东农冬麦1号抗寒性鉴定及CBF2基因克隆和表达分析
| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 1 引言 | 第13-31页 |
| ·研究的目的和意义 | 第13-14页 |
| ·国内外研究动态和趋势 | 第14-16页 |
| ·全球环境变暖对冬麦育种的影响 | 第14-15页 |
| ·国内冬麦研究的现状与进展 | 第15-16页 |
| ·国内外研究进展 | 第16-26页 |
| ·植物抗寒性鉴定 | 第16-17页 |
| ·植物抗寒相关基因的克隆 | 第17-19页 |
| ·转录因子CBF基因研究进展 | 第19-21页 |
| ·荧光定量PCR的研究进展 | 第21-26页 |
| ·植物抗寒性研究分子生物学基础 | 第26-29页 |
| ·植物基因的克隆方法 | 第26-28页 |
| ·基因功能验证主要方法 | 第28-29页 |
| ·本试验研究内容 | 第29-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-40页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·植物材料 | 第31页 |
| ·实验所需溶液和试剂 | 第31-32页 |
| ·实验器材 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-38页 |
| ·材料处理 | 第33-34页 |
| ·冬麦叶片、叶鞘相对电导率的测定 | 第34页 |
| ·调查返青率 | 第34页 |
| ·冬麦1号总RNA的提取 | 第34-35页 |
| ·cDNA的合成 | 第35页 |
| ·CTAB法提取冬麦1号基因组DNA | 第35页 |
| ·CBF家族基因的克隆 | 第35-38页 |
| ·CBF_2基因的实时荧光定量PCR | 第38-40页 |
| ·定量引物的设计 | 第38页 |
| ·模板的制备 | 第38页 |
| ·确定引物退火温度 | 第38-39页 |
| ·定量的PCR体系和程序 | 第39页 |
| ·数据处理 | 第39-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-54页 |
| ·东农冬麦1号抗寒性鉴定 | 第40-45页 |
| ·在相同低温下不同作用时间对植株组织的影响 | 第40-41页 |
| ·骤然降温对植株组织的影响 | 第41-43页 |
| ·不同品种抗寒能力的确定 | 第43-45页 |
| ·电泳检测结果 | 第45-46页 |
| ·CBF家族基因及其相关基因的筛选 | 第46页 |
| ·CBF_2序列信息学分析 | 第46-50页 |
| ·CBF家族序列的相似性比对 | 第47-48页 |
| ·CBF_2相关信息学分析 | 第48-50页 |
| ·CBF_2实时荧光定量PCR体系优化 | 第50-51页 |
| ·确定目的基因和内参基因的退火温度 | 第50-51页 |
| ·CBF_2基因的表达分析 | 第51-54页 |
| ·CBF_2在东农冬麦1号中的表达 | 第51-53页 |
| ·不同处理温度下CBF_2在东农冬麦1号中的表达 | 第53-54页 |
| 4 讨论 | 第54-59页 |
| ·温度骤降对冬麦1号存活率的影响 | 第54页 |
| ·低温作用时间和强度对冬小麦植株活性的影响 | 第54页 |
| ·东农冬麦1号半致死温度确定 | 第54-55页 |
| ·CBF基因的调控对植物抗冷径途的影响 | 第55-56页 |
| ·冬小麦CBF基因家族的克隆与筛选 | 第56-57页 |
| ·冬小麦CBF蛋白的结构和功能预测 | 第57页 |
| ·CBF_2荧光定量特异性引物的设计 | 第57-58页 |
| ·冬小麦CBF_2基因在低温诱导下的表达情况 | 第58-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第68页 |
