| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-13页 |
| 目录 | 第13-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-36页 |
| 1 引言 | 第17页 |
| 2 内源性甲醛来源及代谢途径 | 第17-26页 |
| ·人体内源性甲醛的来源及代谢 | 第18-19页 |
| ·植物中内源性甲醛的来源及代谢 | 第19-21页 |
| ·食品中内源性甲醛的形成途径 | 第21-26页 |
| 3 γ-谷氨酰转肽酶(GGT)的研究进展 | 第26-32页 |
| ·GGT在机体内的分布、结构特征 | 第26-29页 |
| ·GGT的酶学性质及作用 | 第29-32页 |
| 4 半胱氨酸亚砜裂解酶(C-S lyase)的研究进展 | 第32-34页 |
| ·半胱氨酸亚砜裂解酶的结构与性质 | 第32-33页 |
| ·半胱氨酸亚砜裂解酶作用 | 第33-34页 |
| 5 研究目的及意义 | 第34-35页 |
| ·研究目的 | 第34页 |
| ·研究意义 | 第34-35页 |
| 6 主要研究内容 | 第35-36页 |
| ·香菇中C-S lyase的研究 | 第35页 |
| ·香菇GGT基因的研究 | 第35页 |
| ·风味形成途径对香菇甲醛形成的影响 | 第35-36页 |
| 第二章 半胱氨酰亚砜裂解酶(C-S lyase)的纯化及酶学性质 | 第36-62页 |
| 第一节 半胱氨酰亚砜裂解酶(C-S lyase)的纯化 | 第36-49页 |
| 1 引言 | 第36-37页 |
| 2 材料和方法 | 第37-44页 |
| ·仪器设备 | 第37页 |
| ·试剂 | 第37页 |
| ·香菇 | 第37页 |
| ·C-S lyase分离纯化流程 | 第37-39页 |
| ·C-S lyase的活力测定方法 | 第39-41页 |
| ·蛋白质纯度检测 | 第41-43页 |
| ·氨基酸含量的测定 | 第43页 |
| ·统计分析 | 第43-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-47页 |
| ·C-S lyase纯化效率 | 第44页 |
| ·蛋白质纯度检验 | 第44-45页 |
| ·氨基酸组成 | 第45-46页 |
| ·不同来源C-S lyase的分子量及亚基组成的比较 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-49页 |
| 5 小结 | 第49页 |
| 第二节 半胱氨酰亚砜裂解酶酶学性质的研究 | 第49-62页 |
| 1 引言 | 第49-50页 |
| 2 材料与方法 | 第50-53页 |
| ·主要仪器设备 | 第50页 |
| ·主要试剂 | 第50页 |
| ·C-S lyase的酶学性质研究 | 第50-52页 |
| ·影响酶活的主要金属离子和氨基酸 | 第52页 |
| ·统计分析 | 第52-53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-59页 |
| ·香菇中C-S lyase的等电点 | 第53页 |
| ·C-S lyase对不同底物的催化效率 | 第53-54页 |
| ·热稳定性分析 | 第54-55页 |
| ·最适反应温度 | 第55-56页 |
| ·最适反应pH值 | 第56页 |
| ·金属离子对酶活的影响 | 第56-57页 |
| ·氨基酸对酶活的影响 | 第57-58页 |
| ·不同来源C-S lyase的酶学性质比较 | 第58-59页 |
| 4 讨论 | 第59-60页 |
| 5 小结 | 第60-62页 |
| 第三章 香菇中GGT基因cDNA全长克隆及表达 | 第62-94页 |
| 第一节 香菇中GGT基因cDNA全长克隆及序列分析 | 第62-82页 |
| 1 引言 | 第62-63页 |
| 2 材料与方法 | 第63-68页 |
| ·实验材料 | 第63页 |
| ·克隆载体及实验菌株 | 第63页 |
| ·试验试剂 | 第63页 |
| ·主要仪器设备 | 第63-64页 |
| ·样品总RNA提取 | 第64-65页 |
| ·GGT基因cDNA全长序列克隆 | 第65-67页 |
| ·GGT基因cDNA全长序列的获得及分析 | 第67-68页 |
| 3 结果与分析 | 第68-80页 |
| ·GGT基因中间段克隆结果 | 第68-69页 |
| ·GGT基因3'-RACE克隆结果 | 第69-70页 |
| ·GGT基因5'-RACE克隆结果 | 第70-72页 |
| ·GGT基因cDNA全长序列 | 第72页 |
| ·蛋白质结构分析 | 第72-77页 |
| ·不同来源GGT氨基酸序列比较 | 第77-80页 |
| 4 讨论 | 第80-82页 |
| 5 小结 | 第82页 |
| 第二节 香菇GGT基因mRNA的表达组织特异性及规律 | 第82-94页 |
| 1 引言 | 第82-83页 |
| 2 材料与方法 | 第83-87页 |
| ·香菇样品的采集 | 第83页 |
| ·主要实验耗材及试剂 | 第83-84页 |
| ·主要仪器 | 第84页 |
| ·RNA提取 | 第84页 |
| ·反转录 | 第84页 |
| ·mRNA表达水平差异检测 | 第84-86页 |
| ·甲醛含量的测定 | 第86页 |
| ·数据统计分析 | 第86-87页 |
| 3 结果与分析 | 第87-91页 |
| ·GGT基因mRNA在不同生长阶段的表达特性 | 第87页 |
| ·不同品种菇盖中GGT基因mRNA表达特性 | 第87-88页 |
| ·不同品种菇柄中GGT基因mRNA的表达特性 | 第88-89页 |
| ·不同储藏温度对GGT基因mRNA表达的影响 | 第89页 |
| ·香菇生长阶段甲醛含量的变化 | 第89-90页 |
| ·不同品种香菇菇盖中甲醛含量的比较 | 第90-91页 |
| ·不同品种香菇菇柄中甲醛含量的比较 | 第91页 |
| 4 讨论 | 第91-93页 |
| 5 小结 | 第93-94页 |
| 第四章 风味形成途径对香菇内源性甲醛生成的影响 | 第94-122页 |
| 第一节 γ-谷氨酰转肽酶和半胱氨酸亚砜裂解酶对甲醛生成的影响 | 第94-105页 |
| 1 引言 | 第94-95页 |
| 2 材料与方法 | 第95-98页 |
| ·香菇 | 第95页 |
| ·主要试剂 | 第95页 |
| ·主要实验仪器及设备 | 第95页 |
| ·甲醛含量的测定 | 第95页 |
| ·GGT和C-S lyase活力的测定 | 第95-96页 |
| ·GGT和C-S lyase对甲醛生成的影响 | 第96-97页 |
| ·GGT和C-S lyase的激活剂和抑制剂对甲醛生成的影响 | 第97页 |
| ·数据统计 | 第97-98页 |
| 3 结果与讨论 | 第98-102页 |
| ·GGT和C-S lyase对甲醛生成的影响 | 第98-99页 |
| ·丝氨酸-硼酸复合物对GGT和C-S lyase酶活以及甲醛生成的影响 | 第99-100页 |
| ·GSH和Cys对甲醛生成的影响 | 第100-101页 |
| ·金属离子对甲醛生成的影响 | 第101-102页 |
| ·pH对甲醛生成的影响 | 第102页 |
| 4 讨论 | 第102-105页 |
| 5 小结 | 第105页 |
| 第二节 不同培养基对香菇中风味及甲醛形成的影响 | 第105-122页 |
| 1 引言 | 第105-106页 |
| 2 材料与方法 | 第106-109页 |
| ·香菇 | 第106页 |
| ·主要试剂 | 第106-107页 |
| ·主要实验仪器、设备 | 第107页 |
| ·甲醛含量的测定 | 第107页 |
| ·风味前体物质的测定 | 第107-108页 |
| ·香菇特征风味物质含量的测定 | 第108页 |
| ·GGT基因的表达 | 第108-109页 |
| ·GGT和C-S lyase酶活的测定 | 第109页 |
| ·数据统计 | 第109页 |
| 3 结果与讨论 | 第109-118页 |
| ·MgSO_4对甲醛生成的影响 | 第109-110页 |
| ·MgSO_4对香菇中风味前体物质生成的影响 | 第110-113页 |
| ·MgSO_4对香菇特征风味物质生成的影响 | 第113-115页 |
| ·MgSO_4对GGT基因mRNA表达水平的影响 | 第115-116页 |
| ·MgSO_4对风味途径关键酶酶活的影响 | 第116-118页 |
| 4 讨论 | 第118-120页 |
| 5 小结 | 第120-122页 |
| 第五章 总结论、创新点与研究展望 | 第122-124页 |
| 1 总结 | 第122-123页 |
| 2 创新点 | 第123页 |
| 3 研究展望 | 第123-124页 |
| 参考文献 | 第124-142页 |
| 缩略词表 | 第142-144页 |
| 附录 | 第144-149页 |
| 作者简介及在学期间所得科研成果 | 第149-151页 |
| 致谢 | 第151-152页 |
