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鸡传染性支气管炎病毒Sczy3株M蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
英文缩略名词对照表第7-13页
第一章 文献综述第13-27页
 1 鸡传染性支气管炎概述第13-14页
 2 鸡传染性支气管炎病毒的病原学研究进展第14-17页
   ·生物学分类地位第14页
   ·病毒粒子结构第14-15页
   ·IBV的基因组结构第15-16页
   ·结构蛋白及其生物学功能第16-17页
 3 鸡传染性支气管炎国内外的流行情况第17-21页
   ·国外流行情况第17-19页
   ·国内流行情况第19-21页
 4 鸡传染性支气管炎病毒M蛋白研究进展第21-22页
   ·M蛋白结构研究第21页
   ·M蛋白生物学功能研究第21页
   ·M蛋白抗原表位研究第21-22页
 5 鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体的研究与应用进展第22-26页
   ·单克隆抗体技术的概述第22-23页
   ·IBV单克隆抗体的研究进展第23-25页
     ·IBV单克隆抗体制备的研究进展第23-24页
     ·IBV单克隆抗体的应用及进展第24-25页
   ·IBV单克隆抗体的前景第25-26页
 6 选题的目的与意义第26-27页
第二章 鸡传染性支气管炎病毒M蛋白单克隆抗体的制备与鉴定第27-55页
 1 试验的材料和方法第27-39页
   ·病毒株、细胞及实验动物第27页
   ·试验仪器第27-28页
   ·主要试验试剂第28页
   ·常用试剂的配制第28-30页
   ·抗原制备第30页
   ·动物免疫第30-31页
   ·间接ELISA方法的建立第31-33页
     ·病毒最佳包被浓度及血清稀释度的确定第31-32页
     ·血清最佳作用时间的确定第32页
     ·酶标抗体最佳浓度的确定第32页
     ·酶标抗体作用时间的确定第32页
     ·封闭条件的确定第32页
     ·阴阳性临界值的确定第32-33页
   ·单克隆抗体的制备第33-37页
     ·免疫BALB/c小鼠血清效价的测定第33页
     ·细胞制备第33-34页
     ·细胞融合第34页
     ·阳性杂交瘤细胞的筛选第34-35页
     ·阳性杂交瘤细胞的亚克隆第35页
     ·阳性杂交瘤细胞的扩大培养、冻存与复苏第35页
     ·单克隆抗体的大量制备第35-36页
     ·单克隆抗体的纯化第36-37页
   ·杂交瘤细胞及单克隆抗体特性的鉴定第37-39页
     ·单克隆抗体的亚型鉴定第37-38页
     ·杂交瘤细胞培养上清和腹水抗体的ELISA效价测定第38页
     ·稳定性测定第38页
     ·Western blot分析第38-39页
     ·单克隆抗体特异性鉴定第39页
     ·单克隆抗体与不同IBV毒株的交叉反应性第39页
 2 结果第39-50页
   ·抗原的制备第39-40页
   ·间接ELISA方法的建立第40-43页
     ·抗原最佳包被浓度及血清稀释度的确定第40-41页
     ·血清最佳作用时间的确定第41页
     ·酶标抗体最佳工作浓度的确定第41-42页
     ·酶标抗体作用时间的确定第42页
     ·封闭条件的确定第42页
     ·阴阳临界值的确定第42-43页
   ·BALB/c小鼠的免疫结果第43页
   ·单克隆抗体的制备第43-47页
     ·饲养细胞、SP2/0细胞及脾细胞的制备第43-44页
     ·细胞融合与阳性杂交瘤细胞的筛选第44-45页
     ·杂交瘤细胞的亚克隆第45页
     ·单克隆抗体的大量制备第45-46页
     ·单克隆抗体的纯化第46-47页
   ·杂交瘤细胞及单克隆抗体特性鉴定第47-50页
     ·抗体亚型鉴定第47页
     ·杂交瘤细胞培养上清和腹水抗体的ELISA效价测定第47-48页
     ·传代稳定性测定第48-49页
     ·Western blot分析第49页
     ·单抗的特异性鉴定第49-50页
     ·单抗与不同IBV毒株的交叉反应性第50页
 3 讨论第50-54页
   ·动物免疫过程第50-51页
   ·间接ELISA方法的建立第51页
   ·单克隆抗体的制备第51-52页
   ·单克隆抗体的鉴定第52-53页
   ·潜在应用第53-54页
 4 结论第54-55页
参考文献第55-61页
致谢第61页

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