| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-28页 |
| ·引言 | 第12页 |
| ·食物过敏 | 第12-14页 |
| ·食物过敏的概念 | 第12页 |
| ·食物过敏机理 | 第12-13页 |
| ·主要过敏性食物 | 第13-14页 |
| ·牛乳过敏 | 第14-21页 |
| ·牛乳中的主要过敏原 | 第14-15页 |
| ·牛乳中过敏原蛋白的主要结构特征 | 第15-17页 |
| ·过敏原表位与过敏原性 | 第17-21页 |
| ·免疫交叉反应 | 第21页 |
| ·水牛乳业发展概况 | 第21-24页 |
| ·水牛乳的特点及优势 | 第22-23页 |
| ·水牛乳业发展概况 | 第23-24页 |
| ·食物过敏原的检测 | 第24-26页 |
| ·食物过敏原的检测方法 | 第24页 |
| ·酶联免疫吸附实验(ELISA) | 第24-26页 |
| ·乳过敏原的检测 | 第26页 |
| ·立题背景与研究内容 | 第26-28页 |
| ·立题背景 | 第26-27页 |
| ·研究内容 | 第27-28页 |
| 第2章 水牛乳β-乳球蛋白的分离纯化 | 第28-43页 |
| ·引言 | 第28页 |
| ·材料与设备 | 第28-31页 |
| ·试剂与材料 | 第28-29页 |
| ·设备 | 第29页 |
| ·溶液的配制 | 第29-31页 |
| ·实验方法 | 第31-34页 |
| ·牛乳的预处理 | 第31页 |
| ·除酪蛋白 | 第31页 |
| ·超滤 | 第31页 |
| ·分离水牛乳β-乳球蛋白 | 第31-32页 |
| ·检测所分离蛋白的纯度 | 第32-33页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第33-34页 |
| ·结果 | 第34-39页 |
| ·乳清电泳图 | 第34-35页 |
| ·离子交换分离水牛乳β-乳球蛋白的结果 | 第35-36页 |
| ·凝胶层析分离水牛乳β-乳球蛋白的结果 | 第36-38页 |
| ·蛋白分离过程中样品蛋白含量的变化 | 第38页 |
| ·离子交换层析及凝胶层析分离水牛乳β-乳球蛋白的得率 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-42页 |
| ·关于酪蛋白的剔除 | 第39页 |
| ·超滤 | 第39-40页 |
| ·关于离子交换层析分离水牛乳β-乳球蛋白 | 第40页 |
| ·关于凝胶层析进一步分离纯化水牛乳β-乳球蛋白 | 第40-41页 |
| ·关于SDS-PAGE、IEF-PAGE检测蛋白的纯度 | 第41页 |
| ·分离过程中蛋白含量的变化 | 第41-42页 |
| ·本章小节 | 第42-43页 |
| 第3章 抗水牛乳β-乳球蛋白多克隆抗体的制备 | 第43-53页 |
| ·引言 | 第43页 |
| ·材料与设备 | 第43-44页 |
| ·试剂 | 第43-44页 |
| ·仪器与耗材 | 第44页 |
| ·溶液配制 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-47页 |
| ·试验动物 | 第44页 |
| ·抗原的准备 | 第44页 |
| ·免疫方案 | 第44-45页 |
| ·血清的分离 | 第45页 |
| ·建立检测抗体效价的间接ELISA方法 | 第45页 |
| ·间接ELISA测抗体效价 | 第45页 |
| ·琼脂双向免疫扩散法测抗体效价 | 第45-46页 |
| ·琼脂双向免疫扩散法检测抗体特异性 | 第46页 |
| ·间接竞争ELISA法检测抗体特异性 | 第46-47页 |
| ·实验结果 | 第47-49页 |
| ·抗血清效价间接ELISA检测方法的建立 | 第47-48页 |
| ·琼脂双向免疫扩散法测抗体效价 | 第48-49页 |
| ·琼脂双向免疫扩散检测抗体特异性 | 第49页 |
| ·讨论 | 第49-52页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第49-50页 |
| ·抗体效价的检测方法 | 第50-51页 |
| ·兔对水牛乳β-乳球蛋白的免疫应答 | 第51页 |
| ·抗体特异性 | 第51-52页 |
| ·本章小结 | 第52-53页 |
| 第4章 水牛乳β-乳球蛋白的间接竞争ELISA检测方法的建立 | 第53-68页 |
| ·引言 | 第53页 |
| ·材料与设备 | 第53-54页 |
| ·材料与试剂 | 第53-54页 |
| ·仪器与耗材 | 第54页 |
| ·溶液的配制 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-58页 |
| ·ELISA基本操作程序 | 第55-56页 |
| ·间接ELISA法评价酶标板的质量 | 第56页 |
| ·间接ELISA法确定抗原的最佳包被浓度和抗体的稀释倍数 | 第56页 |
| ·抗原最佳包被条件的确定 | 第56页 |
| ·抗原抗体最佳反应条件的确定 | 第56页 |
| ·最佳封阻条件的确定 | 第56-57页 |
| ·终止时间确定 | 第57页 |
| ·间接竞争ELISA法比较不同抗体稀释度对竞争抑制曲线的影响 | 第57页 |
| ·间接竞争ELISA法比较不同二抗浓度对竞争抑制曲线的影响 | 第57页 |
| ·间接竞争ELISA标准竞争抑制曲线的制作 | 第57页 |
| ·精确度 | 第57页 |
| ·灵敏度与最低检出限 | 第57-58页 |
| ·样品检测 | 第58页 |
| ·结果 | 第58-64页 |
| ·酶标板质量的评价 | 第58-59页 |
| ·抗原包被浓度和抗体最佳稀释倍数的确定 | 第59页 |
| ·抗原最佳包被条件 | 第59-60页 |
| ·封阻条件的确定 | 第60页 |
| ·抗原抗体反应条件的确定 | 第60页 |
| ·终止时间的确定 | 第60-61页 |
| ·不同抗体浓度对间接竞争ELISA竞争抑制曲线的影响 | 第61页 |
| ·比较不同二抗稀释度对间接竞争ELISA竞争抑制曲线的影响 | 第61-62页 |
| ·制作间接竞争ELISA标准曲线 | 第62-63页 |
| ·竞争抑制率批间、批内差异 | 第63页 |
| ·灵敏度与最低检出限 | 第63-64页 |
| ·样品检测结果 | 第64页 |
| ·讨论 | 第64-67页 |
| ·酶标板质量的评价 | 第64页 |
| ·包被 | 第64-65页 |
| ·封阻 | 第65-66页 |
| ·抗原抗体反应条件 | 第66页 |
| ·抗体稀释度对竞争抑制曲线的影响 | 第66页 |
| ·酶标二抗稀释倍数对竞争抑制曲线的影响 | 第66-67页 |
| ·方法的应用与比较 | 第67页 |
| ·本章小结 | 第67-68页 |
| 第5章 结论 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
| 硕士期间成果 | 第74页 |
