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小麦TaSSP1基因和其拟南芥同源基因AT3G14067的克隆及其功能分析

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-16页
缩略词对照表第16-17页
第一章 文献综述第17-47页
 1 蛋白酶定义和分类第17页
 2 植物丝氨酸蛋白酶研究进展第17-25页
   ·丝氨酸蛋白酶结构及催化机制第17-19页
   ·植物丝氨酸蛋白酶第19-20页
   ·植物枯草杆菌蛋白酶类蛋白酶第20-24页
   ·小麦枯草杆菌蛋白酶类蛋白酶的纯化、鉴定与其抗体制备第24-25页
 3 Subtilases的应用及其蛋白质工程研究第25-27页
   ·酶产量第25页
   ·酶活性第25-26页
   ·酶稳定性第26页
   ·酶适应低温环境第26页
   ·酶在有机相中的反应效率第26-27页
 4 Subtilases的生理作用第27-36页
   ·蛋白的非选择性降解第27页
   ·蛋白酶原的降解酶第27-28页
   ·参与植物的生长发育与衰老第28-32页
   ·非生物胁迫响应第32-36页
   ·其他生理作用第36页
 5 激素对植物体生长的影响第36-42页
   ·五大传统激素第36-37页
   ·植物激素对植物叶片衰老的作用第37-40页
   ·植物激素对植物响应非生物胁迫的调控第40-42页
 6 基因功能研究方法的方法和技术第42-47页
   ·基因的生物信息学分析第42-43页
   ·基因的时空表达谱分析第43页
   ·基因的功能预测第43页
   ·基因功能的实验学验证第43页
   ·RACE技术第43-47页
第二章 小麦TaSSP1基因的克隆及其功能分析第47-79页
 1 材料与方法第47-63页
   ·材料第47页
   ·试剂第47页
   ·溶液配制第47-49页
   ·仪器第49-50页
   ·试验方法第50-59页
   ·TaSSP1序列和功能分析第59-60页
   ·小麦TaSSP1基因的组织特异性表达第60-61页
   ·暗诱导处理叶片TaSSP1转录及其蛋白水平表达和酶活性分析第61-62页
   ·激素和非生物胁迫处理叶片中TaSSP1转录及其蛋白水平表达和酶活性分析第62页
   ·叶片中Rubisco大亚基的SDS-PAGE分析鉴定第62-63页
   ·不同二价金属离子对TaSSP1酶活性的影响第63页
 2 结果与分析第63-79页
   ·TaSSP1基因全长的获得第63-66页
   ·TaSSP1序列的结构域及结构特性分析第66-71页
   ·TaSSP1基因的不同组织特异性表达第71页
   ·暗处理下叶片TaSSP1基因的转录和酶活性水平变化第71-73页
   ·激素处理下叶片TaSSP1基因的转录及其酶活性水平变化第73-75页
   ·非生物胁迫处理下叶片TaSSP1基因的转录水平变化第75-76页
   ·TaSSP1蛋白表达水平与Rubisco大亚基的降解第76-77页
   ·不同二价离子对TaSSP1酶活性的影响第77-79页
第三章 拟南芥AT3G14067基因序列及其转基因植株的表型分析第79-107页
 1 材料与方法第79-90页
   ·实验材料第79-82页
   ·实验方法第82-90页
 2 结果与分析第90-107页
   ·拟南芥AT3G14067序列分析第90-92页
   ·拟南芥AT3G14067基因的克隆第92-93页
   ·AT3G14067基因CDS编码区连入pCAMBIA1304表达载体及其鉴定第93页
   ·AT3G14067-pCAMBIA1304重组质粒转化农杆菌第93-94页
   ·根癌农杆菌介导法转化拟南芥第94页
   ·基因组DNA水平上的转基因植株的检测第94-95页
   ·转录水平上的超表达植株和突变体株系的检测第95-96页
   ·转基因拟南芥表型分析第96-100页
   ·转基因拟南芥表型变化统计分析第100-107页
第四章 拟南芥AT3G14067基因的功能研究第107-128页
 1 材料与方法第107-116页
   ·实验材料第107页
   ·实验方法第107-116页
 2 结果与分析第116-128页
   ·拟南芥AT3G14067基因的组织特异性表达第116页
   ·拟南芥AT3G14067基因对激素和非生物因素胁迫的响应第116-118页
   ·暗诱导衰老处理下AT3G14067基因在莲座叶叶片中的表达第118页
   ·AT3G14067基因在种子萌发阶段对不同光质处理的响应第118-119页
   ·不同衰老程度莲座叶叶片中AT3G14067基因的表达变化第119-120页
   ·转基因拟南芥中衰老相关生理参数的测定第120-124页
   ·转基因拟南芥中衰老相关基因的表达情况第124-126页
   ·转基因拟南芥中与下胚轴发育调控相关基因的表达情况第126-127页
   ·转基因拟南芥中与花发育调控相关基因的表达情况第127-128页
全文讨论第128-135页
全文结论第135-137页
创新之处第137-139页
参考文献第139-153页
附录第153-175页
 附录1 灵菌红素合成酶系PigA-PigN的克隆表达及其PigF、PigK蛋白晶体培养及其三维结构解析第153-165页
 附录2 Thermomonaspora fusca YX膜内切割金属蛋白酶S2P的晶体结构研究第165-175页
攻读博士学位期间发表与投送的论文第175-177页
致谢第177页

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