-41页 |
| ·重组蛋白的表达与纯化结果 | 第39-40页 |
| ·原核多克隆抗体的效价测定 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-42页 |
| 第四章 PYS25 和 PYS48 蛋白在家蚕杆状病毒表面展示系统中的表达 | 第42-61页 |
| 1 材料与试剂 | 第42-43页 |
| ·材料 | 第42页 |
| ·试剂 | 第42页 |
| ·试剂配制 | 第42-43页 |
| 2 方法 | 第43-54页 |
| ·基因 CMV-Ph-SP-TM 的合成及引物设计 | 第43-44页 |
| ·转移载体 pFastBac Dual-CMV-Ph-SP- TM 的构建 | 第44-46页 |
| ·重组质粒的构建 | 第46页 |
| ·重组病毒基因组 Bacmid-SP-Pys25 和 Bacmid-SP-Pys48 的构建 | 第46-49页 |
| ·重组病毒的获得 | 第49-51页 |
| ·重组蛋白的表达鉴定 | 第51-54页 |
| 3 结果 | 第54-60页 |
| ·重组载体和重组质粒的构建 | 第54-55页 |
| ·重组 Bacmid 和病毒基因组的 PCR 鉴定 | 第55页 |
| ·重组蛋白在家蚕 BmN 细胞中的表达鉴定 | 第55-57页 |
| ·重组蛋白的免疫荧光鉴定 | 第57-59页 |
| ·多抗的制备与检测 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
