| 中文摘要 | 第1-13页 |
| 英文摘要 | 第13-15页 |
| 前言 | 第15-36页 |
| 1 蛋白酶的分类 | 第15页 |
| 2 微生物蛋白酶 | 第15-17页 |
| ·微生物作为蛋白酶来源的优越性 | 第15-17页 |
| ·细菌来源的蛋白酶 | 第17页 |
| ·霉菌来源的蛋白酶 | 第17页 |
| ·酵母来源的蛋白酶 | 第17页 |
| ·放线菌来源的蛋白酶 | 第17页 |
| ·病毒来源的蛋白酶 | 第17页 |
| 3 苏云金芽孢杆菌蛋白酶 | 第17-22页 |
| ·苏云金芽孢杆菌概述 | 第17-18页 |
| ·苏云金芽孢杆菌产生酶类 | 第18-19页 |
| ·苏云金芽孢杆菌蛋白酶 | 第19-22页 |
| ·基本概况 | 第19-20页 |
| ·影响蛋白酶产生的因素 | 第20页 |
| ·蛋白酶对Bt毒性影响 | 第20-22页 |
| 4 蛋白酶工业生产 | 第22-28页 |
| ·蛋白酶的生产菌种 | 第22-23页 |
| ·蛋白酶发酵工艺条件及控制 | 第23-24页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·培养条件对产酶的影响 | 第24页 |
| ·发酵控制对产酶的影响 | 第24页 |
| ·发酵优化的试验设计 | 第24-27页 |
| ·正交设计 | 第25页 |
| ·均匀设计 | 第25页 |
| ·本研究试验设计依据 | 第25-27页 |
| ·数学统计软件 | 第27-28页 |
| ·SAS软件 | 第27-28页 |
| ·Origin软件 | 第28页 |
| 5 发酵动力学模型的构建 | 第28-30页 |
| 6 蛋白酶的纯化与酶学特性 | 第30-33页 |
| ·蛋白酶的纯化 | 第30-31页 |
| ·蛋白酶特性 | 第31-33页 |
| 7 酶侧链基团化学修饰 | 第33-34页 |
| 8 研究的意义与目的 | 第34-36页 |
| 第1章 Bt耐热蛋白酶的菌株筛选与生理生化 | 第36-43页 |
| 1 材料与方法 | 第36-39页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·菌种 | 第36页 |
| ·药品与试剂 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·培养基 | 第36-37页 |
| ·方法 | 第37-39页 |
| ·酶活测定 | 第37-38页 |
| ·菌株筛选 | 第38页 |
| ·镜检 | 第38页 |
| ·生理生化反应 | 第38-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-42页 |
| ·产耐温蛋白酶Bt菌株的筛选 | 第39-41页 |
| ·FS140培养特征与生理生化 | 第41-42页 |
| 3 小结与讨论 | 第42-43页 |
| 第2章 BtFS140产耐温蛋白酶发酵条件优化 | 第43-57页 |
| 1 材料与方法 | 第43-44页 |
| ·试验材料 | 第43页 |
| ·菌株 | 第43页 |
| ·培养基 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-44页 |
| ·酶活力测定 | 第43页 |
| ·液体发酵条件 | 第43页 |
| ·发酵培养基优化 | 第43-44页 |
| ·发酵培养条件的优化 | 第44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-55页 |
| ·单因素实验 | 第45-46页 |
| ·Plackett-Burman设计筛选产酶重要影响因子 | 第46-48页 |
| ·响应面分析(RSM)优化培养基组成 | 第48-52页 |
| ·发酵条件的优化 | 第52-55页 |
| 3 小结与讨论 | 第55-57页 |
| 第3章 Bt140蛋白酶发酵动力学模型的构建 | 第57-65页 |
| 1 材料与方法 | 第57-58页 |
| ·试验材料 | 第57页 |
| ·菌种 | 第57页 |
| ·培养基 | 第57页 |
| ·方法 | 第57-58页 |
| ·液体发酵条件 | 第57页 |
| ·分析测定 | 第57-58页 |
| ·数据处理 | 第58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-64页 |
| ·蛋白酶发酵过程代谢变化特征 | 第58-59页 |
| ·细胞生长动力学模型 | 第59-60页 |
| ·蛋白酶合成动力学模型 | 第60-61页 |
| ·基质消耗动力学模型 | 第61-62页 |
| ·模型验证 | 第62-64页 |
| 3 小结与讨论 | 第64-65页 |
| 第4章 蛋白酶补料发酵初步研究 | 第65-72页 |
| 1 材料与方法 | 第65-66页 |
| ·试验材料 | 第65页 |
| ·菌种 | 第65页 |
| ·培养基 | 第65页 |
| ·仪器设备 | 第65页 |
| ·方法 | 第65-66页 |
| ·液体摇瓶发酵条件 | 第65页 |
| ·种子培养液的制备 | 第65页 |
| ·7L自动罐发酵条件 | 第65-66页 |
| ·分析测定 | 第66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-71页 |
| ·摇瓶分批发酵 | 第66-68页 |
| ·7L自动罐分批发酵 | 第68-69页 |
| ·pH控制发酵 | 第69-70页 |
| ·葡萄糖补料分批发酵 | 第70-71页 |
| 3 小结与讨论 | 第71-72页 |
| 第5章 蛋白酶分离纯化与性质的研究 | 第72-92页 |
| 1 材料与方法 | 第72-77页 |
| ·试验材料 | 第72-74页 |
| ·主要试剂与药品 | 第72页 |
| ·缓冲液 | 第72-73页 |
| ·主要仪器 | 第73-74页 |
| ·方法 | 第74-77页 |
| ·酶活力与比活力的测定 | 第74页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第74页 |
| ·酶的分离纯化 | 第74-75页 |
| ·SDS-PAGE | 第75-76页 |
| ·蛋白质分子量测定 | 第76页 |
| ·酶分子的紫外吸收光谱测定 | 第76页 |
| ·酶分子的内源荧光光谱测定 | 第76页 |
| ·酶催化反应的动力学性质研究 | 第76-77页 |
| ·金属离子对酶活力的影响 | 第77页 |
| ·有机溶剂对酶促反应的影响 | 第77页 |
| 2 结果与分析 | 第77-91页 |
| ·酶的分离纯化 | 第77-80页 |
| ·酶的理化特性 | 第80-82页 |
| ·酶催化反应的动力学性质研究 | 第82-86页 |
| ·金属离子对酶活力的影响 | 第86-89页 |
| ·有机溶剂对酶促反应的影响 | 第89-91页 |
| 3 小结与讨论 | 第91-92页 |
| 第6章 蛋白酶化学修饰与活性中心的研究 | 第92-104页 |
| 1 材料与方法 | 第92-93页 |
| ·试验材料 | 第92页 |
| ·主要试剂与药品 | 第92页 |
| ·主要仪器 | 第92页 |
| ·方法 | 第92-93页 |
| ·酶活力的测定 | 第92-93页 |
| ·酶分子的紫外吸收光谱的测定 | 第93页 |
| ·蛋白酶的化学修饰 | 第93页 |
| ·EDTA对酶活力的影响 | 第93页 |
| ·不同金属离子对被EDTA抑制的酶的活力影响 | 第93页 |
| 2 结果与分析 | 第93-102页 |
| ·赖氨酸ε-氨基的化学修饰 | 第94页 |
| ·丝氨酸羰基的化学修饰 | 第94-95页 |
| ·半胱氨酸巯基的化学修饰 | 第95页 |
| ·精氨酸胍基的化学修饰 | 第95-96页 |
| ·酪氨酸酚羟基的化学修饰 | 第96页 |
| ·组氨酸酚咪唑基的化学修饰 | 第96-98页 |
| ·色氨酸吲哚基的化学修饰 | 第98-99页 |
| ·蛋氨酸硫醚基的化学修饰 | 第99页 |
| ·二硫键的化学修饰 | 第99-100页 |
| ·EDTA对酶活力的影响 | 第100-101页 |
| ·不同金属离子对被EDTA抑制的酶的活力影响 | 第101-102页 |
| 3 小结与讨论 | 第102-104页 |
| 第7章 总结 | 第104-107页 |
| 1 主要研究结果 | 第104-105页 |
| 2 创新点 | 第105-106页 |
| 3 下一步研究内容 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-115页 |
| 附录1 博士期间发表(或投稿)论文 | 第115-116页 |
| 致谢 | 第116页 |