中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-8页 |
1 前言 | 第8-25页 |
·花青素概述 | 第8-9页 |
·影响花色素苷表现的内在因素 | 第9-10页 |
·花色素苷的结构 | 第9页 |
·细胞的 PH 值 | 第9-10页 |
·共色作用 | 第10页 |
·金属络合物的影响 | 第10页 |
·花瓣细胞形状 | 第10页 |
·外界环境影响 | 第10页 |
·花色素合成途径及相关研究 | 第10-16页 |
·花色素的生物合成途径 | 第10-12页 |
·花色素生物合成的遗传和生物化学 | 第12页 |
·花色素生物合成所需的结构基因 | 第12-16页 |
·查尔酮合成酶(CHS) | 第12-13页 |
·查尔酮异构酶(CH I) | 第13页 |
1 3.3.3 黄烷酮3 一羟化酶(F3H) | 第13-14页 |
1 3.3.4 类黄酮3’羟化酶(F3’H) | 第14页 |
1 3.3.5 类黄酮3’5’羟化酶(F3’5’H) | 第14页 |
1 3.3.6 黄烷酮醇还原酶(DFR) | 第14-15页 |
1 3.3.7 花色素合成酶(ANS) | 第15页 |
1 3.3.8 花色素苷糖基转移酶(3GT) | 第15-16页 |
1 3.3.9 花色素苷甲基转移酶(AMT) | 第16页 |
1 3.3.10 其它结构基因 | 第16页 |
·花色素生物合成所需的调节基因 | 第16-23页 |
·花色素生物合成所需的转录因子的分类与结构特点 | 第16-19页 |
·花色素苷转录调节因子的调控机制 | 第19-23页 |
·苯丙氨酸代谢途径和其类黄酮分支途径的调节 | 第19-22页 |
·利用转录因子修饰类黄酮的代谢 | 第22-23页 |
·花色素合成调控机制的假说 | 第23-24页 |
·本研究的目的和意义 | 第24页 |
·本研究的技术路线 | 第24-25页 |
2 材料与方法 | 第25-40页 |
·材料与试剂 | 第25页 |
·材料 | 第25页 |
·菌种 | 第25页 |
·试剂 | 第25页 |
·仪器设备 | 第25页 |
·紫色马铃薯MYC、MYB 基因的克隆 | 第25-27页 |
·紫色马铃薯紫皮 RNA 勺提取 | 第25-27页 |
·RNA 电泳检测 | 第27页 |
·引物的设计 | 第27-28页 |
·克隆马铃薯MYC 基因的引物设计 | 第27-28页 |
·保守区的引物设计 | 第27页 |
·cDNA 片段末端扩增引物的设计 | 第27-28页 |
·马铃薯MYB 基因的引物设计 | 第28页 |
·马铃薯MYB 保守区引物设计 | 第28页 |
·PCR 反应体系的建立 | 第28-32页 |
·马铃薯MYC 基因片段PCR 扩增体系的建立 | 第28-31页 |
·马铃薯 MYC 基因保守区域的克隆 | 第28-29页 |
·电泳(196的琼脂糖凝胶电泳检测 DNA 的纯度和浓度) | 第29页 |
·紫色马铃薯 MYC 基因 3'端的 PCR 扩增体系 | 第29-31页 |
·马铃薯 MYB 基因片段 PCR 扩增体系的建立 | 第31-32页 |
·马铃薯 MYB 基因保守区域片段的 PCR 反应体系 | 第31-32页 |
·目的基因的克隆与测序 | 第32-37页 |
·目的片段的回收(DNA 琼脂糖凝胶回收试剂盒购自TIANGEN) | 第32-33页 |
·目的片段与 T 载体的连接 | 第33页 |
·大肠杆菌感受态的制备 | 第33页 |
·大肠杆菌感受态的检测和转化方法 | 第33-34页 |
·小量提取质粒(《分子克隆实验指南》2002) | 第34-35页 |
·大量提取质粒 | 第35-36页 |
·聚乙二醇沉淀法纯化质粒 DNA | 第36-37页 |
·重组子的酶切鉴定 | 第37页 |
·重组子的保存及测序 | 第37页 |
·测序 | 第37页 |
·核酸序列分析 | 第37-38页 |
·基于 Blastn 软件的核酸同源性分析 | 第37-38页 |
·cDNA 序列开放阅读框分析 | 第38页 |
·蛋白质功能预测 | 第38-40页 |
·基于 Blastx 软件的蛋白质同源性分析 | 第38页 |
·蛋白质的结构功能域分析 | 第38页 |
·蛋白质序列之间的多重比对及分子进化分析 | 第38-40页 |
3 结果与分析 | 第40-57页 |
·紫色马铃薯 MYC 基因的克隆 | 第40-51页 |
·MYC 基因保守区域的克隆 | 第40页 |
·测序结果及序列分析 | 第40-42页 |
·测序结果 | 第40-41页 |
·基于 Blastn 软件的核酸同源序列分析 | 第41-42页 |
·马铃薯 MYC 基因cDNA 片段3’端的克隆 | 第42-44页 |
·测序结果 | 第42-43页 |
·基于 BIastn 软件的核酸同源序列分析 | 第43-44页 |
·马铃薯 MYC 基因阅读框架分析 | 第44-46页 |
·Stmy(:基冈全长阅读框架分析 | 第44-46页 |
·蛋白质功能预测 | 第46-48页 |
·基于 Blastx 软件的蛋白质同源性分析 | 第46-47页 |
·蛋白质的结构功能域分析 | 第47-48页 |
·蛋白质功能预测 | 第48页 |
·蛋白质序列之间的多重比对及分子进化分析 | 第48-51页 |
·蛋白质序列之间的多重对齐 | 第48-50页 |
·分子进化分析 | 第50-51页 |
·紫色马铃薯MYB 基因的克隆 | 第51-57页 |
·马铃薯 MYB 基因保守区域的克隆 | 第51-52页 |
·测序结果及序列分析 | 第52-57页 |
·测序结果 | 第52-53页 |
·序列分析 | 第53页 |
·马铃薯Stmy621 1 片段编码保守区域蛋白的分子进化树 | 第53-54页 |
·蛋白质的结构功能域分析 | 第54-55页 |
·序列分析 | 第55页 |
·马铃薯 Stmy6280 片段编码保守区域蛋白的分子进化树 | 第55-56页 |
·蛋白质的结构功能域分析 | 第56-57页 |
4 讨论 | 第57-58页 |
5 结论 | 第58-59页 |
6 参考文献 | 第59-67页 |
7 致谢 | 第67页 |