| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 引言 | 第13-26页 |
| ·戊型肝炎的研究进展 | 第13-21页 |
| ·戊型肝炎的病原学 | 第13-16页 |
| ·戊型肝炎流行病学 | 第16-18页 |
| ·戊型肝炎的临床症状和病理变化 | 第18页 |
| ·戊型肝炎诊断 | 第18-20页 |
| ·戊型肝炎疫苗的研究 | 第20-21页 |
| ·戊型肝炎的预防 | 第21页 |
| ·HEV 抗原表位的研究 | 第21-22页 |
| ·HEV 抗原位点的研究方法 | 第22-23页 |
| ·多肽合成技术 | 第22页 |
| ·噬菌体展示技术 | 第22页 |
| ·生物传感器技术 | 第22页 |
| ·蛋白质结构预测技术 | 第22-23页 |
| ·利用抗原抗体反应方法 | 第23页 |
| ·HEV 抗原位点研究进展 | 第23-24页 |
| ·ORF2 编码的蛋白 | 第23-24页 |
| ·ORF3 编码的蛋白 | 第24页 |
| ·本研究目的和意义 | 第24-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-39页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·毒株、菌种、细胞、血清 | 第26页 |
| ·表达载体 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·实验动物 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-39页 |
| ·HEV V1 蛋白基因的表达与鉴定 | 第27-31页 |
| ·引物设计 | 第27页 |
| ·粪便样品的处理与核酸提取 | 第27-28页 |
| ·V1 基因的 RT-PCR 扩增 | 第28页 |
| ·PCR 产物的纯化和克隆 | 第28-29页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29页 |
| ·连接产物的转化 | 第29页 |
| ·质粒 DNA 的提取 | 第29页 |
| ·阳性克隆的筛选与鉴定 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的酶切 | 第30页 |
| ·pET-32a 的酶切 | 第30页 |
| ·表达载体与目的片段的连接 | 第30页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第30页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第30页 |
| ·Western blot 分析 | 第30-31页 |
| ·HEV V1 蛋白的单克隆抗体的制备与鉴定 | 第31-32页 |
| ·动物免疫 | 第31页 |
| ·细胞融合 | 第31页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第31-32页 |
| ·单克隆抗体的特异性鉴定 | 第32页 |
| ·单克隆抗体亚类的鉴定 | 第32页 |
| ·HEV V1 蛋白抗原表位鉴定 | 第32-37页 |
| ·V1 蛋白基因的分段克隆与表达 | 第32页 |
| ·单克隆抗体识别的表位的初步鉴定 | 第32-34页 |
| ·短肽融合蛋白的设计 | 第34-37页 |
| ·短肽融合蛋白表达质粒的构建及表达纯化 | 第37页 |
| ·HEV V1 蛋白抗原表位的定位与分析 | 第37页 |
| ·检测鼠抗融合蛋白抗体 | 第37-38页 |
| ·鼠抗表位融合蛋白血清的制备 | 第37页 |
| ·ELISA 检测鼠抗融合蛋白免疫血清 | 第37-38页 |
| ·表位反应原性检测 | 第38-39页 |
| 3 结果 | 第39-51页 |
| ·HEV V1 蛋白基因的表达与鉴定 | 第39-40页 |
| ·V1 蛋白基因表达载体的构建 | 第39-40页 |
| ·V1 蛋白基因的表达及 Western-blot 分析 | 第40页 |
| ·V1 蛋白单克隆抗体的制备 | 第40-42页 |
| ·阳性细胞克隆株的筛选 | 第40-41页 |
| ·间接免疫荧光试验 | 第41-42页 |
| ·ELISA 检测六株单抗与ORF2 其它部分片段的蛋白的反应性 | 第42页 |
| ·单克隆抗体亚类的鉴定 | 第42页 |
| ·HEV V1 蛋白抗原表位鉴定 | 第42-48页 |
| ·M1、M2 基因表达载体的构建 | 第42-43页 |
| ·M1、M2 蛋白基因的表达及 Western-blot 分析 | 第43-44页 |
| ·V1 蛋白单克隆抗体抗原表位的初步鉴定 | 第44-45页 |
| ·短肽融合蛋白的表达与纯化 | 第45页 |
| ·V1 蛋白抗原表位鉴定 | 第45-48页 |
| ·鼠抗表位融合蛋白血清的制备 | 第48-49页 |
| ·免疫用抗原的纯化 | 第48-49页 |
| ·抗原表位的免疫原性 | 第49页 |
| ·抗原表位反应原性的检测 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-55页 |
| ·swDQ 株 HEV V1 蛋白的表达 | 第51-52页 |
| ·swDQ 株 HEV V1 蛋白单克隆抗体的制备 | 第52-53页 |
| ·swDQ 株 HEV V1 蛋白表位的鉴定 | 第53-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-67页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第67页 |
