重组大肠杆菌L-天冬氨酸-α-脱羧酶的制备及应用研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第1章 前言 | 第10-19页 |
| ·β-丙氨酸简介 | 第10-12页 |
| ·β-丙氨酸理化性质与生物学性质 | 第10页 |
| ·β-丙氨酸生物合成途径 | 第10-11页 |
| ·β-丙氨酸生产方法及应用 | 第11-12页 |
| ·L-天冬氨酸-a-脱羧酶研究进展 | 第12-17页 |
| ·L-天冬氨酸-a-脱羧酶简介 | 第12页 |
| ·L-天冬氨酸-a-脱羧酶的结构与形成机制 | 第12-14页 |
| ·L-天冬氨酸-a-脱羧酶的催化机制与生理意义 | 第14-15页 |
| ·L-天冬氨酸-a-脱羧酶的测活方法 | 第15-16页 |
| ·L-天冬氨酸-a-脱羧酶的应用研究 | 第16-17页 |
| ·课题研究目的及意义 | 第17-19页 |
| 第2章 L-天冬氨酸-α-脱羧酶测活方法的建立 | 第19-27页 |
| ·引言 | 第19页 |
| ·仪器与试剂 | 第19-20页 |
| ·实验仪器 | 第19页 |
| ·实验试剂 | 第19-20页 |
| ·色谱方法 | 第20页 |
| ·衍生试剂 | 第20页 |
| ·流动相 | 第20页 |
| ·衍生方法 | 第20页 |
| ·色谱程序 | 第20页 |
| ·氨基酸定量 | 第20页 |
| ·结果与讨论 | 第20-26页 |
| ·流动相的确定 | 第20-24页 |
| ·线性关系的确定 | 第24-25页 |
| ·精密度的确定 | 第25页 |
| ·回收率的确定 | 第25-26页 |
| ·本章小结 | 第26-27页 |
| 第3章 L-天冬氨酸-α-脱羧酶酶原的克隆与表达 | 第27-36页 |
| ·引言 | 第27页 |
| ·材料与方法 | 第27-30页 |
| ·实验仪器 | 第27-28页 |
| ·实验材料 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-30页 |
| ·结果与讨论 | 第30-34页 |
| ·大肠杆菌基因组抽提 | 第30-31页 |
| ·panDpMD质粒构建 | 第31-33页 |
| ·panDpET质粒构建 | 第33-34页 |
| ·BL21(DE3)panDpET表达菌株的构建 | 第34页 |
| ·本章小结 | 第34-36页 |
| 第4章 L-天冬氨酸-α-脱羧酶酶原的激活与纯化 | 第36-46页 |
| ·引言 | 第36页 |
| ·材料与方法 | 第36-37页 |
| ·实验材料 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-37页 |
| ·纯化方法 | 第36-37页 |
| ·重组L-天冬氨酸-a-脱羧酶酶原激活方法 | 第37页 |
| ·结果与讨论 | 第37-45页 |
| ·重组L-天冬氨酸-a-脱羧酶酶原粗提液的激活 | 第37-39页 |
| ·重组L-天冬氨酸-a-脱羧酶酶原的纯化 | 第39-41页 |
| ·重组L-天冬氨酸-a-脱羧酶纯酶原的激活 | 第41-45页 |
| ·本章小结 | 第45-46页 |
| 第5章 L-天冬氨酸-α-脱羧酶酶促反应的研究 | 第46-51页 |
| ·引言 | 第46页 |
| ·材料与方法 | 第46-47页 |
| ·实验试剂 | 第46页 |
| ·实验材料 | 第46页 |
| ·蛋白含量测定 | 第46-47页 |
| ·L-天冬氨酸-a-脱羧酶活性测定 | 第47页 |
| ·结果与讨论 | 第47-49页 |
| ·L-天冬氨酸-a-脱羧酶的产物抑制 | 第47-48页 |
| ·L-天冬氨酸-a-脱羧酶的产物抑制验证 | 第48-49页 |
| ·L-天冬氨酸-a-脱羧酶转化反应条件的优化 | 第49页 |
| ·本章小结 | 第49-51页 |
| 第6章 L-天冬氨酸-α-脱羧酶的稳定性 | 第51-58页 |
| ·引言 | 第51页 |
| ·材料与方法 | 第51页 |
| ·实验试剂 | 第51页 |
| ·实验材料 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51页 |
| ·结果与讨论 | 第51-57页 |
| ·L-天冬氨酸-a-脱羧酶的pH稳定性 | 第51-53页 |
| ·L-天冬氨酸-a-脱羧酶的温度稳定性 | 第53-57页 |
| ·本章小结 | 第57-58页 |
| 第7章 结论与展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
