| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第1章 综述 | 第11-21页 |
| ·脱氢酶的性质及应用 | 第11-15页 |
| ·脱氢酶的分类 | 第11-12页 |
| ·脱氢酶与辅酶相互作用机理 | 第12-14页 |
| ·脱氢酶的应用 | 第14-15页 |
| ·辅酶再生 | 第15-17页 |
| ·化学方法辅酶再生 | 第15页 |
| ·酶法辅酶再生 | 第15-17页 |
| ·多酶催化 | 第17-20页 |
| ·偶联反应 | 第17-18页 |
| ·通过自组装构建具有预期功能的多酶复合体催化偶联反应 | 第18-19页 |
| ·ssDNA与蛋白质(酶)的交联方法 | 第19-20页 |
| ·本课题研究的意义及研究思路 | 第20-21页 |
| 第2章 由orf382编码的脱氢酶结构及酶学性质研究 | 第21-49页 |
| ·引言 | 第21页 |
| ·实验材料 | 第21-26页 |
| ·质粒与菌株 | 第21页 |
| ·试剂 | 第21-23页 |
| ·实验仪器与设备 | 第23页 |
| ·试剂的配制 | 第23-26页 |
| ·实验方法 | 第26-37页 |
| ·本章实验流程 | 第26页 |
| ·重组表达质粒构建 | 第26-31页 |
| ·目的蛋白的表达与分离纯化 | 第31-34页 |
| ·蛋白的功能鉴定和表征 | 第34-37页 |
| ·实验结果与讨论 | 第37-48页 |
| ·重组质粒的构建 | 第37-39页 |
| ·目的蛋白的表达和分离纯化 | 第39-48页 |
| ·本章小结 | 第48-49页 |
| 第3章 蛋白质-ssDNA交联反应方法的建立及融合proA~*标签脱氢酶的制备 | 第49-65页 |
| ·引言 | 第49页 |
| ·实验材料 | 第49-52页 |
| ·质粒、菌株和引物 | 第49-50页 |
| ·主要仪器 | 第50-51页 |
| ·试剂的配制 | 第51-52页 |
| ·实验方法 | 第52-58页 |
| ·本章实验流程图 | 第52页 |
| ·质粒的构建 | 第52-56页 |
| ·目的蛋白的表达与分离纯化 | 第56页 |
| ·酶活性检测及对比 | 第56页 |
| ·蛋白质-ssDNA交联反应的实施 | 第56-57页 |
| ·蛋白质-ssDNA交联反应的检测及反应效率 | 第57-58页 |
| ·实验结果与讨论 | 第58-63页 |
| ·重组质粒的构建 | 第58-59页 |
| ·目的蛋白的表达与分离纯化 | 第59-61页 |
| ·蛋白质-ssDNA交联反应的检测及反应效率 | 第61-63页 |
| ·本章小结 | 第63-65页 |
| 第4章 ssDNA介导自组装脱氢酶构建酶偶联催化体系 | 第65-83页 |
| ·引言 | 第65页 |
| ·材料和仪器 | 第65-67页 |
| ·主要试剂 | 第65-66页 |
| ·主要仪器 | 第66页 |
| ·试剂的配制 | 第66-67页 |
| ·实验方法 | 第67-74页 |
| ·酶活性检测 | 第67-68页 |
| ·ssDNA介导的脱氢酶自组装方式设计 | 第68-69页 |
| ·蛋白质-ssDNA交联物的制备及ssDNA介导的脱氢酶自组装 | 第69-71页 |
| ·脱氢酶偶联催化体系分光光度法定性分析 | 第71-72页 |
| ·脱氢酶偶联催化体系高效液相色谱定量分析 | 第72-74页 |
| ·实验结果与讨论 | 第74-81页 |
| ·酶活性检测 | 第74页 |
| ·脱氢酶偶联反应体系的定性分析 | 第74-77页 |
| ·脱氢酶偶联反应体系的定量分析 | 第77-81页 |
| ·本章小结 | 第81-83页 |
| 第5章 结论与展望 | 第83-85页 |
| ·结论 | 第83-84页 |
| ·展望 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 攻读硕士期间科研成果 | 第92页 |
