| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 1 前言 | 第8-20页 |
| ·限制性内切酶 | 第8-11页 |
| ·限制性内切酶简介 | 第8页 |
| ·限制性内切酶分类 | 第8-9页 |
| ·限制性内切酶举例 | 第9-11页 |
| ·链式聚合酶反应(Polymerase Chain Reaction)—PCR技术 | 第11-14页 |
| ·PCR技术的原理 | 第11-12页 |
| ·PCR体系 | 第12-13页 |
| ·PCR循环条件 | 第13页 |
| ·PCR技术的研究进展及应用 | 第13-14页 |
| ·DNA测序技术 | 第14-15页 |
| ·DNA测序技术简介 | 第14页 |
| ·DNA测序技术发展 | 第14-15页 |
| ·DNA重组技术 | 第15-17页 |
| ·DNA重组技术概述 | 第15页 |
| ·DNA重组操作 | 第15-16页 |
| ·DNA重组技术的应用 | 第16-17页 |
| ·分子酶工程 | 第17-18页 |
| ·融合酶及其研究进展 | 第17页 |
| ·限制性内切酶改造的研究 | 第17-18页 |
| ·本实验研究的目的及意义 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-39页 |
| ·实验材料与仪器 | 第20-23页 |
| ·实验试剂 | 第20-21页 |
| ·实验仪器 | 第21-22页 |
| ·实验材料 | 第22页 |
| ·实验所用的试剂盒 | 第22-23页 |
| ·菌种与质粒 | 第23页 |
| ·培养基和一些溶液的配置 | 第23-26页 |
| ·培养基 | 第23页 |
| ·实验所用的溶液 | 第23-26页 |
| ·实验方法 | 第26-39页 |
| ·菌种的培养及菌种基因组DNA的提取 | 第26-27页 |
| ·碱裂解法提取载体质粒pET28a+ | 第27-28页 |
| ·基因片段的PCR扩增制备 | 第28-31页 |
| ·亚克隆实验与基因指导的蛋白的表达 | 第31-39页 |
| 3 结果与讨论 | 第39-63页 |
| ·酿酒酵母与黄杆菌的活化培养 | 第39页 |
| ·基因组DNA与载体质粒的提取 | 第39-41页 |
| ·黄杆菌和酿酒酵母基因组DNA的提取 | 第39-40页 |
| ·载体质粒pET28a+的提取与电泳 | 第40-41页 |
| ·PCR扩增制备基因片段 | 第41-46页 |
| ·引物设计 | 第41-42页 |
| ·PI-SceI结合区域基因的PCR制备 | 第42-44页 |
| ·FokI催化区域基因的PCR制备 | 第44-46页 |
| ·亚克隆实验——目的基因整合入载体质粒pET28a+ | 第46-60页 |
| ·第一段基因片段整合入载体质粒pET28a+ | 第46-55页 |
| ·第二段基因片段整合入载体质粒pET28a+ | 第55-60页 |
| ·两基因片段整合后的一些验证实验 | 第60-63页 |
| ·酶切检验基因片段 | 第60页 |
| ·对整合质粒的测序 | 第60-62页 |
| ·两基因片段单独连接后PCR检验 | 第62-63页 |
| 4 结论 | 第63-64页 |
| 5 展望 | 第64-65页 |
| 6 参考文献 | 第65-73页 |
| 7 论文发表情况 | 第73-74页 |
| 8 致谢 | 第74-75页 |
| 附录 | 第75页 |