| 中文摘要 | 第1-15页 |
| 英文摘要 | 第15-19页 |
| 前言 | 第19-23页 |
| 第一章 盐生杜氏藻Dscbr基因的表达调控 | 第23-46页 |
| 1.材料和方法 | 第23-29页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·藻种 | 第23页 |
| ·盐藻培养基 | 第23-24页 |
| ·菌种 | 第24页 |
| ·试剂和试剂盒 | 第24页 |
| ·引物 | 第24页 |
| ·实验器材 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-29页 |
| ·盐生杜氏藻的培养 | 第25页 |
| ·强光胁迫下盐生杜氏藻的培养 | 第25页 |
| ·盐胁迫下盐生杜氏藻的培养 | 第25页 |
| ·盐生杜氏藻总RNA的提取及质量检测 | 第25-26页 |
| ·cDNA的合成 | 第26-27页 |
| ·内参基因的选择 | 第27页 |
| ·特异引物和内参引物的设计 | 第27页 |
| ·实时荧光定量PCR反应体系及引物特异性验证 | 第27-28页 |
| ·实时荧光定量PCR标准曲线的制作 | 第28-29页 |
| ·实时荧光定量PCR对样品的检测 | 第29页 |
| 2.结果与分析 | 第29-37页 |
| ·盐生杜氏藻总RNA的质量 | 第29-30页 |
| ·引物的各项参数 | 第30-31页 |
| ·实时荧光定量PCR反应体系及引物特异性验证 | 第31页 |
| ·实时荧光定量PCR标准曲线 | 第31-33页 |
| ·样品检测的实时荧光定量PCR结果 | 第33-35页 |
| ·实时荧光定量PCR的结果 | 第35-37页 |
| ·光强对Dscbr基因的转录调控 | 第36页 |
| ·盐度对Dscbr基因的转录调控 | 第36-37页 |
| 3.讨论 | 第37-42页 |
| ·光强对盐藻Dscbr基因的转录调控 | 第37-38页 |
| ·盐震扰对盐藻Dscbr基因的转录调控 | 第38页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第38-42页 |
| ·荧光定量PCR的原理 | 第39页 |
| ·引物设计要求 | 第39-40页 |
| ·内参的选择 | 第40-41页 |
| ·实时荧光定量PCR中的定量方法 | 第41-42页 |
| ·实时荧光定量PCR相关问题 | 第42页 |
| 4.小结 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-46页 |
| 第二章 盐生杜氏藻Dscbr基因农杆菌表达载体构建及转化拟南芥 | 第46-61页 |
| 1.材料和方法 | 第46-54页 |
| ·材料 | 第46-49页 |
| ·植物材料 | 第46页 |
| ·菌株和载体 | 第46页 |
| ·主要试剂 | 第46-47页 |
| ·试剂配方 | 第47-49页 |
| ·实验器材 | 第49页 |
| ·引物及测序 | 第49页 |
| ·方法 | 第49-54页 |
| ·盐生杜氏藻Dscbr基因ORF扩增引物的设计 | 第49页 |
| ·ORF序列的扩增 | 第49-50页 |
| ·TA克隆和测序 | 第50-52页 |
| ·表达载体pBI121-Dscbr的构建 | 第52页 |
| ·用PCR方法检测连接子 | 第52-53页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第53页 |
| ·农杆菌浸染液的培养 | 第53页 |
| ·花序浸染法转化拟南芥 | 第53页 |
| ·拟南芥无菌苗的种植 | 第53-54页 |
| 2.结果与分析 | 第54-57页 |
| ·ORF序列的扩增 | 第54-55页 |
| ·TA克隆和测序 | 第55页 |
| ·构建表达载体pBI121-Dscbr | 第55-56页 |
| ·根癌农杆菌的转化 | 第56页 |
| ·花序浸染法转化拟南芥 | 第56-57页 |
| ·拟南芥无菌苗的生长 | 第57页 |
| 3.讨论 | 第57-59页 |
| ·pBI121植物表达载体的选择和构建 | 第57-58页 |
| ·花序浸染法的优缺点及应用 | 第58-59页 |
| 4.小结 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-61页 |
| 第三章 转Dscbr基因拟南芥的筛选鉴定与功能互补分析 | 第61-72页 |
| 1.材料和方法 | 第61-64页 |
| ·材料 | 第61-62页 |
| ·植物材料 | 第61页 |
| ·无菌苗培养基 | 第61页 |
| ·实验器材 | 第61-62页 |
| ·引物合成 | 第62页 |
| ·试剂 | 第62页 |
| ·方法 | 第62-64页 |
| ·转基因拟南芥的卡那霉素抗性筛选 | 第62页 |
| ·再生植株的移栽 | 第62-63页 |
| ·CTAB法小量抽提植物总DNA | 第63页 |
| ·PCR体系及反应条件 | 第63-64页 |
| ·拟南芥的光胁迫处理 | 第64页 |
| 2.结果 | 第64-68页 |
| ·抗性转基因植株的获得 | 第64-65页 |
| ·抗性植株的移栽 | 第65-66页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第66-67页 |
| ·转基因拟南芥的表型分析 | 第67-68页 |
| 3.讨论 | 第68-70页 |
| ·转Dscbr基因拟南芥的功能分析 | 第68-69页 |
| ·转基因植物的PCR检测 | 第69-70页 |
| 4.小结 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-72页 |
| 第四章 盐生杜氏藻Dscbr基因的原核表达及其蛋白纯化 | 第72-89页 |
| 1.材料与方法 | 第72-77页 |
| ·材料 | 第72-73页 |
| ·菌种 | 第72页 |
| ·载体 | 第72页 |
| ·试剂和试剂盒 | 第72-73页 |
| ·仪器 | 第73页 |
| ·方法 | 第73-77页 |
| ·Dscbr基因ORF扩增引物的设计 | 第73页 |
| ·ORF序列的扩增 | 第73页 |
| ·TA克隆和测序 | 第73-74页 |
| ·大肠杆菌表达载体的构建 | 第74页 |
| ·SDS聚丙烯酰胺凝胶的配制 | 第74-75页 |
| ·样品的制备和电泳 | 第75-76页 |
| ·凝胶染色 | 第76页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第76-77页 |
| ·透析袋电洗脱法纯化蛋白 | 第77页 |
| 2.结果与分析 | 第77-83页 |
| ·引物参数 | 第77-78页 |
| ·ORF序列的扩增 | 第78页 |
| ·构建重组表达载体 | 第78-80页 |
| ·DsCBR融合蛋白的诱导表达 | 第80页 |
| ·融合蛋白的表达条件优化 | 第80-82页 |
| ·诱导表达的温度梯度 | 第81页 |
| ·IPTG浓度梯度诱导 | 第81-82页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第82-83页 |
| 3.讨论 | 第83-86页 |
| ·Dscbr表达载体和酶切位点的选择 | 第83-84页 |
| ·DsCBR蛋白可溶性表达的优化 | 第84-85页 |
| ·SDS-PAGE蛋白质凝胶电泳 | 第85页 |
| ·透析袋电洗脱法纯化DsCBR蛋白 | 第85-86页 |
| 4.小结 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-89页 |
| 第五章 盐藻DsCBR蛋白与光合色素的体外重组 | 第89-100页 |
| 1.材料与方法 | 第89-91页 |
| ·材料 | 第89-90页 |
| ·藻种 | 第89页 |
| ·DsCBR蛋白 | 第89页 |
| ·试剂 | 第89-90页 |
| ·实验仪器设备 | 第90页 |
| ·方法 | 第90-91页 |
| ·盐生杜氏藻的培养 | 第90页 |
| ·DsCBR蛋白浓度的测定 | 第90页 |
| ·盐藻色素的分离 | 第90页 |
| ·DsCBR蛋白与色素的重组 | 第90-91页 |
| ·LDS-PAGE电泳 | 第91页 |
| ·光谱分析 | 第91页 |
| 2.结果与分析 | 第91-94页 |
| ·DsCBR蛋白含量的测定 | 第91-92页 |
| ·BSA标准曲线的建立 | 第91页 |
| ·DsCBR蛋白含量的测定 | 第91-92页 |
| ·盐藻色素的提取 | 第92-93页 |
| ·DsCBR蛋白与色素的体外重组 | 第93页 |
| ·重组复合体的光谱分析 | 第93-94页 |
| 3.讨论 | 第94-96页 |
| ·色素提取 | 第94页 |
| ·DsCBR蛋白与光合色素的体外重组 | 第94-96页 |
| ·CBR/ELIP的光保护功能机制 | 第96页 |
| 4.小结 | 第96-98页 |
| 参考文献 | 第98-100页 |
| 结论 | 第100-104页 |
| 作者在读期间科研成果简介 | 第104-106页 |
| 致谢 | 第106-108页 |
| 综述 光胁迫相关蛋白CBR/ELIPs的研究进展 | 第108-141页 |
| 1.ELIPs/CBR的概况 | 第108-115页 |
| ·ELIPs的发现 | 第108-110页 |
| ·ELIP亚家族:原核和真核生物的ELIP-like蛋白 | 第110-112页 |
| ·ELIPs/CBR的结构特点 | 第112-113页 |
| ·ELIPs相关蛋白的分子进化模型 | 第113-115页 |
| 2.表达调控 | 第115-120页 |
| ·光受体 | 第115页 |
| ·转录调节 | 第115-118页 |
| ·光强和光质调节ELIP的表达 | 第115-116页 |
| ·温度调节ELIP表达 | 第116页 |
| ·盐度调节ELIP表达 | 第116-117页 |
| ·发育调节ELIP表达 | 第117页 |
| ·植物激素、除草剂调节ELIP表达 | 第117-118页 |
| ·参与ELIP表达的细胞核和细胞质因子 | 第118页 |
| ·翻译后调节 | 第118-120页 |
| ·ELIP整合到类囊体膜上 | 第118-119页 |
| ·ELIP在光胁迫条件下的稳定 | 第119页 |
| ·光恢复过程中ELIPs的降解 | 第119-120页 |
| 3.ELIPs的功能及机制 | 第120-126页 |
| ·ELIPs的光保护功能 | 第120-121页 |
| ·ELIPs的光保护机制——"色素载体"蛋白 | 第121-126页 |
| ·ELIPs:临时的色素结合蛋白 | 第122-123页 |
| ·ELIPs在色素蛋白转换加快时的积累 | 第123-125页 |
| ·ELIPs在蛋白体复合物装配和去装配区域中的定位 | 第125页 |
| ·ELIPs在叶黄素循环中的作用 | 第125-126页 |
| 4.光合生物的光保护机制 | 第126-128页 |
| ·类胡萝卜素的光保护机制 | 第126页 |
| ·与叶黄素循环有关的非光化学电子激发态淬灭机制 | 第126-128页 |
| 5.捕光色素蛋白复合体(LHC) | 第128-132页 |
| ·LHCII的组成 | 第128-129页 |
| ·结构特点 | 第129-130页 |
| ·主要功能 | 第130页 |
| ·色素蛋白复合物的多样性 | 第130-132页 |
| 参考文献 | 第132-141页 |
