| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 縮略语 | 第10-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-28页 |
| ·嗜酸性喜温硫杆菌简介 | 第11-12页 |
| ·嗜酸性喜温硫杆菌的特性 | 第11页 |
| ·嗜酸性喜温硫杆菌在生物浸矿中的作用 | 第11-12页 |
| ·嗜酸性喜温硫杆菌硫氧化系统的研究进展 | 第12-16页 |
| ·Sox硫氧化系统 | 第13-14页 |
| ·连四硫酸盐水解酶 | 第14-15页 |
| ·硫加氧还原酶 | 第15页 |
| ·硫化物-辅酶Q还原酶 | 第15页 |
| ·硫代硫酸盐-辅酶Q氧化还原酶 | 第15-16页 |
| ·异二硫化物还原酶 | 第16页 |
| ·硫氰酸酶的研究进展 | 第16-22页 |
| ·硫氰酸酶的结构及分类 | 第16-17页 |
| ·硫氰酸酶的功能研究 | 第17-19页 |
| ·A.caldus MTH-04中硫氰酸酶的分析 | 第19-22页 |
| ·嗜酸硫杆菌属遗传操作体系的研究进展 | 第22-25页 |
| ·转化系统 | 第22页 |
| ·接合转移系统 | 第22-25页 |
| ·基于同源重组的基因敲除的研究进展 | 第25-27页 |
| ·大肠杆菌中常用的敲除方法 | 第25-26页 |
| ·归位内切酶I-Sce Ⅰ及在基因敲除过程中的应用 | 第26-27页 |
| ·嗜酸硫杆菌中基因敲除的研究进展 | 第27页 |
| ·本论文的研究目的和研究内容 | 第27-28页 |
| 第二章 硫氰酸酶的表达及性质研究 | 第28-42页 |
| ·引言 | 第28页 |
| ·材料和方法 | 第28-37页 |
| ·菌株和质粒 | 第28-29页 |
| ·培养基和培养条件 | 第29页 |
| ·试剂和仪器 | 第29-30页 |
| ·DNA操作技术 | 第30-33页 |
| ·SDS-PAGE操作方法 | 第33-35页 |
| ·硫氰酸酶酶活检测 | 第35-36页 |
| ·Western blot检测技术 | 第36-37页 |
| ·结果与讨论 | 第37-42页 |
| ·质粒pGST-rhd的构建 | 第37-39页 |
| ·硫氰酸酶的表达检测 | 第39-42页 |
| 第三章 A.caldus MTH-04中硫氰酸酶基因的置换敲除 | 第42-58页 |
| ·引言 | 第42页 |
| ·材料和方法 | 第42-48页 |
| ·菌株和质粒 | 第42-43页 |
| ·培养基与培养条件 | 第43-44页 |
| ·试剂和仪器 | 第44页 |
| ·DNA操作技术 | 第44-45页 |
| ·RNA操作技术 | 第45-47页 |
| ·大肠杆菌-嗜酸性喜温硫杆菌的接合转移方法 | 第47-48页 |
| ·结果 | 第48-56页 |
| ·硫氰酸酶敲除可行性分析 | 第48-49页 |
| ·置换敲除自杀质粒的构建 | 第49-52页 |
| ·置换敲除菌株的筛选 | 第52-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| 第四章 A.caldus MTH-04中硫氰酸酶基因的无痕敲除 | 第58-77页 |
| ·引言 | 第58页 |
| ·材料和方法 | 第58-62页 |
| ·菌株和质粒 | 第58-59页 |
| ·培养基和培养条件 | 第59页 |
| ·试剂和仪器 | 第59页 |
| ·DNA操作技术 | 第59-60页 |
| ·嗜酸性喜温硫杆菌电转化操作方法 | 第60-62页 |
| ·结果 | 第62-73页 |
| ·无痕敲除自杀质粒的构建 | 第62-65页 |
| ·单交换子的筛选及鉴定 | 第65-68页 |
| ·归位酶I-Sce Ⅰ表达及基因回补质粒pIS-rhd的构建 | 第68-71页 |
| ·硫氰酸酶敲除菌株的筛选及鉴定 | 第71-73页 |
| ·讨论 | 第73-77页 |
| 全文总结与展望 | 第77-79页 |
| 本文的主要创新点 | 第77页 |
| 研究中存在的不足及展望 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第88页 |
