| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-25页 |
| 1．1 作物抗病突变体的离体选择 | 第11-16页 |
| 1．1．1 离体筛选作物抗病突变体的理论依据 | 第11-12页 |
| 1．1．2 作物抗病突变体筛选的实验体系 | 第12-16页 |
| 1．1．2．1 供体材料的准备 | 第12-13页 |
| 1．1．2．2 抗病突变体的选择方法 | 第13-14页 |
| 1．1．2．2．1 病原菌致病毒素选择法 | 第13页 |
| 1．1．2．2．2 病原菌直接选择法 | 第13-14页 |
| 1．1．2．3 离体筛选抗病突变体的技术 | 第14页 |
| 1．1．2．4 抗病突变体的鉴定 | 第14-16页 |
| 1．2 植物几丁质酶基因工程研究进展 | 第16-20页 |
| 1．2．1 植物几丁质酶的主要性质 | 第16页 |
| 1．2．2 植物几丁质酶的结构和功能 | 第16页 |
| 1．2．3 植物几丁质酶的同源性和多样性 | 第16-17页 |
| 1．2．4 植物几丁质酶诱导表达和调节 | 第17-18页 |
| 1．2．5 植物几丁质酶在植物抗病反应中的作用 | 第18-19页 |
| 1．2．6 植物几丁质酶基因在植物基因工程的应用 | 第19-20页 |
| 1．3 甘薯遗传转化技术研究进展 | 第20-25页 |
| 1．3．1 甘薯转化的组织培养和靶组织的选择 | 第20-23页 |
| 1．3．1．1 原生质体再生系统 | 第20-21页 |
| 1．3．1．2 甘薯组织器官再生系统 | 第21-22页 |
| 1．3．1．3 甘薯体细胞胚再生系统 | 第22-23页 |
| 1．3．2 甘薯离体遗传转化方法 | 第23-25页 |
| 1．3．2．1 农杆菌介导法 | 第23-24页 |
| 1．3．2．2 电激法 | 第24页 |
| 1．3．2．3 基因枪法 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-34页 |
| 2．1 甘薯叶片培养高效再生体系的建立 | 第25-26页 |
| 2．1．1 材料准备 | 第25页 |
| 2．1．2 培养方法和培养条件 | 第25页 |
| 2．1．3 培养基筛选 | 第25-26页 |
| 2．1．4 ABA和AgNO_3适宜浓度的确定 | 第26页 |
| 2．1．5 叶盘取样部位的确定 | 第26页 |
| 2．2 甘薯抗蔓割病突变体的离体筛选 | 第26-29页 |
| 2．2．1 材料 | 第26页 |
| 2．2．2 方法 | 第26-27页 |
| 2．2．2．1 粗毒素提取 | 第26页 |
| 2．2．2．2 粗毒致病力的测定 | 第26页 |
| 2．2．2．3 抗毒素变异体的筛选 | 第26-27页 |
| 2．2．2．4 抗毒素变异性的理化特征分析 | 第27页 |
| 2．2．5 变异系的快繁及移栽 | 第27页 |
| 2．2．6 再生植系抗病性鉴定 | 第27-28页 |
| 2．2．7 抗病突变体的RAPD鉴定 | 第28-29页 |
| 2．2．7．1 叶片总DNA的提取 | 第28页 |
| 2．2．7．2 PCR反应体系转化 | 第28页 |
| 2．2．7．3 RAPD反应程序 | 第28-29页 |
| 2．2．7．4 相似率分析 | 第29页 |
| 2．3 根癌农杆菌的介导和甘薯转化 | 第29-34页 |
| 2．3．1 材料 | 第29-30页 |
| 2．3．2 方法 | 第30-34页 |
| 2．3．2．1 农杆菌质粒鉴定 | 第30页 |
| 2．3．2．2 Kan筛选浓度的确定 | 第30页 |
| 2．3．2．3 抑制农杆菌抗生素及其浓度的确定 | 第30页 |
| 2．3．2．4 预培养时间的确定 | 第30页 |
| 2．3．2．5 感染和共培养时间的确定 | 第30-31页 |
| 2．3．2．6 转化植株的分子鉴定 | 第31-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-60页 |
| 3．1 叶片培养体系 | 第34-41页 |
| 3．1．1 叶片愈伤组织的诱导和生长 | 第34-36页 |
| 3．1．2 根长芽的分化 | 第36-37页 |
| 3．1．3 外植体部位对成苗率的影响 | 第37页 |
| 3．1．4 添力AgNO_3或ABA对叶片成苗率的影响 | 第37-38页 |
| 3．1．5 培养体系的确定 | 第38-41页 |
| 3．2 提取抗蔓割病突变体的筛选 | 第41-53页 |
| 3．2．1 甘薯蔓割病菌粗毒素致病力的确定 | 第41-43页 |
| 3．2．2 粗毒素对甘薯叶片愈伤组织诱导的影响 | 第43页 |
| 3．2．3 粗毒素对甘薯叶片外植体不定根和不定芽的影响 | 第43-44页 |
| 3．2．4 突变体的筛选方法比较 | 第44-46页 |
| 3．2．5 突变体的抗病性田间鉴定 | 第46-47页 |
| 3．2．6 突变体的RAPD鉴定 | 第47-52页 |
| 3．2．6．1 甘薯RAPD反应体系建立 | 第47-49页 |
| 3．2．6．2 突变体的RAPD扩增结果分析 | 第49-52页 |
| 3．2．7 突变体的生理特性分析 | 第52-53页 |
| 3．2．7．1 粗毒素对突变体细胞膜透性的影响 | 第52页 |
| 3．2．7．2 粗毒素对突变体苯丙氨酸解氨酶的活性的影响 | 第52-53页 |
| 3．3 根癌农杆菌介导的甘薯遗传转化 | 第53-60页 |
| 3．3．1 抗菌素筛选验证 | 第53页 |
| 3．3．2 转化的农杆菌质粒PCR检测结果 | 第53-54页 |
| 3．3．3 Kan浓度对外植体生长和分化的影响 | 第54-55页 |
| 3．3．4 羧苄青霉和头孢素对芽分化的影响 | 第55页 |
| 3．3．5 感染时间和共培养的对转化率的影响 | 第55-57页 |
| 3．3．6 外植体共培养对转化率的影响 | 第57-58页 |
| 3．3．7 AS处理对转化率的影响 | 第58页 |
| 3．3．8 转化植株的获得 | 第58页 |
| 3．3．9 转基因植株的分子检测 | 第58-60页 |
| 3．3．9．1 转化植株PCR检测 | 第58-59页 |
| 3．3．9．2 转化植株PCR-southern杂交分析 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-64页 |
| 4．1 甘薯叶片组织培养 | 第60-61页 |
| 4．2 甘薯抗蔓割病突变体的离体选择 | 第61-62页 |
| 4．3 甘薯的遗传转化 | 第62-64页 |
| 5 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-75页 |
| 附录1： | 第75-76页 |
| 附录2： | 第76-77页 |
| 附录3： | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
