中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
第一部分 应用蛋白质印迹聚合物作为人工抗体分离高分子量天然微量蛋白并研究蛋白质间的相互作用 | 第12-92页 |
第一章 前言 | 第12-60页 |
第一节 分子印迹技术的发展概况 | 第12-30页 |
·分子印迹技术的产生极其发展 | 第12-14页 |
·分子印迹技术的原理、步骤 | 第14-16页 |
·印迹聚合物的制备原理 | 第16-19页 |
·分子印迹聚合物MIP制备步骤 | 第19-23页 |
·分子印迹聚合中使用的载体 | 第23-30页 |
第二节 蛋白质分子印迹技术进展 | 第30-47页 |
·制备蛋白质分子印迹聚合物需考虑的因素 | 第31-34页 |
·蛋白质分子印迹的识别机理 | 第34页 |
·蛋白质分子印迹聚合物的制备方法 | 第34-40页 |
·蛋白质分子印迹技术的研究现状 | 第40-44页 |
·蛋白质分子印迹技术的应用前景及发展趋势 | 第44-47页 |
第三节 我组对蛋白质印迹技术的发展 | 第47-53页 |
·蛋白质印迹体系中引入辅助识别聚合物链 | 第47-48页 |
·引入ARPCs的几种新型蛋白质印迹聚合物的研究 | 第48-53页 |
第四节 本实验所涉及的蛋白 | 第53-58页 |
·分子伴侣 | 第53-56页 |
·热激蛋白 | 第56-57页 |
·亲免蛋白与热激蛋白的协同作用 | 第57-58页 |
第五节 本课题的指导思想 | 第58-60页 |
第二章 实验部分 | 第60-81页 |
第一节 试剂与实验仪器 | 第60-64页 |
·试剂 | 第60-61页 |
·分子生物学试剂 | 第61-63页 |
·实验仪器 | 第63-64页 |
第二节 缓冲液及贮存液的配制 | 第64-70页 |
·基因克隆 | 第64-65页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第65页 |
·细菌培养 | 第65页 |
·融合蛋白的大量表达 | 第65页 |
·凝血因子Xa对融合蛋白的裂解 | 第65页 |
·猪肝脏中细胞提取物及内质网体提取物的提取 | 第65页 |
·蛋白质印迹聚合物(PIP)的制备及吸附 | 第65-66页 |
·Bradford法测量蛋白质含量 | 第66-67页 |
·三氯乙酸法沉淀蛋白质 | 第67页 |
·十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第67-68页 |
·银染法 | 第68-69页 |
·免疫印迹(Westernblot) | 第69-70页 |
第三节 实验方法 | 第70-81页 |
·辅助识别聚合物链的制备 | 第70-72页 |
·聚乙烯醇大孔微球的修饰 | 第72页 |
·基因克隆 | 第72-75页 |
·以mBiP为印迹模版的蛋白质印迹聚合物(PIP)的合成 | 第75页 |
·使用PIP直接于猪肝内质网体提取物中吸附BiP | 第75-76页 |
·蛋白质的测定 | 第76-81页 |
第三章 实验结果与讨论 | 第81-91页 |
第一节 辅助识别聚合物链库的表征 | 第81-84页 |
·FTIR谱图分析 | 第81-83页 |
·~1H NMR谱图分析 | 第83-84页 |
·聚乙烯醇的GPC | 第84页 |
·4-乙烯基吡啶的接枝效率 | 第84页 |
第二节 大孔树脂及印迹聚合物的表征 | 第84-86页 |
第三节 PIP从内质网提取液中富集BiP | 第86-89页 |
第四节 利用PIP研究蛋白质之间的相互作用 | 第89-91页 |
·免疫共沉淀法研究BiP-FKBP23之间的相互作用 | 第89页 |
·印迹聚合物发放法研究BiP-FKBP23之间的相互作用 | 第89-91页 |
第四章 第一部分总结 | 第91-92页 |
第二部分 分子印迹法制备识别肿瘤表面多肽的荧光纳米微球 | 第92-121页 |
第五章 前言 | 第92-106页 |
第一节 ERBB-2及其家族蛋白 | 第92-99页 |
·EGFR家族 | 第92-94页 |
·ErbB2介绍 | 第94-99页 |
第二节 壳聚糖纳米微球的设计 | 第99-104页 |
·实验设计和步骤 | 第99-102页 |
·纳米微球的选择 | 第102-104页 |
第三节 本课题的指导思想 | 第104-106页 |
第六章 实验部分 | 第106-111页 |
第一节 实验试剂和实验仪器 | 第106-107页 |
·实验试剂 | 第106-107页 |
·实验仪器 | 第107页 |
第二节 实验方法 | 第107-111页 |
·三聚磷酸钠制备壳聚糖纳米微球 | 第107-109页 |
·壳聚糖稳定微粒铁粒子的制备 | 第109页 |
·壳聚糖-丙烯酸微球的制备 | 第109-110页 |
·玻璃表面固定多肽 | 第110页 |
·玻璃表面的多肽末端聚合壳聚糖纳米微球 | 第110-111页 |
第七章 实验结果与讨论 | 第111-120页 |
第一节 三聚磷酸钠制备壳聚糖纳米微球 | 第111-114页 |
·正交试验条件优化 | 第111-112页 |
·三聚磷酸钠制备纳米壳聚糖的TEM表征 | 第112-114页 |
第二节 壳聚糖稳定铁粒子的表征 | 第114页 |
第三节 丙烯酸-壳聚糖微球的表征 | 第114-118页 |
第四节 玻璃表面的多肽末端聚合壳聚糖纳米微球的表征 | 第118-120页 |
第八章 第二部分总结 | 第120-121页 |
参考文献 | 第121-131页 |
致谢 | 第131-132页 |
个人简历 在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第132页 |