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大豆耐低钾胁迫相关基因的筛选与功能验证

摘要第1-7页
Abstract第7-15页
第一章 文献综述第15-27页
   ·引言第15页
   ·植物中钾素的生理功能第15-17页
     ·植物体内中的钾含量及分布第15页
     ·钾在植株体内的生理作用第15-17页
       ·维持细胞电荷平衡第16页
       ·调节酶的活性第16页
       ·调节细胞膨压和渗透势第16页
       ·参与蛋白质合成第16页
       ·影响植物光合作用第16页
       ·调节韧皮部的溶质运输第16-17页
   ·植物钾效率的差异性和遗传机制第17-19页
     ·钾吸收效率和利用效率的差异性第17-18页
       ·钾吸收效率的差异性第17页
       ·钾利用效率的差异第17-18页
     ·钾营养吸收效率的遗传研究第18页
     ·植物钾营养的吸收和转运机制第18-19页
       ·高亲和性钾吸收和机制第18-19页
       ·低亲和性钾吸收机制第19页
       ·植物中的钾转运系统第19页
   ·钾营养的分子基础第19-23页
     ·钾离子通道第19-21页
       ·Shaker 家族第19-21页
       ·TPK 家族和 Kir-like 家族第21页
       ·其他钾离子通道家族第21页
     ·钾转运体第21-23页
       ·KUP/HAK/KT 家族第22页
       ·Trk/HKT 家族第22-23页
       ·CPA 家族第23页
   ·WRKY 家族转录因子影响大豆吸收钾离子第23-24页
     ·转录因子的类型与结构第24页
     ·WRKY 转录因子的结构和功能第24页
     ·GmWRKY 家族可能与大豆钾素吸收有关第24页
   ·钾素对大豆生长发育的重要性第24-27页
     ·植物缺钾症状第24-25页
     ·土壤中的钾第25页
     ·钾素对大豆的作用第25-27页
第二章 2 种不同耐性大豆材料苗期根系对低钾胁迫的生理响应第27-32页
   ·材料和方法第27-28页
     ·试验材料第27页
       ·供试大豆材料第27页
       ·主要仪器设备和试剂第27页
     ·试验方法第27-28页
     ·低钾胁迫下根系形态的测定第28页
   ·结果与分析第28-31页
     ·根系的体积第28-29页
     ·根系的总长度第29-30页
     ·根系的表面积第30页
     ·根系的平均直径第30-31页
   ·讨论第31-32页
第三章 大豆钾转运体基因 GmKT12 的克隆和信息学分析第32-43页
   ·材料与方法第32-34页
     ·材料与试剂第32-33页
     ·水培试验及取样第33页
     ·RNA 提取与 cDNA 合成第33页
     ·引物的设计与合成第33页
     ·实时荧光定量 PCR 及数据分析方法第33页
     ·目的片段的获取第33-34页
     ·GmKT12 基因在 2 个材料中的序列差异的比对方法第34页
     ·GmKT12 基因序列及蛋白质结构分析第34页
   ·结果与分析第34-40页
     ·RNA 提取、cDNA 合成及 GmKT12 基因的克隆第34页
     ·GmKT12 基因在 2 个材料中序列差异比对第34-36页
     ·基因表达差异分析第36页
     ·GmKT12 的生物信息学分析第36-40页
       ·蛋白质理化性质的分析第36-37页
       ·蛋白质跨膜区域分析第37-38页
       ·蛋白质二级和三级结构预测和分析第38-39页
       ·蛋白质系统进化分析第39页
       ·蛋白质的亚细胞定位第39-40页
   ·讨论第40-43页
第四章 大豆钾离子通道 GmKAB1 基因的克隆和信息学分析第43-52页
   ·材料与方法第43-45页
     ·材料与试剂第43-44页
     ·水培试验及取样第44页
     ·RNA 提取与 cDNA 合成第44页
     ·引物的设计与合成第44页
     ·实时荧光定量 PCR 及分析方法第44页
     ·目的片段的获取第44-45页
     ·GmKAB1 基因的序列测定第45页
     ·GmKAB1 基因序列及蛋白质结构分析第45页
   ·结果与分析第45-50页
     ·RNA 提取、cDNA 合成及 GmKT12 基因的克隆第45页
     ·基因表达差异分析第45-47页
     ·GmKAB1 基因测序结果分析第47页
     ·GmKAB1 的生物信息学分析第47-50页
       ·蛋白质理化性质的分析第47-48页
       ·蛋白质二级和三级结构预测和分析第48页
       ·蛋白质同源性比较及系统进化分析第48-50页
   ·讨论第50-52页
第五章 大豆转录因子 GmWRKY50 基因的克隆和功能分析第52-64页
   ·材料与方法第53-58页
     ·材料与试剂第53页
     ·水培试验及取样第53页
     ·RNA 提取与 cDNA 合成第53-54页
     ·引物的设计与合成第54页
     ·实时荧光定量 PCR 及分析方法第54页
     ·目的片段的获取第54-56页
       ·培养基与溶液的制备第54页
       ·DNA 片段与 pCX-SN 载体的连接反应第54-55页
       ·大肠杆菌感受态的制备(CaCl2)第55页
       ·热激法转化大肠杆菌感受态细胞第55页
       ·菌落 PCR 的鉴定第55页
       ·质粒酶切鉴定第55-56页
     ·GmWRKY50 的亚细胞定位第56页
       ·试验材料准备第56页
       ·引物合成第56页
       ·基因枪法转化洋葱表皮细胞第56页
     ·拟南芥转基因植株的获得第56-58页
       ·培养基及溶液的配制第57页
       ·根瘤农杆菌感受态的制备第57页
       ·根瘤农杆菌的转化第57页
       ·农杆菌转化拟南芥第57页
       ·转基因阳性植株的筛选第57-58页
       ·移苗处理第58页
     ·钾含量的测定第58页
   ·结果与分析第58-62页
     ·GmWRKY50 基因的克隆与功能分析第58-59页
     ·Gm WRKY50 基因差异表达分析第59-60页
     ·PJG053-GmWRKY50 的表达载体构建与亚细胞定位第60-61页
     ·拟南芥阳性植株的筛选第61页
     ·过表达拟南芥材料在低钾条件下的表型检测第61-62页
     ·过表达拟南芥材料钾含量的测定第62页
   ·讨论第62-64页
第六章 全文总结第64-66页
参考文献第66-72页
致谢第72-73页
作者简历第73页

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