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番茄果实SPS反义表达载体的构建及遗传转化的研究

缩略词第1-8页
摘要第8-9页
Abstract第9-10页
一、前言第10-23页
 1 果实中糖的积累与糖代谢酶的研究第10-12页
 2 根癌农杆菌介导的转化机理第12-16页
   ·根癌农杆菌介导的基本原理第13-14页
   ·根癌农杆菌的结构特点及转移机理第14-15页
   ·影响农杆菌介导植物遗传转化的因素第15-16页
 3 SPS的生物学功能及应用第16-19页
   ·SPS的基本性质及生物学功能第16页
   ·SPS在蔗糖代谢中的作用第16-17页
   ·SPS在果实成熟衰老过程中的作用第17-18页
   ·关于SPS的其它功能第18-19页
 4 关于标记基因的缺陷第19-20页
 5 基因工程在番茄育种上的应用第20-22页
   ·反义基因在番茄育种上的价值第20-21页
   ·番茄基因工程育种研究的前景与展望第21-22页
 6 本研究的目的和意义第22-23页
二、番茄果实蔗糖磷酸合成酶基因反义表达载体的构建第23-35页
 1 材料与方法第23-32页
   ·材料第23-25页
   ·方法第25-32页
 2 结果与分析第32-33页
   ·阳性菌落的PCR检测第32页
   ·利用酶切进行鉴定第32-33页
 3 讨论第33-35页
   ·关于酶切和连接第33页
   ·关于标记基因的切除第33-34页
   ·关于反义技术在植物基因工程中的应用第34-35页
三、番茄高效再生体系的优化及其遗传转化第35-51页
 1 材料第35-36页
   ·番茄材料第35页
   ·植物激素第35页
   ·抗生素第35页
   ·培养基第35-36页
 2 方法第36-43页
   ·番茄高效再生体系的优化第36-37页
   ·氯化钙法制备根癌农杆菌感受态细胞第37页
   ·植物表达载体向农杆菌感受态细胞的转化第37页
   ·菌液PCR鉴定第37-38页
   ·番茄的植物转化第38页
   ·再生植株的PCR检测第38-39页
   ·PCR Southern Blots鉴定转基因植株第39-42页
   ·成熟转基因番茄果实单糖含量及蔗糖磷酸合成酶活性测定第42-43页
 3 结果与分析第43-49页
   ·番茄高效再生体系的优化第43-45页
   ·将植物表达载体从大肠杆菌向农杆菌的转化第45页
   ·农杆菌介导的番茄遗传转化第45-46页
   ·转基因植株的PCR鉴定第46-48页
   ·PCR Southern Blots鉴定第48页
   ·转基因番茄果实成熟期果实的单糖含量及蔗糖磷酸合成酶活性第48-49页
 4 讨论第49-51页
   ·影响番茄种子出苗率及污染率的因素第49页
   ·影响番茄离体再生体系的一些主要因素第49页
   ·外源激素对番茄组织培养体系建立的影响第49-50页
   ·再生芽的生根及大田移栽第50页
   ·农杆菌侵染浓度高低与遗传转化之间的关系第50页
   ·PCR法在鉴定转基因植株中的应用第50-51页
四、本研究的主要结论与展望第51-53页
 1 本研究的主要结论第51页
   ·构建了番茄蔗糖磷酸合成酶基因的反义表达载体Anti-TSPS第51页
   ·优化了番茄高效再生体系第51页
   ·利用农杆菌介导法得到了番茄的转基因植株第51页
   ·进一步验证了SPS基因的功能第51页
 2 本研究的主要创新点第51-52页
 3 展望第52-53页
参考文献第53-58页
致谢第58页

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