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牛分枝杆菌和卡介苗对树突状细胞及CD4~+T细胞分化的影响

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
缩略语表(Abbreviation)第12-13页
1 前言第13-23页
   ·研究问题的由来第13-14页
   ·文献综述第14-22页
     ·结核分枝杆菌感染过程第14-15页
     ·结核分枝杆菌感染巨噬细胞第15页
     ·结核分枝杆菌感染树突状细胞第15-18页
       ·树突状细胞的特征第15-16页
       ·模式识别受体在结核感染树突状细胞中的作用第16-17页
       ·NF-κB信号传导过程第17页
       ·细胞因子在结核感染中的作用第17-18页
     ·结核分枝杆菌的免疫逃避机制第18-19页
     ·BCG的免疫反应第19-20页
     ·T细胞在结核病中的免疫研究第20-22页
   ·研究目的与意义第22-23页
2 材料与方法第23-35页
   ·实验材料第23-26页
     ·菌种及实验动物第23页
     ·小鼠骨髓源性树突状细胞第23页
     ·培养基第23-24页
       ·改良中性罗氏培养基(Lowenstein-Jensen培养基)第23-24页
       ·Middlebrook7H9培养基第24页
       ·树突状细胞完全培养基第24页
     ·主要试剂第24页
     ·主要试剂配方第24-25页
     ·主要仪器第25页
     ·鉴定分枝杆菌复合群的PCR引物第25-26页
   ·细菌的准备第26-28页
     ·牛分枝杆菌和BCG的培养,鉴定,计数与灭活第26页
     ·PCR鉴定细菌第26-27页
       ·细菌的基因组提取第26-27页
       ·细菌基因组PCR鉴定第27页
     ·PCR对结核分枝杆菌复合群的定型鉴定标准第27-28页
     ·金胺O染色鉴定细菌的生存状态第28页
   ·树突状细胞的培养与鉴定第28-30页
     ·树突状细胞的培养第28-29页
     ·流式细胞术鉴定树突状细胞第29-30页
   ·不同毒力型牛分枝杆菌感染树突状细胞模型的建立第30页
   ·感染后树突状细胞细胞因子的检测第30-31页
   ·抗酸染色检测感染树突状细胞的牛分枝杆菌和BCG第31-32页
   ·扫描电镜检测树突状细胞对牛分枝杆菌和BCG的吞噬作用第32页
   ·小鼠脾脏中CD4~+T细胞的分离纯化第32-33页
   ·感染的树突状细胞对CD4~+T细胞分化的影响第33页
   ·流式细胞术检测CD4~+Treg细胞第33-35页
3 结果第35-49页
   ·牛分枝杆菌和BCG的鉴定第35-36页
     ·PCR鉴定BCG与牛分枝杆菌第35页
     ·金胺O染色鉴定细菌存活状态第35-36页
   ·小鼠骨髓源性树突状细胞的鉴定第36-38页
     ·骨髓干细胞中的树突状细胞比例第36-37页
     ·未成熟树突状细胞的鉴定第37-38页
   ·树突状细胞感染M.bovis和BCG模型建立第38-41页
     ·抗酸染色鉴定细菌与细胞结合与吞噬第38-39页
     ·扫描电镜观察树突状细胞对细菌的吞噬第39-40页
     ·树突状细胞感染细菌后MHC-Ⅱ分子的表达第40-41页
   ·感染后树突状细胞细胞因子测定第41-44页
     ·不同毒力牛分枝杆菌感染树突状细胞检测细胞因子第41-43页
     ·NF-kB信号通路阻断检测细胞因子第43页
     ·TLRs阻断对DC感染后细胞因子分泌的影响第43-44页
   ·牛分枝杆菌/BCG感染树突状细胞对CD4~+T细胞分化的调节第44-49页
     ·CD4~+T细胞磁珠分选效果检测第44-45页
     ·感染的树突状细胞对CD4~+T细胞细胞因子分泌的调节第45-47页
     ·流式检测Treg细胞第47-49页
4讨论第49-55页
   ·牛分枝杆菌和BCG差异性诱导DCs分泌细胞因子及趋化因子第49-51页
   ·牛分枝杆菌与BCG感染DCs诱导不同的CD4~+T细胞亚群的分化第51-55页
     ·Th17细胞在结核感染中的作用第52-53页
     ·Th1型细胞在结核感染中的作用第53页
     ·Treg细胞在结核感染中的作用第53-55页
5 结论第55-56页
参考文献第56-66页
致谢第66页

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