| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 引言 | 第12-14页 |
| 第一章 综述 | 第14-34页 |
| 1 酪氨酸羟化酶的概述 | 第14-16页 |
| 2 酪氨酸羟化酶的研究进展 | 第16-23页 |
| ·人类酪氨酸羟化酶的研究进展 | 第16-17页 |
| ·哺乳动物酪氨酸羟化酶的研究进展 | 第17-19页 |
| ·昆虫酪氨酸羟化酶的研究进展 | 第19-23页 |
| 3 酪氨酸羟化酶的活性调节机制 | 第23-26页 |
| 参考文献 | 第26-34页 |
| 第二章 研究目的与研究内容 | 第34-36页 |
| 1 研究目的和意义 | 第34页 |
| 2 研究的主要内容 | 第34-35页 |
| 3 技术路线 | 第35-36页 |
| 第三章 实验材料与方法 | 第36-54页 |
| 1 实验材料 | 第36-42页 |
| ·载体与菌种 | 第36页 |
| ·生物材料 | 第36页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第36页 |
| ·其它试剂 | 第36-37页 |
| ·主要实验试剂与配制 | 第37-42页 |
| 2 常用仪器 | 第42-43页 |
| 3 常用实验方法 | 第43-52页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第43页 |
| ·DNA 的连接反应体系 | 第43页 |
| ·连接产物的转化 | 第43页 |
| ·重组质粒的筛选 | 第43页 |
| ·碱裂解法少量制备质粒 DNA | 第43-44页 |
| ·DNA 的酶切反应体系 | 第44-45页 |
| ·目的片段的分离和回收 | 第45页 |
| ·PCR 扩增目的片段 | 第45页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第45-46页 |
| ·SDS-PAGE 蛋白质电泳 | 第46-47页 |
| ·SDS-PAGE 凝胶的染色和脱色 | 第47页 |
| ·Western blot | 第47-48页 |
| ·过柱纯化可溶性融合蛋白 | 第48-49页 |
| ·蛋白含量测定（Bradford 蛋白质测定法） | 第49-50页 |
| ·免疫小鼠，制备多克隆抗体 | 第50页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第50-51页 |
| ·RNA 反转录成 cDNA | 第51页 |
| ·细胞的培养和保存 | 第51页 |
| ·细胞免疫荧光 | 第51-52页 |
| ·冰冻切片及组织免疫荧光 | 第52页 |
| 参考文献 | 第52-54页 |
| 第四章 家蚕 TH 的表达纯化、多克隆抗体制备及生物信息学分析 | 第54-70页 |
| 摘要 | 第54-55页 |
| 1 材料与方法 | 第55-57页 |
| ·试剂材料 | 第55页 |
| ·实验方法 | 第55-57页 |
| 2 结果与分析 | 第57-66页 |
| ·家蚕酪氨酸羟化酶基因的克隆 | 第57-58页 |
| ·酪氨酸羟化酶基因的生物信息学分析 | 第58-62页 |
| ·构建家蚕 TH 重组表达载体 | 第62页 |
| ·家蚕 TH 重组蛋白诱导表达条件优化 | 第62-65页 |
| ·家蚕 TH 重组蛋白的分离纯化 | 第65页 |
| ·Western bliotting 检测家蚕 TH 抗体的特异性 | 第65-66页 |
| 3 讨论 | 第66-68页 |
| ·家蚕酪氨酸羟化酶氨基酸序列生物信息学分析 | 第66-67页 |
| ·原核表达重组蛋白的纯化 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-70页 |
| 第五章 家蚕酪氨酸羟化酶的表达和定位 | 第70-77页 |
| 摘要 | 第70页 |
| 1 材料与方法 | 第70-72页 |
| ·试剂材料 | 第70-71页 |
| ·实验方法 | 第71-72页 |
| 2 结果与分析 | 第72-74页 |
| ·家蚕 TH 基因组织表达模式 | 第72-73页 |
| ·家蚕 TH 在家蚕表皮组织中的分布 | 第73页 |
| ·家蚕 TH 蛋白的亚细胞定位 | 第73-74页 |
| 3 讨论 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-77页 |
| 第六章 HPLC-UV 测定家蚕 TH 活性方法的建立 | 第77-86页 |
| 摘要 | 第77页 |
| 1 材料与方法 | 第77-81页 |
| ·仪器与试剂 | 第77-78页 |
| ·实验方法 | 第78-81页 |
| 2 结果与分析 | 第81-83页 |
| ·线性范围和检测限 | 第81页 |
| ·样品分析 | 第81-82页 |
| ·样品回收率 | 第82-83页 |
| ·精密度 | 第83页 |
| 3 讨论 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-86页 |
| 第七章 家蚕酪氨酸羟化酶突变体的构建、原核表达纯化研究 | 第86-97页 |
| 摘要 | 第86-87页 |
| 1 材料与方法 | 第87-89页 |
| ·试剂材料 | 第87页 |
| ·实验方法 | 第87-89页 |
| 2 结果与分析 | 第89-94页 |
| ·家蚕 BmTH 定点突变体 D419G 的鉴定 | 第89-92页 |
| ·家蚕 BmTH 调节区域缺失突变体 TH-A-的鉴定 | 第92页 |
| ·构建家蚕突变体 BmTH-D419G 和 BmTH-A-重组表达载体 | 第92-93页 |
| ·突变体 BmTH-D419G 和 BmTH-A-的表达纯化 | 第93-94页 |
| 3 讨论 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-97页 |
| 第八章 家蚕酪氨酸羟化酶的结构性质研究 | 第97-109页 |
| 摘要 | 第97-98页 |
| 1 材料与方法 | 第98-99页 |
| ·实验材料 | 第98页 |
| ·实验方法 | 第98-99页 |
| 2 结果与分析 | 第99-106页 |
| ·HPLC-UV 检测家蚕 TH 突变体 BmTH-D419G 和 BmTH-A-活性 | 第99-100页 |
| ·家蚕 BmTH 和突变体 BmTH-D419G 和 BmTH-A-的三维建模 | 第100-101页 |
| ·抑制剂 3I-L-酪氨酸对家蚕 TH 酶活的影响 | 第101-102页 |
| ·紫外扫描分析 | 第102-103页 |
| ·内源荧光光谱分析 | 第103-106页 |
| 3 讨论 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-109页 |
| 结论 | 第109-110页 |
| 1 已取得的成果 | 第109页 |
| 2 有待进行的研究 | 第109-110页 |
| 攻硕期间科研情况 | 第110-111页 |
| 附录一：英文简写对照表 | 第111-113页 |
| 附录二：实验中使用的部分载体结构图 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114-116页 |
