玉米赤霉烯酮单克隆抗体研制
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-22页 |
| ·立题背景 | 第11-15页 |
| ·玉米赤霉烯酮的发生与分布 | 第11-12页 |
| ·玉米赤霉烯酮的理化性质 | 第12页 |
| ·玉米赤霉烯酮对植物的作用 | 第12页 |
| ·玉米赤霉烯酮对动物的危害 | 第12-14页 |
| ·世界各国玉米赤霉烯酮的限量 | 第14-15页 |
| ·玉米赤霉烯酮检测技术及国内外研究现状 | 第15-20页 |
| ·样品前处理技术 | 第15-16页 |
| ·免疫亲和柱法 | 第15-16页 |
| ·固相萃取技术 | 第16页 |
| ·毛细管电泳法 | 第16页 |
| ·薄层色谱法 | 第16-17页 |
| ·液相色谱法 | 第17-18页 |
| ·气相色谱法 | 第18页 |
| ·免疫分析法 | 第18-20页 |
| ·酶联免疫吸附法 | 第18-19页 |
| ·放射免疫分析技术 | 第19页 |
| ·噬菌体肽库 | 第19页 |
| ·荧光免疫分析技术 | 第19-20页 |
| ·本课题的目的和意义 | 第20-21页 |
| ·本课题的主要研究内容 | 第21-22页 |
| 第二章 玉米赤霉烯酮人工抗原的合成及鉴定 | 第22-30页 |
| ·前言 | 第22页 |
| ·实验材料 | 第22-24页 |
| ·主要试剂与药品 | 第22-23页 |
| ·ELISA所需溶液配制 | 第23页 |
| ·主要实验仪器 | 第23页 |
| ·实验动物 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-26页 |
| ·肟化法合成ZENO | 第24页 |
| ·ZENO与BSA的偶联 | 第24页 |
| ·人工抗原的紫外扫描分析 | 第24-25页 |
| ·人工抗原的免疫效果研究 | 第25页 |
| ·Balb/c小鼠免疫 | 第25页 |
| ·效价测定 | 第25页 |
| ·人工抗原蛋白含量及偶联比的测定 | 第25-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-28页 |
| ·紫外扫描鉴定人工抗原 | 第26页 |
| ·免疫试验鉴定人工抗原 | 第26-27页 |
| ·偶联物蛋白含量的测定 | 第27-28页 |
| ·讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 玉米赤霉烯酮单克隆抗体研制与特性鉴定 | 第30-43页 |
| ·前言 | 第30页 |
| ·主要试剂与药品 | 第30-34页 |
| ·实验试剂 | 第30-31页 |
| ·实验溶液 | 第31-33页 |
| ·主要实验仪器 | 第33-34页 |
| ·实验动物及SP2/0骨髓瘤细胞 | 第34页 |
| ·抗玉米赤霉烯酮杂交瘤细胞的制备 | 第34-36页 |
| ·SP2/0骨髓瘤细胞的复苏与制备 | 第34页 |
| ·制备SP2/0脾细胞 | 第34-35页 |
| ·细胞融合 | 第35页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选 | 第35页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的建株、冻存 | 第35-36页 |
| ·单克隆抗体的制备与鉴定 | 第36-38页 |
| ·腹水的制备 | 第36页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第36-37页 |
| ·腹水和纯化后抗体中的蛋白质含量测定 | 第37页 |
| ·单克隆抗体SDS电泳 | 第37页 |
| ·抗体亚型的测定 | 第37页 |
| ·抗体特异性测定 | 第37-38页 |
| ·结果与分析 | 第38-41页 |
| ·杂交瘤细胞的制备 | 第38-39页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存复苏 | 第39-40页 |
| ·腹水的制备 | 第40页 |
| ·单克隆抗体的纯化效果鉴定 | 第40页 |
| ·单克隆抗体的特异性鉴定 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第四章 玉米赤霉烯酮ELISA方法的建立 | 第43-50页 |
| ·前言 | 第43页 |
| ·实验材料 | 第43-44页 |
| ·主要实验药品 | 第43-44页 |
| ·主要实验仪器 | 第44页 |
| ·试验方法 | 第44-45页 |
| ·ELISA条件优化 | 第44-45页 |
| ·包被原和抗体工作浓度的选择 | 第44页 |
| ·封闭条件对ELISA检测体系灵敏度的影响 | 第44-45页 |
| ·pH值对ELISA检测方法灵敏度的影响 | 第45页 |
| ·离子强度对ELISA检测方法灵敏度的影响 | 第45页 |
| ·玉米赤霉烯酮间接竞争ELISA标准曲线的建立 | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-49页 |
| ·ELISA条件优化 | 第45-48页 |
| ·包被原和抗体工作浓度的选择 | 第45-46页 |
| ·封闭物的影响 | 第46-47页 |
| ·pH值的影响 | 第47-48页 |
| ·间接竞争ELISA方法评价 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| 总结与讨论 | 第50-53页 |
| 总结 | 第50-51页 |
| 讨论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |