| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-25页 |
| ·丝状真菌 | 第10页 |
| ·基因敲除技术及其在丝状真菌研究中的应用 | 第10-15页 |
| ·产生及历史 | 第10-11页 |
| ·基因敲除的概念及原理 | 第11-12页 |
| ·基因敲除的操作步骤 | 第12-14页 |
| ·基因敲除技术在丝状真菌研究中应用 | 第14-15页 |
| ·丝状真菌基因敲除技术存在的问题及研究现状 | 第15-20页 |
| ·存在的问题 | 第15-16页 |
| ·影响同源重组频率的因素 | 第16页 |
| ·研究现状 | 第16-20页 |
| ·超氧化物歧化酶分子生物学研究进展 | 第20-23页 |
| ·超氧化物歧化酶 | 第20-21页 |
| ·超氧化物歧化酶分子生物学研究进展 | 第21-23页 |
| ·研究的目的、内容和意义 | 第23-25页 |
| 第二章 橙色红曲菌SOD基因侧翼序列的克隆及分析 | 第25-40页 |
| ·材料 | 第25-28页 |
| ·菌种和质粒 | 第25-26页 |
| ·引物 | 第26页 |
| ·主要仪器与设备 | 第26-27页 |
| ·试剂与溶液 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-33页 |
| ·Fosmid黏粒的提取 | 第28-29页 |
| ·PCR筛选文库 | 第29页 |
| ·限制性内切酶酶切阳性黏粒 | 第29-30页 |
| ·pUC18质粒的提取、酶切及去磷酸化 | 第30-31页 |
| ·酶切产物与pUC18载体连接 | 第31页 |
| ·感受态细胞的制备与连接产物的转化 | 第31-32页 |
| ·阳性克隆的筛选和鉴定 | 第32-33页 |
| ·结果与讨论 | 第33-39页 |
| ·文库筛选 | 第33-34页 |
| ·限制性内切酶的选择 | 第34页 |
| ·阳性克隆子的筛选及鉴定 | 第34-36页 |
| ·序列测定及分析 | 第36-39页 |
| ·小结 | 第39-40页 |
| 第三章 橙色红曲菌SOD基因缺失菌株的构建 | 第40-48页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·菌种和质粒 | 第40页 |
| ·主要试剂及溶液 | 第40-41页 |
| ·方法 | 第41-43页 |
| ·打靶载体的构建 | 第41页 |
| ·孢子的收集 | 第41页 |
| ·原生质体的制备 | 第41-42页 |
| ·原生质体再生 | 第42页 |
| ·原生质体转化 | 第42-43页 |
| ·转化子、筛选及鉴定 | 第43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-48页 |
| ·打靶载体的构建 | 第43-45页 |
| ·原生质体的制备及转化 | 第45页 |
| ·讨论 | 第45-48页 |
| 第四章 橙色红曲菌(AS3.4384)SOD基因在毕赤酵母中的表达 | 第48-63页 |
| ·材料 | 第48-51页 |
| ·菌种和质粒 | 第48-49页 |
| ·主要试剂及溶液 | 第49-51页 |
| ·引物设计 | 第51页 |
| ·方法 | 第51-56页 |
| ·表达载体pPIC9K-SOD的构建 | 第51页 |
| ·酵母菌株的分离纯化 | 第51页 |
| ·毕赤酵母GS115的PEG1000法转化与鉴定 | 第51-53页 |
| ·酵母重组子的摇瓶诱导表达与分析 | 第53-55页 |
| ·SOD酶活性的测定 | 第55-56页 |
| ·结果与讨论 | 第56-62页 |
| ·表达载体的构建与鉴定 | 第56-59页 |
| ·酵母菌株的分离纯化、转化及重组子的鉴定 | 第59-60页 |
| ·毕赤酵母重组子在摇瓶中诱导表达及活性测定 | 第60-62页 |
| ·小结 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 研究结论及进一步研究设想 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 个人简介 | 第71页 |