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湖北海棠MhTGA2基因转化‘长富6号的研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
缩略词第12-13页
第一章 文献综述第13-37页
 1 苹果转基因研究进展第13-22页
   ·遗传转化的基本方法第14-15页
     ·农杆菌介导法第14页
     ·基因枪法第14页
     ·电穿孔法第14-15页
     ·花粉管通道法第15页
   ·农杆菌介导的转化系统的研究第15-17页
     ·再生体系的建立第15-16页
     ·农杆菌菌株第16页
     ·报告基因和筛选标记基因第16页
     ·侵染条件第16-17页
   ·基因工程在抗性苹果品种改良中的应用第17-22页
     ·提高抗病能力第17-21页
     ·提高苹果的抗逆能力第21-22页
   ·苹果转基因发展前景第22页
 2 TGA类转录因子研究进展第22-25页
   ·TGA类转录因子的结构与功能第22-23页
   ·TGA类转录因子的表达调控第23-24页
   ·TGA类转录因子抗性研究进展第24-25页
 3 本试验研究目的和意义第25-26页
 参考文献第26-37页
第二章 苹果属植物再生体系优化及‘长富6号’遗传转化体系的建立第37-51页
 摘要第37页
 1 材料与方法第37-43页
   ·材料第37-39页
     ·植物材料第38页
     ·供试菌株第38页
     ·试剂第38-39页
   ·方法第39-43页
     ·不定芽诱导方法第39页
     ·农杆菌介导转化方法第39-40页
     ·MhTGA2基因的PCR和RT-PCR检测第40-43页
 2 结果第43-46页
   ·苹果属植物再生体系的优化第43-44页
     ·继代苗和生根苗叶片对诱导不定芽的影响第43页
     ·暗培养时间对诱导叶片不定芽的影响第43-44页
   ·‘长富6号’遗传转化体系的建立第44-46页
     ·菌液浓度及浸染时间对转化效率的影响第44-45页
     ·共培养时间对转化效率的影响第45页
     ·潮霉素浓度对转化效率的影响第45-46页
   ·苹果抗性芽PCR和RT-PCR检测第46页
 3 讨论第46-48页
 参考文献第48-51页
第三章 不同处理湖北海棠MhTGA2基因表达分析第51-59页
 摘要第51-52页
 1 材料与方法第52-53页
   ·植物材料及处理方法第52页
   ·仪器和药品第52-53页
     ·仪器第52页
     ·试剂第52页
     ·药品配置第52-53页
   ·RNA的提取及cDNA第一链的合成第53页
   ·荧光定量RT-PCR分析第53页
 2 结果与分析第53-56页
   ·ABA处理对湖北海棠MhTGA2基因表达的影响第53-54页
   ·PEG-6000处理对湖北海棠MhTGA2基因表达的影响第54-55页
   ·NaCl胁迫对湖北海棠MhTGA2基因表达的影响第55页
   ·低温处理对湖北海棠MhTGA2基因表达的影响第55-56页
 3 结论第56-57页
 参考文献第57-59页
第四章 转MhTGA2基因烟草抗性分析第59-71页
 摘要第59-60页
 1 材料与方法第60-61页
   ·材料第60页
     ·植物材料第60页
     ·试剂第60页
   ·方法第60-61页
     ·转基因烟草种子NaCl和甘露醇渗透胁迫下发芽情况统计与分析第60页
     ·转基因烟草幼苗在NaCl胁迫下的生长状况第60-61页
 2 结果与分析第61-67页
   ·NaCl胁迫对转基因烟草种子萌发及幼苗生长的影响第61-63页
     ·NaCl胁迫对转基因烟草自交结实T_1代种子萌发的影响第62-63页
     ·不同浓度NaCl胁迫对转基因烟草T_1代幼芽生长的影响第63页
   ·甘露醇对转基因烟草种子发芽的影响第63-65页
   ·苗龄1周的转基因烟草幼苗抗盐性分析第65-67页
     ·不同浓度NaCl处理对烟草幼苗生根的影响第65-66页
     ·不同浓度NaCl处理对烟草幼苗鲜重的影响第66-67页
     ·不同浓度NaCl处理对烟草幼苗干重的影响第67页
 3 结论第67-68页
 4 讨论第68-69页
 参考文献第69-71页
第五章 转MhTGA2基因苹果的分子检测及抗性分析第71-81页
 摘要第71页
 1 材料和方法第71-74页
   ·材料第71-72页
     ·植物材料第72页
     ·试剂第72页
     ·仪器第72页
   ·方法第72-74页
     ·苹果抗性株系的获得第72页
     ·转基因植株的生根移栽第72-73页
     ·DNA提取和RNA提取方法及RCR和RT-PCR检测方法第73页
     ·RT-PCR产物的回收第73-74页
     ·不同浓度NaCl处理非转基因和转基因苹果离体叶片第74页
 2 结果与分析第74-78页
   ·苹果抗性植株的获得第74-75页
   ·苹果抗性植株生根移栽第75页
   ·苹果转基因株系PCR和RT-PCR检测第75页
   ·转基因苹果植株的RT-PCR产物测序结果第75-76页
   ·不同浓度NaCl胁迫对非转基因和转基因苹果离体叶片的影响第76-78页
 3 结论第78-79页
 4 讨论第79-81页
参考文献第81-83页
全文结论第83-85页
主要创新点第85-87页
附录第87-89页
攻读硕士学位期间所发表论文第89-91页
致谢第91页

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